摘要 | 第3-5页 |
abstract | 第5-6页 |
1 引言 | 第10-16页 |
1.1 沙葱萤叶甲 | 第10页 |
1.2 昆虫中的海藻糖 | 第10-14页 |
1.2.1 海藻糖概述 | 第10-11页 |
1.2.2 海藻糖的合成途径 | 第11-12页 |
1.2.3 海藻糖与昆虫抗逆性的关系 | 第12-13页 |
1.2.4 海藻糖合成相关基因 | 第13-14页 |
1.3 研究目的及意义 | 第14-16页 |
2 沙葱萤叶甲海藻糖合成相关基因全长CDNA的克隆与序列分析 | 第16-44页 |
2.1 材料与方法 | 第16-21页 |
2.1.1 供试昆虫 | 第16页 |
2.1.2 主要试剂及仪器 | 第16-19页 |
2.1.3 实验方法 | 第19-21页 |
2.2 沙葱萤叶甲海藻糖合成相关基因的分析与克隆 | 第21-30页 |
2.2.1 海藻糖合成酶TPS基因5’末端和3’末端cDNA克隆 | 第21-26页 |
2.2.2 海藻糖磷酸酶TPP基因5’末端cDNA克隆 | 第26-29页 |
2.2.3 海藻糖合成相关基因的序列分析 | 第29-30页 |
2.3 结果与分析 | 第30-42页 |
2.3.1 沙葱萤叶甲RNA的提取 | 第30页 |
2.3.2 沙葱萤叶甲海藻糖合成相关酶基因的克隆 | 第30-32页 |
2.3.3 沙葱萤叶甲海藻糖合成相关基因的生物信息学分析 | 第32-35页 |
2.3.4 沙葱萤叶甲海藻糖合成相关基因编码蛋白质特性分析 | 第35-38页 |
2.3.5 沙葱萤叶甲海藻糖合成相关基因同源比对及系统进化分析 | 第38-42页 |
2.4 讨论 | 第42-44页 |
3 沙葱萤叶甲GdTPS和GdTPP对温度胁迫的响应 | 第44-52页 |
3.1 材料与方法 | 第44-46页 |
3.1.1 供试昆虫 | 第44页 |
3.1.2 主要试剂及仪器 | 第44页 |
3.1.3 实验方法 | 第44-45页 |
3.1.4 沙葱萤叶甲GdTPS在不同温度处理下的表达 | 第45页 |
3.1.5 沙葱萤叶甲GdTPP在不同温度处理下的表达 | 第45-46页 |
3.1.6 数据统计与分析 | 第46页 |
3.2 结果与分析 | 第46-49页 |
3.2.1 沙葱萤叶甲GdTPS在不同温度处理下的表达 | 第46-48页 |
3.2.2 沙葱萤叶甲GdTPP在不同温度处理下的表达 | 第48-49页 |
3.3 讨论 | 第49-52页 |
3.3.1 沙葱萤叶甲GdTPS在不同温度处理下的表达 | 第49-50页 |
3.3.2 沙葱萤叶甲GdTPP在不同温度处理下的表达 | 第50-52页 |
4 沙葱萤叶甲GdTPP的原核表达 | 第52-57页 |
4.1 材料与方法 | 第52-55页 |
4.1.1 主要试剂及仪器 | 第52页 |
4.1.2 主要溶液的配置 | 第52页 |
4.1.3 实验方法 | 第52-53页 |
4.1.4 原核表达载体的构建 | 第53-54页 |
4.1.5 重组质粒转化大肠杆菌表达菌株BL | 第54页 |
4.1.6 诱导表达 | 第54页 |
4.1.7 SDS—聚丙烯酰胺凝胶电泳 | 第54-55页 |
4.2 结果与分析 | 第55-56页 |
4.2.1 重组质粒pET-GdTPP的鉴定 | 第55页 |
4.2.2 重组蛋白在大肠杆菌BL21(DE3)中的诱导表达 | 第55-56页 |
4.3 讨论 | 第56-57页 |
致谢 | 第57-58页 |
参考文献 | 第58-65页 |
作者简介 | 第65页 |