| 摘要 | 第3-4页 |
| ABSTRACT | 第4-5页 |
| 第一章 引言 | 第8-20页 |
| 1 人EpCAM概述 | 第8-12页 |
| 1.1 人EpCAM基因及蛋白结构 | 第8-10页 |
| 1.2 人EpCAM的表达及其与癌症的关系 | 第10页 |
| 1.3 人EpCAM的功能 | 第10-11页 |
| 1.4 人EpCAM的抗体研究概述 | 第11-12页 |
| 2 噬菌体展示技术研究概述 | 第12-16页 |
| 2.1 噬菌体展示技术的基本原理 | 第13页 |
| 2.2 噬菌体展示系统的类型 | 第13-14页 |
| 2.3 噬菌体展示技术的优缺点 | 第14页 |
| 2.4 噬菌体展示筛选的方法及流程 | 第14-15页 |
| 2.5 噬菌体展示技术的应用 | 第15-16页 |
| 3 单域抗体的研究概述 | 第16-20页 |
| 3.1 抗体及抗体库技术简介 | 第16-17页 |
| 3.2 单域抗体的结构特点 | 第17-18页 |
| 3.3 单域抗体的研究情况概述 | 第18-20页 |
| 第二章 材料与方法 | 第20-32页 |
| 1 实验材料 | 第20-24页 |
| 1.1 实验仪器 | 第20-21页 |
| 1.2 实验试剂 | 第21-22页 |
| 1.3 细菌及载体 | 第22页 |
| 1.4 溶液及培养基配制 | 第22-24页 |
| 2 实验方法 | 第24-32页 |
| 2.1 人源VH噬菌体单域抗体库的构建 | 第24页 |
| 2.2 辅助噬菌体的扩增 | 第24-25页 |
| 2.3 辅助噬菌体滴度的测定以及胰蛋白酶酶切位点的检测 | 第25-26页 |
| 2.4 噬菌体抗体库的扩增及滴度测定 | 第26-27页 |
| 2.5 单域抗体的筛选过程 | 第27-28页 |
| 2.6 阳性噬菌体的富集程度的鉴定 | 第28-29页 |
| 2.7 噬菌体单克隆的表达及扩增 | 第29-30页 |
| 2.8 单克隆噬菌体ELISA | 第30页 |
| 2.9 阳性抗体克隆的基因测序 | 第30页 |
| 2.10 统计学分析 | 第30-32页 |
| 第三章 实验结果 | 第32-44页 |
| 1 辅助噬菌体的扩增、滴度测定及胰蛋白酶酶切位点的检测 | 第32页 |
| 2 噬菌体抗体库的扩增及其滴度测定 | 第32-33页 |
| 3 抗EpCAM的单域抗体的筛选 | 第33-34页 |
| 4 EpCAM特异性结合的噬菌体结合能力分析 | 第34-35页 |
| 5 阳性的单克隆噬菌体的初步鉴定 | 第35-38页 |
| 6 阳性的单克隆噬菌体的重新表达并重新验证 | 第38-40页 |
| 7 进一步检测可能的阳性抗体克隆与抗原结合的特异性及亲合力 | 第40-41页 |
| 8 阳性抗体克隆的测序分析 | 第41-42页 |
| 9 阳性抗体与完整EpCAM胞外段的结合检测 | 第42-44页 |
| 第四章 讨论 | 第44-48页 |
| 1 辅助噬菌体以及噬菌体抗体文库的扩增。 | 第45页 |
| 2 抗体筛选条件的选择与优化 | 第45-46页 |
| 3 抗EpCAM单域抗体的选定 | 第46页 |
| 4 阳性抗体克隆的测序分析 | 第46页 |
| 5 后续的阳性抗体的抗癌活性的研究 | 第46-48页 |
| 第五章 结论与展望 | 第48-49页 |
| 1 实验总结 | 第48页 |
| 2 实验展望 | 第48-49页 |
| 参考文献 | 第49-56页 |
| 附录 英文缩略词表 | 第56-58页 |
| 在校期间发表论文情况 | 第58-59页 |
| 致谢 | 第59页 |
