| 摘要 | 第3-4页 |
| abstract | 第4-5页 |
| 缩略词表 | 第9-10页 |
| 1 引言 | 第10-18页 |
| 1.1 克隆与转基因技术介绍 | 第10-12页 |
| 1.1.1 动物克隆技术的研究进展 | 第10页 |
| 1.1.2 转基因技术的研究进展 | 第10-11页 |
| 1.1.3 转基因克隆技术的应用 | 第11-12页 |
| 1.2 黄体的研究进展 | 第12-14页 |
| 1.2.1 黄体的发生与调控 | 第12页 |
| 1.2.2 黄体的功能介绍 | 第12-13页 |
| 1.2.3 黄体在动物妊娠维持中的作用 | 第13-14页 |
| 1.2.4 黄体的功能不全对动物妊娠维持的影响 | 第14页 |
| 1.3 miRNA的研究进展 | 第14-17页 |
| 1.3.1 miRNA概述 | 第14页 |
| 1.3.2 miRNA的形成机理 | 第14-15页 |
| 1.3.3 miRNA的作用机制 | 第15-16页 |
| 1.3.4 miRNA在动物发育调控中的作用 | 第16-17页 |
| 1.4 研究的目的意义及内容 | 第17-18页 |
| 2 妊娠异常克隆牛和正常牛黄体中差异表达miRNA的筛选 | 第18-39页 |
| 2.1 实验材料 | 第18-19页 |
| 2.1.1 研究对象 | 第18页 |
| 2.1.2 主要仪器设备 | 第18-19页 |
| 2.1.3 主要试剂 | 第19页 |
| 2.2 方法 | 第19-24页 |
| 2.2.1 样品采集 | 第19页 |
| 2.2.2 总RNA提取与质检 | 第19-20页 |
| 2.2.3 miRNAIllumina平台测序 | 第20-21页 |
| 2.2.4 差异表达miRNA验证 | 第21-23页 |
| 2.2.5 统计分析 | 第23-24页 |
| 2.3 结果与分析 | 第24-38页 |
| 2.3.1 测序样本总RNA质检结果 | 第24-25页 |
| 2.3.2 miRNA测序样本相关性检测 | 第25-27页 |
| 2.3.3 miRNA测序结果长度分析 | 第27页 |
| 2.3.4 小RNA分类注释 | 第27-28页 |
| 2.3.5 miRNA在实验组和对照组间差异表达分析 | 第28-31页 |
| 2.3.6 候选差异miRNA荧光定量验证(已知miRNA的体内水平检测) | 第31-32页 |
| 2.3.7 靶基因的GO分类与富集分析结果 | 第32-34页 |
| 2.3.8 靶基因的KEGG富集分析结果 | 第34-36页 |
| 2.3.9 实验组和对照组中差异miRNA靶基因的预测及相关信号通路 | 第36-38页 |
| 2.4 讨论 | 第38页 |
| 2.5 小结 | 第38-39页 |
| 3 妊娠维持相关候选靶基因的定量PCR验证及分析 | 第39-47页 |
| 3.1 材料 | 第39页 |
| 3.1.1 研究对象 | 第39页 |
| 3.1.2 主要仪器 | 第39页 |
| 3.1.3 主要试剂 | 第39页 |
| 3.2 方法 | 第39-42页 |
| 3.2.1 相关mRNA表达水平的验证 | 第39-42页 |
| 3.3 结果与分析 | 第42-45页 |
| 3.3.1 总RNA反转录结果 | 第42页 |
| 3.3.2 引物选择 | 第42-43页 |
| 3.3.3 荧光定量PCR结果 | 第43-45页 |
| 3.4 讨论 | 第45-47页 |
| 3.4.1 细胞凋亡通路 | 第45-46页 |
| 3.4.2 miRNA-mRNA作用机制的探索 | 第46-47页 |
| 3.5 小结 | 第47页 |
| 4 全文结论 | 第47-48页 |
| 致谢 | 第48-49页 |
| 参考文献 | 第49-55页 |
| 作者简介 | 第55页 |
