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利用DGAT1、SLC、FAD2和FAD3基因改良拟南芥和甘蓝型油菜的含油量和脂肪酸不饱和性

摘要第5-7页
ABSTRACT第7-8页
第一章 文献综述第12-26页
    1.1 选题的目的和意义第12页
    1.2 提高植物含油量基因工程研究进展第12-17页
        1.2.1 植物油脂的生物合成过程第12-13页
        1.2.2 通过调节基因控制植物含油量的研究进展第13-14页
        1.2.3 通过结构基因调控植物含油量的研究进展第14-17页
    1.3 提高植物不饱和脂肪酸含量基因工程研究进展第17-23页
        1.3.1 不饱和脂肪酸的合成第18-19页
        1.3.2 不饱和脂肪酸的功用第19-21页
        1.3.3 植物 FAD2 基因研究进展第21-22页
        1.3.4 植物 FAD3 基因研究进展第22-23页
    1.4 油菜转基因研究现状第23-25页
        1.4.1 油菜转化的受体系统第23页
        1.4.2 油菜转基因的方法第23-25页
    1.5 研究内容第25-26页
第二章 材料与方法第26-34页
    2.1 实验材料第26-27页
        2.1.1 菌株和载体第26页
        2.1.2 试剂药品第26页
        2.1.3 仪器设备第26页
        2.1.4 植物材料第26-27页
        2.1.5 培养基第27页
    2.2 实验方法第27-34页
        2.2.1 植物表达载体 pSFF 的构建第27-28页
        2.2.2 植物表达载体 pSDS 的构建第28页
        2.2.3 大肠杆菌感受态的制备第28-29页
        2.2.4 热击法转化大肠杆菌 Top10第29页
        2.2.5 农杆菌感受态细胞的制备第29页
        2.2.6 植物表达载体 pSDS 和 pSFF 向根癌农杆菌的转化及其鉴定第29-30页
        2.2.7 农杆菌介导的浸花法转化拟南芥第30页
        2.2.8 拟南芥转化苗的抗性筛选第30-31页
        2.2.9 拟南芥转化苗的 PCR 检测第31页
        2.2.10 气相色谱法测定转基因植株叶片和种子的脂肪酸组成第31页
        2.2.11 拟南芥叶片总脂提取第31-32页
        2.2.12 薄层色谱法(TLC)分离转基因拟南芥叶片中 TAG第32页
        2.2.13 农杆菌介导的浸花法转化甘蓝型油菜第32-33页
        2.2.14 卡那霉素筛选溶度及浸泡时间的确定第33页
        2.2.15 甘蓝型油菜转化苗的筛选第33页
        2.2.16 甘蓝型油菜转化苗的 PCR 检测第33页
        2.2.17 转基因油菜种子脂肪酸含量测定第33-34页
第三章 结果与分析第34-45页
    3.1 载体 pSFF 构建的结果与分析第34-35页
        3.1.1 启动子 SAD2、终止子 Nos 和 BnFAD3 基因的获得第34页
        3.1.2 植物表达载体 pSFF 的检测第34-35页
    3.2 载体 pSDS 构建的结果与分析第35-37页
        3.2.1 启动子 SAD2、TmDGAT 1 基因的获得第35-36页
        3.2.2 植物表达载体 pSDS 的检测第36-37页
    3.3 载体 pSFF 转化拟南芥的结果与分析第37-41页
        3.3.1 pSFF 转化拟南芥抗性培养基的筛选结果第37页
        3.3.2 pSFF 转化拟南芥的 PCR 检测结果第37-38页
        3.3.3 pSFF 转化拟南芥 T1代转基因植株叶片表型观察及分级统计第38-39页
        3.3.4 pSFF 转化拟南芥 T1代转基因植株分级叶片脂肪酸组成分析第39页
        3.3.5 pSFF 转化拟南芥 T2代转基因分级种子脂肪酸组成分析第39-40页
        3.3.6 pSFF 转化拟南芥 T2代杂合种子脂肪酸组成分析第40页
        3.3.7 pSFF 转化拟南芥 T3代纯合株系种子脂肪酸组成分析第40-41页
    3.4 载体 pSDS 转化拟南芥的结果与分析第41-42页
        3.4.1 pSDS 转化拟南芥抗性培养基的筛选结果第41页
        3.4.2 pSDS 转化拟南芥的 PCR 检测结果第41页
        3.4.3 pSDS 转化拟南芥 T2代杂合种子脂肪酸组成分析第41页
        3.4.4 薄层色谱法(TLC)分离转基因拟南芥叶片中 TAG第41-42页
    3.5 pSDS 和 pSFF 转化甘蓝型油菜结果分析第42-45页
        3.5.1 甘蓝型油菜转化苗的筛选第42-43页
        3.5.2 甘蓝型油菜转化苗的 PCR 检测结果第43-44页
        3.5.3 pSDS 转化甘蓝型油菜 T2代杂合种子脂肪酸组成分析第44-45页
第四章 讨论第45-48页
    4.1 关于载体 pSFF 转化拟南芥的讨论第45-46页
    4.2 关于载体 pSDS 转化拟南芥的讨论第46页
    4.3 关于载体 pSDS 和 pSFF 转化甘蓝型油菜的讨论第46-48页
第五章 结论与创新点第48-49页
    5.1 主要结论第48页
    5.2 本研究的创新点第48-49页
参考文献第49-62页
缩略词第62-63页
致谢第63-64页
作者简介第64页

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