摘要 | 第5-7页 |
ABSTRACT | 第7-8页 |
第一章 文献综述 | 第12-26页 |
1.1 选题的目的和意义 | 第12页 |
1.2 提高植物含油量基因工程研究进展 | 第12-17页 |
1.2.1 植物油脂的生物合成过程 | 第12-13页 |
1.2.2 通过调节基因控制植物含油量的研究进展 | 第13-14页 |
1.2.3 通过结构基因调控植物含油量的研究进展 | 第14-17页 |
1.3 提高植物不饱和脂肪酸含量基因工程研究进展 | 第17-23页 |
1.3.1 不饱和脂肪酸的合成 | 第18-19页 |
1.3.2 不饱和脂肪酸的功用 | 第19-21页 |
1.3.3 植物 FAD2 基因研究进展 | 第21-22页 |
1.3.4 植物 FAD3 基因研究进展 | 第22-23页 |
1.4 油菜转基因研究现状 | 第23-25页 |
1.4.1 油菜转化的受体系统 | 第23页 |
1.4.2 油菜转基因的方法 | 第23-25页 |
1.5 研究内容 | 第25-26页 |
第二章 材料与方法 | 第26-34页 |
2.1 实验材料 | 第26-27页 |
2.1.1 菌株和载体 | 第26页 |
2.1.2 试剂药品 | 第26页 |
2.1.3 仪器设备 | 第26页 |
2.1.4 植物材料 | 第26-27页 |
2.1.5 培养基 | 第27页 |
2.2 实验方法 | 第27-34页 |
2.2.1 植物表达载体 pSFF 的构建 | 第27-28页 |
2.2.2 植物表达载体 pSDS 的构建 | 第28页 |
2.2.3 大肠杆菌感受态的制备 | 第28-29页 |
2.2.4 热击法转化大肠杆菌 Top10 | 第29页 |
2.2.5 农杆菌感受态细胞的制备 | 第29页 |
2.2.6 植物表达载体 pSDS 和 pSFF 向根癌农杆菌的转化及其鉴定 | 第29-30页 |
2.2.7 农杆菌介导的浸花法转化拟南芥 | 第30页 |
2.2.8 拟南芥转化苗的抗性筛选 | 第30-31页 |
2.2.9 拟南芥转化苗的 PCR 检测 | 第31页 |
2.2.10 气相色谱法测定转基因植株叶片和种子的脂肪酸组成 | 第31页 |
2.2.11 拟南芥叶片总脂提取 | 第31-32页 |
2.2.12 薄层色谱法(TLC)分离转基因拟南芥叶片中 TAG | 第32页 |
2.2.13 农杆菌介导的浸花法转化甘蓝型油菜 | 第32-33页 |
2.2.14 卡那霉素筛选溶度及浸泡时间的确定 | 第33页 |
2.2.15 甘蓝型油菜转化苗的筛选 | 第33页 |
2.2.16 甘蓝型油菜转化苗的 PCR 检测 | 第33页 |
2.2.17 转基因油菜种子脂肪酸含量测定 | 第33-34页 |
第三章 结果与分析 | 第34-45页 |
3.1 载体 pSFF 构建的结果与分析 | 第34-35页 |
3.1.1 启动子 SAD2、终止子 Nos 和 BnFAD3 基因的获得 | 第34页 |
3.1.2 植物表达载体 pSFF 的检测 | 第34-35页 |
3.2 载体 pSDS 构建的结果与分析 | 第35-37页 |
3.2.1 启动子 SAD2、TmDGAT 1 基因的获得 | 第35-36页 |
3.2.2 植物表达载体 pSDS 的检测 | 第36-37页 |
3.3 载体 pSFF 转化拟南芥的结果与分析 | 第37-41页 |
3.3.1 pSFF 转化拟南芥抗性培养基的筛选结果 | 第37页 |
3.3.2 pSFF 转化拟南芥的 PCR 检测结果 | 第37-38页 |
3.3.3 pSFF 转化拟南芥 T1代转基因植株叶片表型观察及分级统计 | 第38-39页 |
3.3.4 pSFF 转化拟南芥 T1代转基因植株分级叶片脂肪酸组成分析 | 第39页 |
3.3.5 pSFF 转化拟南芥 T2代转基因分级种子脂肪酸组成分析 | 第39-40页 |
3.3.6 pSFF 转化拟南芥 T2代杂合种子脂肪酸组成分析 | 第40页 |
3.3.7 pSFF 转化拟南芥 T3代纯合株系种子脂肪酸组成分析 | 第40-41页 |
3.4 载体 pSDS 转化拟南芥的结果与分析 | 第41-42页 |
3.4.1 pSDS 转化拟南芥抗性培养基的筛选结果 | 第41页 |
3.4.2 pSDS 转化拟南芥的 PCR 检测结果 | 第41页 |
3.4.3 pSDS 转化拟南芥 T2代杂合种子脂肪酸组成分析 | 第41页 |
3.4.4 薄层色谱法(TLC)分离转基因拟南芥叶片中 TAG | 第41-42页 |
3.5 pSDS 和 pSFF 转化甘蓝型油菜结果分析 | 第42-45页 |
3.5.1 甘蓝型油菜转化苗的筛选 | 第42-43页 |
3.5.2 甘蓝型油菜转化苗的 PCR 检测结果 | 第43-44页 |
3.5.3 pSDS 转化甘蓝型油菜 T2代杂合种子脂肪酸组成分析 | 第44-45页 |
第四章 讨论 | 第45-48页 |
4.1 关于载体 pSFF 转化拟南芥的讨论 | 第45-46页 |
4.2 关于载体 pSDS 转化拟南芥的讨论 | 第46页 |
4.3 关于载体 pSDS 和 pSFF 转化甘蓝型油菜的讨论 | 第46-48页 |
第五章 结论与创新点 | 第48-49页 |
5.1 主要结论 | 第48页 |
5.2 本研究的创新点 | 第48-49页 |
参考文献 | 第49-62页 |
缩略词 | 第62-63页 |
致谢 | 第63-64页 |
作者简介 | 第64页 |