摘要 | 第3-4页 |
ABSTRACT | 第4-5页 |
第一章 文献综述 | 第9-21页 |
1.1 THAP 蛋白 | 第9-10页 |
1.2 THAP11 蛋白 | 第10-12页 |
1.3 ABRO1 蛋白 | 第12-17页 |
1.3.1 ABRO1 蛋白结构特点 | 第13页 |
1.3.2 ABRO1 调控 BRCC36 复合体 K-63 特异性去泛素化酶活性 | 第13-14页 |
1.3.3 ABRO1 参与 BRISC-SHMT 复合体调控干扰素应答 | 第14-15页 |
1.3.4 ABRO1 参与细胞氧化应激反应 | 第15页 |
1.3.5 ABRO1 参与抗心肌缺血 | 第15页 |
1.3.6 ABRO1 调控 p53 稳定性 | 第15-16页 |
1.3.7 ABRO1 与疾病 | 第16-17页 |
1.4 蛋白质相互作用 | 第17-19页 |
1.5 本课题研究意义 | 第19-21页 |
第二章 实验材料与方法 | 第21-32页 |
2.1 细胞株、菌株和质粒 | 第21页 |
2.2 试剂和试剂盒 | 第21-22页 |
2.3 主要设备 | 第22-24页 |
2.4 常用试剂配制 | 第24-25页 |
2.4.1 细菌相关溶液 | 第24页 |
2.4.2 细胞培养相关溶液 | 第24页 |
2.4.3 Western Blot 相关溶液 | 第24-25页 |
2.4.4 细胞裂解和免疫沉淀相关溶液 | 第25页 |
2.5 实验方法 | 第25-32页 |
2.5.1 质粒提取 | 第25页 |
2.5.2 细胞总蛋白提取 | 第25-26页 |
2.5.3 哺乳动物细胞转染 | 第26页 |
2.5.4 Western Blot | 第26-27页 |
2.5.5 RT-PCR | 第27页 |
2.5.6 荧光定量 PCR | 第27页 |
2.5.7 荧光素酶报告基因实验 | 第27-28页 |
2.5.8 免疫共沉淀(Co-Immunoprecipitation) | 第28页 |
2.5.9 GST-pull down | 第28页 |
2.5.10 体内泛素化 | 第28-29页 |
2.5.11 间接免疫荧光 | 第29页 |
2.5.12 慢病毒的包装与浓缩 | 第29-30页 |
2.5.13 慢病毒感染 HepG2 细胞 | 第30页 |
2.5.14 细胞周期检测 | 第30页 |
2.5.15 细胞凋亡检测 | 第30页 |
2.5.16 生物信息学预测 p53 转录起始位点 | 第30-31页 |
2.5.17 统计分析 | 第31-32页 |
第三章 实验结果与讨论 | 第32-55页 |
3.1 实验结果 | 第32-51页 |
3.1.1 ABRO1 和 THAP11 存在外源相互作用 | 第32-33页 |
3.1.2 ABRO1 与 THAP11 存在内源相互作用 | 第33页 |
3.1.3 ABRO1 与 THAP11 直接相互作用 | 第33-34页 |
3.1.4 ABRO1 与 THAP11 相互作用结构域的确定 | 第34-36页 |
3.1.5 DNA 损伤诱导 THAP11 入核,形成与 ABRO1 的共定位 | 第36-37页 |
3.1.6 DNA 损伤诱导 ABRO1 和 THAP11 蛋白水平表达上调 | 第37-38页 |
3.1.7 DNA 损伤上调 ABRO1、THAP11 蛋白表达不依赖于 p53 | 第38页 |
3.1.8 THAP11 慢病毒包装以及 THAP11 细胞稳定株的构建 | 第38-41页 |
3.1.9 THAP11 对细胞周期的影响 | 第41-44页 |
3.1.10 过表达 THAP11 促进细胞凋亡 | 第44-45页 |
3.1.11 THAP11 与 p53 存在相互作用 | 第45-46页 |
3.1.12 预测 THAP11 启动子区域的 p53 转录起始位点 | 第46-47页 |
3.1.13 THAP11 对 p53 及其下游靶基因转录活性影响 | 第47-49页 |
3.1.14 THAP11 和 p53 在蛋白水平的调控 | 第49页 |
3.1.15 THAP11 能增强 p53 蛋白质稳定性 | 第49-50页 |
3.1.16 THAP11 通过抑制 p53 泛素化稳定 p53 蛋白 | 第50-51页 |
3.2 讨论 | 第51-55页 |
第四章 结论与展望 | 第55-56页 |
4.1 结论 | 第55页 |
4.2 展望 | 第55-56页 |
参考文献 | 第56-63页 |
附录 | 第63-65页 |
发表论文和参加科研情况说明 | 第65-66页 |
致谢 | 第66页 |