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牛膝总皂苷保护软骨细胞作用及其机制研究

摘要第3-5页
Abstract第5-6页
主要符号对照表第10-11页
第1章 前言第11-19页
    1.1 课题的立题依据及意义第11-12页
    1.2 牛膝药理作用研究进展第12-16页
    1.3 研究思路与论文结构第16-19页
第2章 牛膝总皂苷的制备及含量测定第19-31页
    2.1 引言第19页
    2.2 实验材料第19-20页
        2.2.1 实验药品第19页
        2.2.2 实验试剂第19-20页
        2.2.3 实验主要仪器第20页
    2.3 实验方法第20-22页
        2.3.1 热回流提取第20页
        2.3.2 萃取第20页
        2.3.3 D101 大孔吸附树脂富集第20-21页
        2.3.4 总皂苷含量的测定第21-22页
    2.4 实验结果第22-28页
        2.4.1 最大波长的选择第22-24页
        2.4.2 显色时间的考察第24页
        2.4.3 显色温度的考察第24-25页
        2.4.4 方法学考察及总皂苷含量测定第25-28页
    2.5 讨论第28-31页
第3章 牛膝总皂苷对大鼠软骨细胞的保护作用第31-47页
    3.1 引言第31页
    3.2 实验材料第31-35页
        3.2.1 实验动物第31页
        3.2.2 实验试剂第31-33页
        3.2.3 实验主要仪器第33页
        3.2.4 实验缓冲液、溶液配制第33-35页
    3.3 实验方法第35-39页
        3.3.1 原代大鼠软骨细胞的分离第35页
        3.3.2 细胞传代第35页
        3.3.3 细胞冻存第35-36页
        3.3.4 细胞复苏第36页
        3.3.5 MTT 法检测 ABS 和正丁醇萃取水相对软骨细胞活力的影响第36页
        3.3.6 Hoechst 33258 染色检测软骨细胞凋亡第36页
        3.3.7 Annexin V-FITC/PI 流式双染检测软骨细胞凋亡第36-37页
        3.3.8 Caspase 3 酶活性检测第37页
        3.3.9 免疫印迹分析(Western blot)第37-39页
        3.3.10 统计学分析第39页
    3.4 实验结果第39-45页
        3.4.1 ABS 和正丁醇萃取水相对 IL-1β诱导的软骨细胞活力的影响第39-40页
        3.4.2 Hoechst 染色检测 ABS 对 IL-1β诱导的软骨细胞凋亡的影响第40-41页
        3.4.3 Annexin V-FITC/PI 流式检测 ABS 对 IL-1β诱导的软骨细胞凋亡的影响第41-42页
        3.4.4 ABS 对 IL-1β诱导的软骨细胞 caspase 3 活性上升的影响第42页
        3.4.5 ABS 对 IL-1β诱导的软骨细胞凋亡蛋白表达的影响第42-43页
        3.4.6 ABS 对 IL-1β诱导的软骨细胞中 p53 和 PCNA 蛋白表达的影响第43页
        3.4.7 ABS 对 IL-1β诱导的软骨细胞中炎症介质表达的影响第43-44页
        3.4.8 ABS 对 IL-1β诱导的软骨细胞核 p65 磷酸化的影响第44页
        3.4.9 ABS 对 IL-1β诱导的软骨细胞质 IκBα降解和磷酸化的影响第44-45页
    3.5 讨论第45-47页
第4章 牛膝总皂苷对大鼠实验性骨关节炎的治疗作用第47-55页
    4.1 引言第47页
    4.2 实验材料第47-48页
        4.2.1 实验动物第47页
        4.2.2 实验试剂第47-48页
        4.2.3 实验主要仪器第48页
    4.3 实验方法第48-50页
        4.3.1 大鼠实验性 OA 模型的制备第48页
        4.3.2 分组及给药方案第48页
        4.3.3 大鼠关节直径的测定第48页
        4.3.4 大鼠血清 IL-1β含量测定第48-49页
        4.3.5 大鼠血清羟脯氨酸含量的测定(碱水解法)第49-50页
        4.3.6 大鼠血清 NO 含量测定第50页
        4.3.7 大鼠关节软骨氨基葡聚糖的测定第50页
        4.3.8 统计学分析第50页
    4.4 实验结果第50-53页
        4.4.1 ABS 对实验性 OA 大鼠关节肿胀的影响第50-51页
        4.4.2 ABS 对大鼠血清 IL-1β及 NO 水平变化的影响第51页
        4.4.3 ABS 对大鼠血清羟脯氨酸的影响第51页
        4.4.4 ABS 对大鼠软骨蛋白多糖降解的影响第51-53页
    4.5 讨论第53-55页
总结与展望第55-57页
创新点第57-59页
参考文献第59-67页
致谢第67-69页
个人简历、在学期间发表的学术论文及研究进展第69页

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