| 摘要 | 第9-11页 |
| ABSTRACT | 第11-12页 |
| 第一章 绪论 | 第13-34页 |
| 1. CYP450酶概述 | 第13-16页 |
| 1.1 CYP450酶 | 第13-14页 |
| 1.2 CYP450酶的分类 | 第14页 |
| 1.3 CYP450酶的特性 | 第14-15页 |
| 1.3.1 遗传多态性 | 第14-15页 |
| 1.3.2 酶的诱导和抑制 | 第15页 |
| 1.4 CYP450酶在人体的表达及作用 | 第15-16页 |
| 2. 天然产物有效成分与CYP450酶相互作用的研究进展 | 第16-18页 |
| 2.1 作用于中枢神经系统药物 | 第16-17页 |
| 2.2 作用于心血管系统药物 | 第17页 |
| 2.3 抗菌药物 | 第17页 |
| 2.4 作用于免疫系统药物 | 第17页 |
| 2.5 小结 | 第17-18页 |
| 3. CYP450酶体外代谢研究进展 | 第18-23页 |
| 3.1 CYP450酶体外代谢模型及方法 | 第18-19页 |
| 3.1.1 肝脏微粒体温孵法 | 第18页 |
| 3.1.2 肝细胞体外温孵法 | 第18页 |
| 3.1.3 肝脏灌流法 | 第18-19页 |
| 3.1.4 肝组织切片法 | 第19页 |
| 3.1.5 基因重组P450酶系 | 第19页 |
| 3.2 CYP450酶体外代谢检测方法 | 第19-20页 |
| 3.2.1 高通量检测方法 | 第19-20页 |
| 3.2.2 中等通量检测方法 | 第20页 |
| 3.3 CYP450酶抑制作用研究方法 | 第20-23页 |
| 3.3.1 可逆性抑制研究方法 | 第21-22页 |
| 3.3.2 时间依赖性抑制研究方法 | 第22-23页 |
| 4. 分子对接技术在CYP450酶代谢研究中的应用 | 第23-29页 |
| 4.1 分子对接方法 | 第25-27页 |
| 4.2 分子对接软件 | 第27-29页 |
| 5. 立题背景及意义 | 第29-32页 |
| 6. 目标与策略 | 第32-34页 |
| 第二章 花锚活性xanthone成分HM-1、HM-2、HM-3在大鼠体内的代谢转化研究 | 第34-50页 |
| 1. 实验材料 | 第34页 |
| 1.1 药品与试剂 | 第34页 |
| 1.2 仪器 | 第34页 |
| 1.3 动物 | 第34页 |
| 2 实验方法 | 第34-36页 |
| 2.1 血浆样品采集及预处理 | 第34-35页 |
| 2.2 胆汁样品采集及预处理 | 第35页 |
| 2.3 尿液样品采集及预处理 | 第35页 |
| 2.4 粪便样品采集及预处理 | 第35页 |
| 2.5 LC/MS~n-IT-TOF条件 | 第35-36页 |
| 3. 实验结果与讨论 | 第36-40页 |
| 3.1 HM-1在大鼠体内的代谢转化研究 | 第36-37页 |
| 3.1.1 HM-1在大鼠体内代谢产物结构解析 | 第36-37页 |
| 3.1.2 大鼠血浆样品的分析 | 第37页 |
| 3.1.3 大鼠胆汁样品的分析 | 第37页 |
| 3.1.4 大鼠尿液样品的分析 | 第37页 |
| 3.1.5 大鼠粪便样品的分析 | 第37页 |
| 3.1.6 HM-1在大鼠体内代谢产物结构解析及代谢途径的推测 | 第37页 |
| 3.2 HM-2在大鼠体内的代谢转化研究 | 第37-39页 |
| 3.2.1 HM-2在大鼠体内代谢产物结构解析 | 第37-38页 |
| 3.2.2 大鼠血浆样品的分析 | 第38页 |
| 3.2.3 大鼠胆汁样品的分析 | 第38页 |
| 3.2.4 大鼠尿液样品的分析 | 第38页 |
| 3.2.5 大鼠粪便样品的分析 | 第38-39页 |
| 3.2.6 HM-2在大鼠体内代谢产物的结构解析及代谢途径的推测 | 第39页 |
| 3.3 HM-3在大鼠体内的代谢转化研究 | 第39-40页 |
| 3.3.1 HM-3在大鼠体内代谢产物结构解析 | 第39页 |
| 3.3.2 大鼠血浆样品的分析 | 第39页 |
| 3.3.3 大鼠胆汁样品的分析 | 第39-40页 |
| 3.3.4 大鼠尿液样品的分析 | 第40页 |
| 3.3.5 大鼠粪便样品的分析 | 第40页 |
| 3.3.6 HM-3在大鼠体内代谢产物的结构解析及代谢途径的推测 | 第40页 |
