| 摘要 | 第3-5页 |
| Abstract | 第5-7页 |
| 第1章 综述进展 | 第12-20页 |
| 1.1 丹参研究概况 | 第12-13页 |
| 1.1.1 丹参的生物学特性 | 第12页 |
| 1.1.2 丹参的化学成分 | 第12页 |
| 1.1.3 丹参的药理作用 | 第12-13页 |
| 1.1.4 丹参资源利用现状 | 第13页 |
| 1.2 植物MYC2转录因子研究进展 | 第13-15页 |
| 1.2.1 MYC2转录因子在JA信号通路中的调控机制 | 第13-15页 |
| 1.2.2 MYC2转录因子与靶基因启动子区的G-box相结合 | 第15页 |
| 1.3 转录组测序及其应用 | 第15-17页 |
| 1.3.1 转录组 | 第15-16页 |
| 1.3.2 转录组测序 | 第16-17页 |
| 1.4 酵母单杂交技术原理及其应用 | 第17-18页 |
| 1.4.1 酵母单杂交技术及其原理 | 第17-18页 |
| 1.4.2 酵母单杂交技术的应用 | 第18页 |
| 1.5 丹参根的研究 | 第18页 |
| 1.6 本研究的目的和意义 | 第18-20页 |
| 第2章 过表达SmMYC2转基因丹参转录水平检测 | 第20-26页 |
| 2.1 实验材料与仪器 | 第20-21页 |
| 2.1.1 植物材料 | 第20页 |
| 2.1.2 试剂与药品 | 第20页 |
| 2.1.3 实验仪器 | 第20-21页 |
| 2.2 实验方法 | 第21-23页 |
| 2.2.1 植物材料处理方法 | 第21页 |
| 2.2.2 丹参总RNA的提取和cDNA第一链的合成 | 第21-22页 |
| 2.2.3 SmMYC2基因的表达分析 | 第22-23页 |
| 2.3 结果与分析 | 第23-24页 |
| 2.4 讨论 | 第24-26页 |
| 第3章 转基因丹参中酚酸类物质以及丹参酮类物质的含量分析 | 第26-32页 |
| 3.1 实验材料与仪器 | 第26页 |
| 3.1.1 植物材料 | 第26页 |
| 3.1.2 试剂与药品 | 第26页 |
| 3.1.3 实验仪器 | 第26页 |
| 3.2 实验方法 | 第26-28页 |
| 3.2.1 标准品溶液制备 | 第27页 |
| 3.2.2 供试品溶液制备 | 第27页 |
| 3.2.3 HPLC条件 | 第27-28页 |
| 3.3 结果与分析 | 第28-30页 |
| 3.3.1 迷迭香酸及丹酚酸B含量测定 | 第28-30页 |
| 3.3.2 丹参酮ⅡA以及隐丹参酮含量测定 | 第30页 |
| 3.4 讨论 | 第30-32页 |
| 第4章 过表达SmMYC2的转基因株系的转录组分析 | 第32-44页 |
| 4.1 实验材料与仪器 | 第32页 |
| 4.1.1 植物材料 | 第32页 |
| 4.1.2 试剂与药品 | 第32页 |
| 4.1.3 实验仪器 | 第32页 |
| 4.2 实验方法 | 第32-34页 |
| 4.2.1 OEM-12转基因株系以及CK株系cDNA文库的构建 | 第32-33页 |
| 4.2.2 内源茉莉酸含量的测定 | 第33页 |
| 4.2.3 差异表达基因(DEGs)的分析 | 第33页 |
| 4.2.4 利用实时荧光定量PCR对转录组结果进行验证 | 第33-34页 |
| 4.3 结果与分析 | 第34-41页 |
| 4.3.1 OEM-12转基因株系以及CK株系cDNA文库的构建 | 第34-36页 |
| 4.3.2 茉莉酸生物合成通路中的差异表达基因以及内源茉莉酸含量的测定 | 第36-38页 |
| 4.3.3 差异表达基因(DEGs)的分析 | 第38-40页 |
| 4.3.4 利用实时荧光定量PCR对转录组结果进行验证 | 第40-41页 |
| 4.4 讨论 | 第41-44页 |
| 第5章 相关基因的G-box分析及酵母单杂交 | 第44-58页 |
| 5.1 实验材料与仪器 | 第44-47页 |
| 5.1.1 植物材料 | 第44页 |
| 5.1.2 菌株与质粒 | 第44页 |
| 5.1.3 试剂与药品 | 第44-46页 |
| 5.1.4 实验仪器 | 第46-47页 |
| 5.2 实验方法和步骤 | 第47-54页 |
| 5.2.1 植物材料处理方法 | 第47页 |
| 5.2.2 丹参总DNA的提取 | 第47页 |
| 5.2.3 SmTAT1、SmPAL1和SmCYP98A14启动子的克隆 | 第47-48页 |
| 5.2.4 SmTAT1、SmPAL1和SmCYP98A14启动子扩增产物回收 | 第48-49页 |
| 5.2.5 SmTAT1、SmPAL1和SmCYP98A14启动子与pMD19-T载体的连接及转化 | 第49-50页 |
| 5.2.6 SmTAT1、SmPAL1和SmCYP98A14启动子与pHIS2载体的连接及转化 | 第50-53页 |
| 5.2.7 SmMYC2与pGADT7-AD载体的连接及转化 | 第53页 |
| 5.2.8 酵母单杂交 | 第53-54页 |
| 5.3 结果及分析 | 第54-57页 |
| 5.3.1 酚酸类物质合成通路上酶基因启动子序列的E/G box分析 | 第54-55页 |
| 5.3.2 SmTAT1、SmPAL1和SmCYP98A14启动子序列的获得 | 第55-56页 |
| 5.3.3 酵母单杂交结果 | 第56-57页 |
| 5.4 讨论 | 第57-58页 |
| 第6章 转基因株系根生物量的测定 | 第58-62页 |
| 6.1 实验材料与仪器 | 第58页 |
| 6.1.1 植物材料 | 第58页 |
| 6.1.2 实验仪器 | 第58页 |
| 6.2 实验方法 | 第58页 |
| 6.3 实验结果 | 第58-60页 |
| 6.3.1 根的表型 | 第58-59页 |
| 6.3.2 根的生物量 | 第59-60页 |
| 6.4 讨论 | 第60-62页 |
| 第7章 总结与展望 | 第62-66页 |
| 7.1 总结 | 第62-64页 |
| 7.2 展望 | 第64-66页 |
| 参考文献 | 第66-76页 |
| 致谢 | 第76-78页 |
| 攻读硕士学位期间科研成果 | 第78页 |
