摘要 | 第3-5页 |
abstract | 第5-6页 |
第1章 前言 | 第11-13页 |
第2章 实验材料与方法 | 第13-28页 |
2.1 主要的实验材料和仪器 | 第13-16页 |
2.1.1 细胞系 | 第13页 |
2.1.2 miR-30d序列 | 第13页 |
2.1.3 主要生化试剂 | 第13-14页 |
2.1.4 实验试剂盒 | 第14-15页 |
2.1.5 实验仪器及设备 | 第15-16页 |
2.2 实验方法 | 第16-27页 |
2.2.1 细胞培养 | 第16页 |
2.2.2 细胞传代 | 第16-17页 |
2.2.3 细胞冻存 | 第17页 |
2.2.4 细胞复苏 | 第17-18页 |
2.2.5 细胞计数 | 第18-19页 |
2.2.6 细胞转染 | 第19页 |
2.2.7 CCK-8实验检测SK-ES-1细胞活力 | 第19-20页 |
2.2.8 Transwell实验检测SK-ES-1细胞的侵袭能力 | 第20-21页 |
2.2.9 划痕实验检测SK-ES-1细胞的迁徙能力 | 第21页 |
2.2.10 Hoechst33258染色观察人尤文肉瘤SK-ES-1细胞的形态变化 | 第21-22页 |
2.2.11 流式细胞术检测人尤文肉瘤SK-ES-1细胞的凋亡率 | 第22-23页 |
2.2.12 人尤文肉瘤SK-ES-1细胞总蛋白的提取及Westernblot实验 | 第23-27页 |
2.3 数据处理与分析 | 第27-28页 |
第3章 实验结果 | 第28-37页 |
3.1 miR-30d过表达可抑制人尤文肉瘤SK-ES-1细胞的增殖 | 第28页 |
3.2 miR-30d过表达可抑制人尤文肉瘤SK-ES-1细胞的侵袭能力 | 第28-30页 |
3.3 miR-30d过表达可抑制人尤文肉瘤SK-ES-1细胞的迁徙能力 | 第30-31页 |
3.4 Hoechst33258染色观察miR-30d过表达对人尤文肉瘤SK-ES-1细胞形态的影响 | 第31页 |
3.5 miR-30d过表达可促进人尤文肉瘤SK-ES-1细胞的凋亡 | 第31-33页 |
3.6 miR-30d过表达引起人尤文肉瘤SK-ES-1细胞内MMP-2和MMP-9表达水平的降低 | 第33-34页 |
3.7 miR-30d过表达引起人尤文肉瘤SK-ES-1细胞内Bax/Bcl-2表达水平比值升高 | 第34-35页 |
3.8 miR-30d过表达引起人尤文肉瘤SK-ES-1细胞内caspase-3和PARP蛋白表达水平的变化 | 第35-37页 |
第4章 讨论 | 第37-41页 |
4.1 尤文肉瘤发病及治疗现状 | 第37页 |
4.2 miRNAs和miR-30d在尤文肉瘤中的研究现状 | 第37-38页 |
4.3 miR-30d抑制尤文肉瘤SK-ES-1细胞的增殖、侵袭和迁徙 | 第38-39页 |
4.4 miR-30d促进尤文肉瘤SK-ES-1细胞的凋亡 | 第39-41页 |
第5章 结论与展望 | 第41-42页 |
致谢 | 第42-43页 |
参考文献 | 第43-47页 |
攻读学位期间的研究成果 | 第47-49页 |
综述 | 第49-56页 |
参考文献 | 第54-56页 |