| 4. 小结 | 第40-42页 |
| 附图表 | 第42-50页 |
| 第三章 花锚活性xanthone成分HM-1与HM-5在肝脏微粒体中的代谢转化研究 | 第50-61页 |
| 1. 实验材料 | 第50-51页 |
| 1.1 药品与试剂 | 第50页 |
| 1.2 仪器 | 第50-51页 |
| 1.3 动物 | 第51页 |
| 2. 实验方法 | 第51-52页 |
| 2.1 大鼠肝微粒体的制备 | 第51页 |
| 2.2 大鼠及人肝脏微粒体温孵体系及预处理 | 第51页 |
| 2.3 LC/MS~n-IT-TOF分析条件 | 第51-52页 |
| 3. 实验结果与讨论 | 第52-54页 |
| 3.1 HM-1在大鼠肝脏微粒体中的代谢转化研究 | 第52-53页 |
| 3.1.1 HM-1在大鼠肝脏微粒体中代谢产物的结构解析 | 第52-53页 |
| 3.1.2 HM-1在肝脏微粒体中代谢途径的推测 | 第53页 |
| 3.2 HM-5在肝脏微粒体中的代谢转化研究 | 第53-54页 |
| 3.2.1 HM-5在大鼠肝脏微粒体中代谢产物的结构解析 | 第53页 |
| 3.2.2 HM-5在人肝脏微粒体中代谢产物的结构解析 | 第53页 |
| 3.2.3 HM-5在肝脏微粒体中代谢途径的推测 | 第53-54页 |
| 4. 小结 | 第54-55页 |
| 附图表 | 第55-61页 |
| 第四章 参与HM-1与HM-5在肝微粒体中代谢的CYP450酶亚型的鉴定 | 第61-79页 |
| 1. 实验材料 | 第61-62页 |
| 1.1 药品与试剂 | 第61页 |
| 1.2 仪器 | 第61页 |
| 1.3 动物 | 第61-62页 |
| 2. 实验方法 | 第62-63页 |
| 2.1 大鼠肝脏微粒体的制备 | 第62页 |
| 2.2 特异性抑制剂法在大鼠及人肝脏微粒体中的温孵体系及预处理 | 第62页 |
| 2.3 重组CYP450酶法的温孵体系及预处理 | 第62页 |
| 2.4 HPLC-UV分析条件 | 第62-63页 |
| 2.5 数据处理 | 第63页 |
| 3. 实验结果及讨论 | 第63-77页 |
| 3.1 参与HM-1代谢的主要CYP450酶亚型的鉴别 | 第63-68页 |
| 3.1.1 特异性抑制剂法鉴别在大鼠肝脏微粒体中主要参与的CYP450酶亚型 | 第63-66页 |
| 3.1.2 重组CYP450酶法鉴别在人肝微粒体中主要参与的CYP450酶亚型 | 第66-68页 |
| 3.2 参与HM-5代谢的主要CYP450酶亚型的鉴别 | 第68-77页 |
| 3.2.1 特异性抑制剂法鉴别在大鼠肝脏微粒体中主要参与的CYP450酶亚型 | 第68-72页 |
| 3.2.2 特异性抑制剂法鉴别在人肝脏微粒体中主要参与的CYP450酶亚型 | 第72页 |
| 3.2.3 重组CYP450酶法鉴别在人肝脏微粒体中主要参与的CYP450酶亚型 | 第72-77页 |
| 4. 小结 | 第77-79页 |
| 第五章 HM-1和HM-5对CYP450酶的体外抑制作用研究 | 第79-98页 |
| 1. 实验材料 | 第79页 |
| 1.1 药品与试剂 | 第79页 |
| 1.2 仪器 | 第79页 |
| 1.3 动物 | 第79页 |
| 2. 实验方法 | 第79-84页 |
| 2.1 大鼠肝脏微粒体的制备 | 第79页 |
| 2.2 HM-1与HM-5对CYP3A4时间依赖性抑制作用的研究 | 第79-80页 |
| 2.2.1 温孵体系及预处理 | 第79-80页 |
| 2.2.2 HPLC-UV分析方法 | 第80页 |
| 2.2.3 数据处理 | 第80页 |
| 2.3 探针底物法测定HM-1与HM-5在体外对CYP450酶的抑制 | 第80-84页 |
| 2.3.1 探针底物药物的HPLC-UV分析方法的建立 | 第80-82页 |
| 2.3.1.1 CYP1A2及CYP3A4(CYP3A2)探针底物药物分析方法的建立 | 第80-81页 |
| 2.3.1.2 CYP286探针底物药物分析方法的建立 | 第81页 |
| 2.3.1.3 CYP2C8探针底物药物分析方法的建立 | 第81页 |
| 2.3.1.4 CYP2C9(CYP2C6/11)探针底物药物分析方法的建立 | 第81页 |
| 2.3.1.5 CYP2C19探针底物药物分析方法的建立 | 第81页 |
