| 中文摘要 | 第7-9页 |
| Abstract | 第9-10页 |
| 第一章 文献综述 | 第12-25页 |
| 1.1 植物促分裂原活化蛋白激酶级联途径的组成 | 第12-16页 |
| 1.1.1 植物中的 MAPKKKs | 第12-13页 |
| 1.1.2 植物中的 MAPKKs | 第13-16页 |
| 1.1.3 植物中的 MAPKs | 第16页 |
| 1.2 植物 MAPK 级联途径的生物学功能 | 第16-19页 |
| 1.2.1 MAPK 级联途径在植物逆境反应中的作用 | 第16-17页 |
| 1.2.2 MAPK 级联途径参与调控生物胁迫 | 第17页 |
| 1.2.3 MAPK 级联途径参与调控非生物胁迫 | 第17-18页 |
| 1.2.4 MAPK 级联途径参与其它调控过程 | 第18-19页 |
| 1.3 启动子概述 | 第19-23页 |
| 1.3.1 植物启动子的结构和分类 | 第19-21页 |
| 1.3.2 植物启动子功能的分析方法 | 第21-22页 |
| 1.3.3 报告基因在植物启动子研究中的应用 | 第22-23页 |
| 1.3.4 启动子中与胁迫相关顺式作用元件研究进展 | 第23页 |
| 1.4 本研究的目的和意义 | 第23-25页 |
| 第二章 材料和方法 | 第25-40页 |
| 2.1 油菜中 C 类 MAPK 激酶基因 BnMKK4 的分离及生物信息学分析 | 第25-29页 |
| 2.1.1 实验材料 | 第25页 |
| 2.1.2 油菜总 RNA 提取 | 第25页 |
| 2.1.3 BnMKK4 基因 cDNA 部分片段的克隆 | 第25-26页 |
| 2.1.4 RACE 方法克隆 BnMKK4 基因全长 | 第26-28页 |
| 2.1.5 BnMKK4 基因序列的生物信息学分析 | 第28-29页 |
| 2.2 BnMKK4 的转录水平表达分析 | 第29-30页 |
| 2.2.1 实验材料与胁迫处理 | 第29页 |
| 2.2.2 RNA 反转录 | 第29-30页 |
| 2.2.3 实时荧光定量 PCR | 第30页 |
| 2.3 BnMKK4 的亚细胞定位 | 第30-32页 |
| 2.3.1 pBI121-BnMKK4-GFP 表达载体的构建 | 第30-31页 |
| 2.3.2 农杆菌感受态的制备 | 第31页 |
| 2.3.3 冻融法转化农杆菌 | 第31-32页 |
| 2.3.4 BnMKK4-GFP 融合蛋白的表达 | 第32页 |
| 2.4 BnMKK4 基因启动子的克隆及序列分析 | 第32-35页 |
| 2.4.1 油菜基因组总 DNA 提取 | 第32页 |
| 2.4.2 染色体步移法分离 BnMKK4 基因启动子 | 第32-35页 |
| 2.4.3 BnMKK4 基因启动子序列的验证 | 第35页 |
| 2.4.4 BnMKK4 基因启动子序列分析 | 第35页 |
| 2.5 BnMKK4 启动子功能区鉴定 | 第35-37页 |
| 2.5.1 引物设计 | 第35-36页 |
| 2.5.2 目的片段的制备 | 第36页 |
| 2.5.3 重组质粒和 pCAMBIA-1302 质粒双酶切 | 第36页 |
| 2.5.4 表达载体的构建 | 第36-37页 |
| 2.5.5 报告基因 GFP 的表达 | 第37页 |
| 2.6 BnMKK4 启动子活性研究 | 第37页 |
| 2.7 UV-B 胁迫对两种油菜生理指标的影响 | 第37-40页 |
| 2.7.1 实验材料与 UV-B 胁迫处理 | 第37-38页 |
| 2.7.2 各项生理指标的测定方法 | 第38-39页 |
| 2.7.3 数据分析 | 第39-40页 |
| 第三章 结果与分析 | 第40-67页 |
| 3.1 油菜中 C 类 MAPK 激酶基因 BnMKK4 的分离及生物信息学分析 | 第40-51页 |
| 3.1.1 油菜总 RNA 提取 | 第40页 |
| 3.1.2 BnMKK4 基因 cDNA 部分片段的克隆 | 第40-41页 |
| 3.1.3 RACE 方法克隆 BnMKK4 基因全长 | 第41-42页 |
| 3.1.4 BnMKK4 基因序列的生物信息学分析 | 第42-51页 |
| 3.2 BnMKK4 的转录水平表达分析 | 第51-53页 |
| 3.2.1 标准曲线的制作 | 第51页 |
| 3.2.2 低温胁迫下两种油菜不同组织中 BnMKK4 基因的表达量分析 | 第51页 |
| 3.2.3 低温和高盐胁迫下两种油菜叶片中 BnMKK4 基因的相对表达量 | 第51-53页 |
| 3.3 BnMKK4 的亚细胞定位 | 第53-54页 |
| 3.3.1 pBI121-BnMKK4-GFP 表达载体的构建 | 第53页 |
| 3.3.2 BnMKK4-GFP 融合蛋白的表达 | 第53-54页 |
| 3.4 BnMKK4 基因启动子的克隆及序列分析 | 第54-58页 |
| 3.4.1 油菜基因组总 DNA 提取 | 第54页 |
| 3.4.2 染色体步移法分离 BnMKK4 基因启动子 | 第54-56页 |
| 3.4.3 BnMKK4 基因启动子序列的验证 | 第56-57页 |
| 3.4.4 BnMKK4 基因启动子序列分析 | 第57-58页 |
| 3.5 BnMKK4 启动子功能区鉴定 | 第58-60页 |
| 3.5.1 启动子 5’缺失片段的扩增 | 第58-59页 |
| 3.5.2 表达载体的构建 | 第59页 |
| 3.5.3 报告基因 GFP 的表达 | 第59-60页 |
| 3.6 BnMKK4 启动子活性研究 | 第60-62页 |
| 3.7 UV-B 胁迫对两种油菜生理指标的影响 | 第62-67页 |
| 3.7.1 UV-B 胁迫对两种油菜抗氧化酶活性的影响 | 第62-64页 |
| 3.7.2 UV-B 胁迫对两种油菜叶片中 MDA 含量的影响 | 第64页 |
| 3.7.3 UV-B 胁迫对两种油菜叶片中紫外吸收物质含量的影响 | 第64-65页 |
| 3.7.4 UV-B 胁迫对两种油菜叶片叶绿素含量的影响 | 第65-67页 |
| 第四章 讨论 | 第67-71页 |
| 第五章 结论 | 第71-72页 |
| 参考文献 | 第72-86页 |
| 攻读学位期间发表论文情况 | 第86-87页 |
| 致谢 | 第87页 |
