摘要 | 第4-5页 |
Abstract | 第5页 |
1 引言 | 第11-17页 |
1.1 花色形成机理 | 第11-12页 |
1.1.1 花色素种类 | 第11页 |
1.1.2 花色苷及其合成途径 | 第11-12页 |
1.2 查尔酮合成酶研究进展 | 第12-14页 |
1.2.1 查尔酮合成酶基因的结构 | 第12-13页 |
1.2.2 查尔酮合成酶蛋白结构及作用底物 | 第13页 |
1.2.3 查尔酮合成酶基因的时空表达 | 第13页 |
1.2.4 查尔酮合成酶转基因在改变花色中的研究进展 | 第13-14页 |
1.3 VIGS在观赏植物功能基因研究的进展 | 第14-15页 |
1.3.1 VIGS的机制 | 第14页 |
1.3.2 VIGS在观赏植物功能基因研究的应用 | 第14-15页 |
1.4 中国石竹分子生物学研究进展 | 第15-16页 |
1.5 本研究的目的和意义 | 第16-17页 |
2 材料与方法 | 第17-22页 |
2.1 植物材料 | 第17页 |
2.2 石竹花瓣总RNA的提取 | 第17-18页 |
2.3 克隆CHS基因 | 第18-19页 |
2.3.1 合成c DNA第一链 | 第18页 |
2.3.2 PCR扩增目的片段 | 第18页 |
2.3.3 目的片段的纯化 | 第18页 |
2.3.4 与经Eco RI酶切后的测序载体连接 | 第18页 |
2.3.5 转化 | 第18-19页 |
2.3.6 测序及比对 | 第19页 |
2.3.7 3’RACE | 第19页 |
2.4 不同花色及花蕾不同发育时期的q RT-PCR分析 | 第19-20页 |
2.5 构建表达载体 | 第20页 |
2.5.1 靠近 3’端的CHS基因片段扩增 | 第20页 |
2.5.2 酶切 | 第20页 |
2.5.3 连接 | 第20页 |
2.5.4 转化 | 第20页 |
2.6 重组质粒转化 | 第20-21页 |
2.7 侵染 | 第21页 |
2.8 qRT-PCR检测 | 第21-22页 |
3 结果与分析 | 第22-31页 |
3.1 中国石竹CHS片段的克隆 | 第22-23页 |
3.2 CHS基因的 3’端克隆 | 第23-25页 |
3.3 不同花色及花蕾不同发育时期CHS基因的表达分析 | 第25-26页 |
3.4 靠近 3’端的CHS基因片段克隆 | 第26-27页 |
3.5 构建表达载体并转入GV3101 | 第27-28页 |
3.6 CHS基因沉默植株的表型分析 | 第28-29页 |
3.7 石竹花瓣CHS基因沉默的qRT-PCR检测 | 第29-31页 |
4 讨论 | 第31-32页 |
5 结论 | 第32-33页 |
致谢 | 第33-34页 |
参考文献 | 第34-41页 |
作者简介 | 第41页 |