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中国石竹查尔酮合成酶基因克隆、鉴定及表达分析

摘要第4-5页
Abstract第5页
1 引言第11-17页
    1.1 花色形成机理第11-12页
        1.1.1 花色素种类第11页
        1.1.2 花色苷及其合成途径第11-12页
    1.2 查尔酮合成酶研究进展第12-14页
        1.2.1 查尔酮合成酶基因的结构第12-13页
        1.2.2 查尔酮合成酶蛋白结构及作用底物第13页
        1.2.3 查尔酮合成酶基因的时空表达第13页
        1.2.4 查尔酮合成酶转基因在改变花色中的研究进展第13-14页
    1.3 VIGS在观赏植物功能基因研究的进展第14-15页
        1.3.1 VIGS的机制第14页
        1.3.2 VIGS在观赏植物功能基因研究的应用第14-15页
    1.4 中国石竹分子生物学研究进展第15-16页
    1.5 本研究的目的和意义第16-17页
2 材料与方法第17-22页
    2.1 植物材料第17页
    2.2 石竹花瓣总RNA的提取第17-18页
    2.3 克隆CHS基因第18-19页
        2.3.1 合成c DNA第一链第18页
        2.3.2 PCR扩增目的片段第18页
        2.3.3 目的片段的纯化第18页
        2.3.4 与经Eco RI酶切后的测序载体连接第18页
        2.3.5 转化第18-19页
        2.3.6 测序及比对第19页
        2.3.7 3’RACE第19页
    2.4 不同花色及花蕾不同发育时期的q RT-PCR分析第19-20页
    2.5 构建表达载体第20页
        2.5.1 靠近 3’端的CHS基因片段扩增第20页
        2.5.2 酶切第20页
        2.5.3 连接第20页
        2.5.4 转化第20页
    2.6 重组质粒转化第20-21页
    2.7 侵染第21页
    2.8 qRT-PCR检测第21-22页
3 结果与分析第22-31页
    3.1 中国石竹CHS片段的克隆第22-23页
    3.2 CHS基因的 3’端克隆第23-25页
    3.3 不同花色及花蕾不同发育时期CHS基因的表达分析第25-26页
    3.4 靠近 3’端的CHS基因片段克隆第26-27页
    3.5 构建表达载体并转入GV3101第27-28页
    3.6 CHS基因沉默植株的表型分析第28-29页
    3.7 石竹花瓣CHS基因沉默的qRT-PCR检测第29-31页
4 讨论第31-32页
5 结论第32-33页
致谢第33-34页
参考文献第34-41页
作者简介第41页

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