| 2.3.1.6 CYP2E1探针底物药物分析方法的建立 | 第81-82页 |
| 2.3.1.7 CYP3A4(CYP3A2)探针底物药物分析方法的建立 | 第82页 |
| 2.3.2 IC_(50)的测定 | 第82-83页 |
| 2.3.2.1 探针底物与抑制剂的浓度设置 | 第82页 |
| 2.3.2.2 温孵体系及预处理 | 第82-83页 |
| 2.3.2.3 数据处理 | 第83页 |
| 2.3.3 抑制类型的判定 | 第83-84页 |
| 2.3.3.1 温孵体系及预处理 | 第83页 |
| 2.3.3.2 数据处理 | 第83-84页 |
| 3. 实验结果及讨论 | 第84-94页 |
| 3.1 HM-1和HM-5对CYP3A4时间依赖性抑制作用的研究 | 第84-85页 |
| 3.2 探针底物法测定HM-1与HM-5在体外对CYP450酶的抑制 | 第85-94页 |
| 3.2.1 探针底物药物的HPLC-UV分析方法的验证结果 | 第85-90页 |
| 3.2.2 HM-1对大鼠肝脏微粒体CYP450酶的抑制作用研究 | 第90-91页 |
| 3.2.2.1 IC_(50)的测定 | 第90-91页 |
| 3.2.3 HM-5对大鼠肝脏微粒体CYP450酶的抑制作用研究 | 第91-92页 |
| 3.2.3.1 IC_(50)的测定 | 第91-92页 |
| 3.2.4 HM-5对人肝脏微粒体CYP450酶的抑制作用研究 | 第92-94页 |
| 3.2.4.1 IC_(50)的测定 | 第92-93页 |
| 3.2.4.2 抑制类型的判定 | 第93-94页 |
| 4. 小结 | 第94-98页 |
| 第六章 HM-1及花锚乙酸乙酯提取物对大鼠主要CYP450酶亚型的体内抑制作用研究 | 第98-108页 |
| 1. 实验材料 | 第98页 |
| 1.1 药品与试剂 | 第98页 |
| 1.2 仪器 | 第98页 |
| 1.3 动物 | 第98页 |
| 2. 实验方法 | 第98-101页 |
| 2.1 HM-1对大鼠CYP1A2,CYP2C6/11,CYP3A2体内抑制作用的研究 | 第98-99页 |
| 2.2 花锚乙酸乙酯提取物对大鼠CYPlA2,CYP2C6/11,CYP3A2体内抑制作用的研究 | 第99-100页 |
| 2.3 探针底物药物的HPLC-UV分析方法的建立 | 第100-101页 |
| 2.3.1 CYP1A2探针底物药物分析方法的建立 | 第100页 |
| 2.3.2 CYP2C6/11探针底物药物分析方法的建立 | 第100页 |
| 2.3.3 CYP3A2探针底物药物分析方法的建立 | 第100-101页 |
| 2.4 数据处理 | 第101页 |
| 3. 实验结果及讨论 | 第101-107页 |
| 3.1 探针底物药物的HPLC-UV分析方法的验证结果 | 第101-103页 |
| 3.2 HM-1与花锚乙酸乙酯提取物对大鼠CYP1A2,CYP2C6/11,CYP3A2体内抑制作用研究结果 | 第103-107页 |
| 4. 小结 | 第107-108页 |
| 第七章 分子对接技术在研究人CYP450酶抑制作用中的应用 | 第108-115页 |
| 1. 实验材料 | 第108页 |
| 1.1 工作站及原文件 | 第108页 |
| 2. 实验方法 | 第108-109页 |
| 2.1 HM-5与CYP450蛋白晶体结构的对接 | 第108页 |
| 2.2 对接结果的处理 | 第108-109页 |
| 3. 实验结果与讨论 | 第109-113页 |
| 3.1 HM-5与人肝脏CYP1A2,CYP2C9,CYP3A4蛋白晶体对接能量结果 | 第109页 |
| 3.2 HM-5对人肝脏CYP1A2,CYP2C9,CYP3A4抑制机理的探讨 | 第109-113页 |
| 3.2.1 HM-5对人肝脏CYP1A2抑制机理的探讨 | 第109页 |
| 3.2.2 HM-5对人肝脏CYP2C9抑制机理的探讨 | 第109-110页 |
| 3.2.3 HM-5对人肝脏CYP3A4抑制机理的探讨 | 第110-113页 |
| 4. 小结 | 第113-115页 |
| 第八章 总结 | 第115-117页 |
| 参考文献 | 第117-125页 |
| 发表论文、参会、学术交流及获奖情况 | 第125-127页 |
| 致谢 | 第127-128页 |
