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中成药中原料药材的分子鉴别研究

中文摘要第8-9页
英文摘要第9-10页
缩略语表第11-12页
1 前言第12-14页
    1.1 中成药鉴别研究概况第12页
    1.2 中成药原料药材传统鉴别第12-13页
    1.3 中成药原料药材分子鉴别第13-14页
    1.4 本研究的背景和意义第14页
2 试验材料与方法第14-27页
    2.1 DNA序列分析法鉴别连翘败毒丸第14-17页
        2.1.1 实验材料第14-15页
        2.1.2 仪器与试剂第15-16页
        2.1.3 实验方法第16-17页
            2.1.3.1 DNA提取及PCR扩增第16-17页
            2.1.3.2 目的片段的克隆及测序第17页
            2.1.3.3 数据处理第17页
    2.2 位点特异性PCR法鉴别含有金银花的中成药第17-20页
        2.2.1 实验材料第17-18页
        2.2.2 仪器与试剂第18-19页
        2.2.3 实验方法第19-20页
            2.2.3.1 基于叶绿体序列的金银花及山银花鉴别引物设计第19页
            2.2.3.2 基于功能基因的金银花及山银花鉴别引物设计第19-20页
            2.2.3.3 中成药总DNA提取及PCR扩增第20页
            2.2.3.4 PCR产物测序第20页
            2.2.3.5 数据比对及BlastN分析第20页
    2.3 荧光测序分型法鉴别六味地黄丸中原料药材第20-23页
        2.3.1 实验材料第20-21页
        2.3.2 仪器与试剂第21-22页
        2.3.3 实验方法第22-23页
            2.3.3.1 总DNA提取及PCR扩增第22页
            2.3.3.2 荧光标记引物的选择及修饰第22-23页
            2.3.3.3 测序分析第23页
    2.4 断肠草水提液特异性PCR鉴定方法研究第23-27页
        2.4.1 实验材料第23-24页
        2.4.2 仪器与试剂第24页
        2.4.3 实验方法第24-27页
            2.4.3.1 鉴别引物的设计第24-25页
            2.4.3.2 药材水提液的总DNA提取第25页
            2.4.3.3 模板DNA质量的检测第25-26页
            2.4.3.4 不同因素对水提山银花药材扩增的影响第26-27页
3 试验结果与分析第27-47页
    3.1 DNA序列分析法鉴别连翘败毒丸第27-32页
        3.1.1 连翘败毒丸DNA提取与PCR成功率第27页
        3.1.2 克隆成功率第27页
        3.1.3 参照序列第27-29页
        3.1.4 连翘败毒丸中原料药材克隆序列BlastN分析第29-30页
        3.1.5 连翘败毒丸中原料药材克隆序列的聚类分析第30-32页
    3.2 位点特异性PCR法鉴别含有金银花的中成药第32-39页
        3.2.1 中成药中总DNA的质量检测分析第32-33页
        3.2.2 中成药原料鉴别模板DNA的制备第33-34页
        3.2.3 中成药中金银花及山银花鉴别结果第34-35页
        3.2.4 中成药特异鉴别引物扩增产物序列BlastN分析第35-36页
        3.2.5 金银花FatB基因的DNA序列第36-37页
        3.2.6 鉴别标记的筛选及验证第37-38页
        3.2.7 中成药中金银花原料的分子鉴定第38-39页
    3.3 荧光测序分型法鉴别六味地黄丸中原料药材第39-45页
        3.3.1 荧光标记引物的筛选第39-40页
        3.3.2 荧光测序分型方法重复性及稳定性考察第40页
        3.3.3 丹皮基原植物及药材荧光测序分析第40-43页
        3.3.4 其他原料药材及基原植物荧光测序分析第43-44页
        3.3.5 六味地黄丸中原料药材荧光测序分析第44-45页
    3.4 断肠草水提液特异性PCR鉴定方法研究第45-47页
        3.4.1 药材水提液DNA提取及质量检测第45页
        3.4.2 药材水提液DNA提取方法的研究第45-46页
        3.4.3 不同引物扩增药材水提液的结果第46页
        3.4.4 鉴别位点特异性PCR引物设计第46页
        3.4.5 断肠草及金银花类药材及药材水提液特异性PCR鉴别第46-47页
4 讨论第47-50页
    4.1 DNA的提取是鉴定中成药中原料药材的关键第47页
    4.2 PCR增强剂对中药材及成药DNA分子鉴定的影响第47-49页
    4.3 叶绿体序列在中成药中原料药材鉴别中的局限性第49-50页
    4.4 分子鉴别技术在中成药原料药材鉴别中的优越性第50页
5 结论第50-52页
参考文献第52-56页
综述第56-62页
    参考文献第59-62页
致谢第62-63页
作者简介第63-64页

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