| 摘要 | 第3-5页 |
| abstract | 第5-7页 |
| 缩略语表 | 第8-12页 |
| 第一章 前言 | 第12-19页 |
| 1.1 赭曲霉毒素的研究进展 | 第12-15页 |
| 1.1.1 赭曲霉毒素的来源及毒性 | 第12页 |
| 1.1.2 赭曲霉毒素A的理化性质 | 第12-13页 |
| 1.1.3 赭曲霉毒素A临床症状及机理 | 第13页 |
| 1.1.4 OTA的卫生限量标准 | 第13-14页 |
| 1.1.5 OTA的检测方法 | 第14-15页 |
| 1.1.5.1 高效液相色谱法 | 第14页 |
| 1.1.5.2 薄层色谱法 | 第14-15页 |
| 1.1.5.3 胶体金免疫层析技术 | 第15页 |
| 1.1.5.4 酶联免疫吸附测定法 | 第15页 |
| 1.2 脲酶理化性质概述 | 第15-16页 |
| 1.3 基于脲酶介导的pH响应ELISA的概述 | 第16-17页 |
| 1.3.1 pH响应ELISA技术原理 | 第16页 |
| 1.3.2 pH响应ELISA技术特点及应用 | 第16-17页 |
| 1.4 基于脲酶介导的等离子共振ELISA(p–ELISA)的概述 | 第17-19页 |
| 1.4.1 表面等离子共振 | 第17页 |
| 1.4.2 常见调控的金纳米粒子SPR的方法 | 第17-18页 |
| 1.4.2.1 生长法 | 第17页 |
| 1.4.2.2 聚集法 | 第17-18页 |
| 1.4.2.3 刻蚀法 | 第18页 |
| 1.4.2.4 金属化法 | 第18页 |
| 1.4.3 pELISA检测方法的特点和应用 | 第18-19页 |
| 第二章 基于脲酶介导pH响应ELISA的建立及应用 | 第19-32页 |
| 2.1 前言 | 第19-20页 |
| 2.2 材料与仪器 | 第20-21页 |
| 2.2.1 试剂及材料 | 第20页 |
| 2.2.2 仪器设备 | 第20页 |
| 2.2.3 试剂的配制 | 第20-21页 |
| 2.3 实验方法 | 第21-24页 |
| 2.3.1 pH响应ELISA可行性实验的验证 | 第21页 |
| 2.3.2 Urease与OTA偶联物的合成、表征及BCP的配制 | 第21-22页 |
| 2.3.2.1 赭曲霉毒素人工抗原合成 | 第21-22页 |
| 2.3.2.2 溴甲酚紫显色液的配制 | 第22页 |
| 2.3.3 pH响应ELISA的操作步骤 | 第22页 |
| 2.3.4 pH响应ELISA实验条件的优化 | 第22-23页 |
| 2.3.4.1 棋盘法优化酶标抗原和抗体的用量 | 第22页 |
| 2.3.4.2 免疫学反应中pH值的优化 | 第22-23页 |
| 2.3.4.3 免疫学反应甲醇浓度的优化 | 第23页 |
| 2.3.4.4 底物浓度的优化 | 第23页 |
| 2.3.4.5 底物反应温度的优化 | 第23页 |
| 2.3.4.6 酶催化反应时间的优化 | 第23页 |
| 2.3.5 pH响应ELISA检测性能分析 | 第23-24页 |
| 2.3.5.1 实验的灵敏度和特异性的评价 | 第23页 |
| 2.3.5.2 与传统的HRP-ELISA方法学的比较 | 第23-24页 |
| 2.3.5.3 pH响应ELISA实际样本检测性能评价 | 第24页 |
| 2.4 结果与讨论 | 第24-31页 |
| 2.4.1 概念验证 | 第24-25页 |
| 2.4.2 Urease与OTA偶联物的表征 | 第25-26页 |
| 2.4.3 优化pH响应ELISA参数 | 第26-28页 |
| 2.4.3.1 棋盘法优化抗原、抗体的用量 | 第26-27页 |
| 2.4.3.2 优化影响免疫学反应的其他条件 | 第27-28页 |
| 2.4.4 pH响应ELISA检测性能分析 | 第28-31页 |
| 2.4.4.1 实验的灵敏度和特异性评价 | 第28页 |
| 2.4.4.2 与传统的HRP-ELISA方法学的比较 | 第28-29页 |
| 2.4.4.3 pH响应ELISA准确度与精密度评价 | 第29-31页 |
| 2.5 本章小结 | 第31-32页 |
| 第三章 基于脲酶介导pELISA的建立及应用 | 第32-46页 |
| 3.1 前言 | 第32-33页 |
| 3.2 材料与仪器 | 第33页 |
| 3.2.1 试剂及材料 | 第33页 |
| 3.2.2 仪器设备 | 第33页 |
| 3.3 实验方法 | 第33-36页 |
| 3.3.1 pELISA可行性验证实验 | 第33-34页 |
| 3.3.2 OTA与Urease偶联物的制备及表征 | 第34页 |
| 3.3.3 金纳米花的合成及表征 | 第34页 |
| 3.3.4 pELISA的操作步骤 | 第34-35页 |
| 3.3.5 实验相关参数的优化 | 第35页 |
| 3.3.5.1 棋盘法优化酶标抗原和抗体的用量 | 第35页 |
| 3.3.5.2 免疫学反应其他条件的优化 | 第35页 |
| 3.3.6 pELISA检测性能分析 | 第35-36页 |
| 3.3.6.1 实验的灵敏度的评价 | 第35-36页 |
| 3.3.6.2 与传统的HRP-ELISA方法学的比较 | 第36页 |
| 3.3.6.3 实验特异性评价 | 第36页 |
| 3.3.6.4 pELISA实际样本检测性能评价 | 第36页 |
| 3.4 结果与讨论 | 第36-44页 |
| 3.4.1 实验可行性验证 | 第36-37页 |
| 3.4.2 Urease@OTA偶联物的制备及表征 | 第37-38页 |
| 3.4.3 pELISA中各参数的优化 | 第38-40页 |
| 3.4.3.1 棋盘法优化酶标抗原、抗体的用量 | 第38-39页 |
| 3.4.3.2 免疫学反应其他条件的优化 | 第39-40页 |
| 3.4.4 pELISA检测性能分析 | 第40-44页 |
| 3.4.4.1 常规HRP-ELISA与pELISA的灵敏度评价 | 第40-42页 |
| 3.4.4.2 pELISA的特异性评价 | 第42页 |
| 3.4.4.3 pELISA实际样本检测性能评价 | 第42-44页 |
| 3.5 本章小结 | 第44-46页 |
| 第四章 结论与展望 | 第46-48页 |
| 4.1 结论 | 第46-47页 |
| 4.1.1 pH响应ELISA的建立以及应用 | 第46页 |
| 4.1.2 pELISA的建立以及应用 | 第46-47页 |
| 4.2 展望 | 第47-48页 |
| 致谢 | 第48-49页 |
| 参考文献 | 第49-55页 |
| 附录1 试剂材料 | 第55-57页 |
| 附录2 仪器设备 | 第57-58页 |
| 个人介绍 | 第58页 |
| 攻读学位期间的研究成果 | 第58-59页 |
| 彩图 | 第59-68页 |
