摘要 | 第4-5页 |
Abstract | 第5-6页 |
1 文献综述 | 第10-26页 |
1.1 猪瘟 | 第10-15页 |
1.1.1 猪瘟的症状及危害 | 第10-11页 |
1.1.2 中国猪瘟的流行特点与分子流行病学 | 第11-13页 |
1.1.3 猪瘟防控存在的问题及防治措施 | 第13-15页 |
1.2 猪瘟病毒 | 第15-20页 |
1.2.1 猪瘟病毒的基本结构 | 第15-16页 |
1.2.2 猪瘟病毒基因组结构及编码的蛋白 | 第16-17页 |
1.2.3 猪瘟病毒的检测方法 | 第17-20页 |
1.3 环介导等温扩增 | 第20-24页 |
1.3.1 环介导等温扩增的原理 | 第20-22页 |
1.3.2 环介导等温扩增的应用 | 第22-23页 |
1.3.3 环介导等温扩增的优缺点 | 第23-24页 |
1.4 研究意义 | 第24-26页 |
2 材料与方法 | 第26-36页 |
2.1 材料 | 第26-28页 |
2.1.1 毒株与病料 | 第26页 |
2.1.2 所用仪器设备 | 第26-27页 |
2.1.3 所用试剂 | 第27页 |
2.1.4 常用溶液的配制 | 第27-28页 |
2.2 方法 | 第28-36页 |
2.2.1 序列对比分析 | 第28-31页 |
2.2.2 引物设计与合成 | 第31-32页 |
2.2.3 CSFV 的分离和培养 | 第32页 |
2.2.4 病毒 RNA/DNA 的提取及 RT-PCR 鉴定 | 第32-33页 |
2.2.5 猪瘟强毒株与弱毒疫苗株的 LAMP 检测方法的优化 | 第33-34页 |
2.2.6 LAMP 扩增产物的可视化及琼脂糖凝胶电泳检测方法 | 第34页 |
2.2.7 LAMP 敏感性检测 | 第34页 |
2.2.8 LAMP 特异性检测 | 第34页 |
2.2.9 LAMP 重复性和稳定性试验 | 第34-35页 |
2.2.10 CSFV RT-LAMP 反应 | 第35页 |
2.2.11 RT-LAMP 检测猪病料 | 第35页 |
2.2.12 7500-fast 实时荧光定量 PCR 仪对 LAMP 扩增实时监测 | 第35-36页 |
3 结果 | 第36-44页 |
3.1 CSFV 接种 PK-15 细胞的培养 | 第36页 |
3.2 CSFV 强毒株和疫苗株 RT-PCR 结果 | 第36-37页 |
3.3 CSFV LAMP 反应条件的确定 | 第37页 |
3.3.1 LAMP 反应温度的确定 | 第37页 |
3.3.2 LAMP 反应时间的确定 | 第37页 |
3.4 CSFV 强毒株和疫苗株的 LAMP 扩增可视化及琼脂糖凝胶电泳结果 | 第37-38页 |
3.5 LAMP 敏感性检测 | 第38-40页 |
3.6 LAMP 特异性检测 | 第40页 |
3.7 LAMP 重复性和稳定性试验 | 第40-41页 |
3.8 RT-LAMP 符合率检测 | 第41-42页 |
3.9 7500-fast 实时荧光定量 PCR 仪对 LAMP 实时监控 | 第42-44页 |
4 讨论 | 第44-49页 |
5 结论 | 第49-50页 |
参考文献 | 第50-56页 |
附录:英文缩写一览表 | 第56-58页 |
致谢 | 第58-60页 |
作者简历 | 第60-61页 |
发表论文情况 | 第61页 |