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弓形虫SAG1和GRA4基因的原核表达及其重组猫疱疹病毒Ⅰ型转移载体的构建

摘要第6-7页
Abstract第7-8页
前言第11-20页
    1 弓形虫概述第11-13页
        1.1 弓形虫第11页
        1.2 生活周期第11-12页
        1.3 弓形虫遗传多样性第12页
        1.4 弓形虫入侵第12-13页
        1.5 弓形虫病第13页
    2 宿主免疫第13-14页
    3 弓形虫疫苗研究第14-16页
        3.1 灭活虫体、抗原或重组抗原第14页
        3.2 减毒活虫体疫苗第14-15页
        3.3 核酸疫苗第15页
        3.4 活载体疫苗第15-16页
    4 SAG1蛋白特性第16-17页
    5 GRA4蛋白特性第17页
    6 猫疱疹病毒1型第17-18页
    7 研究目的及意义第18-20页
材料与方法第20-29页
    1 材料第20-23页
        1.1 虫种及质粒第20页
        1.2 主要试剂第20页
        1.3 主要仪器第20-21页
        1.4 主各种溶液及培养基第21-23页
    2 方法第23-29页
        2.1 弓形虫RH的收集第23页
        2.2 引物设计第23-24页
        2.3 目的基因提取及克隆第24-25页
        2.4 重组表达质粒的构建及鉴定第25-26页
        2.5 重组蛋白的表达第26页
        2.6 重组蛋白的纯化第26页
        2.7 多克隆抗体的制备第26-27页
        2.8 多克隆抗体的间接免疫荧光实验第27页
        2.9 多克隆抗体的Western Blot分析第27页
        2.10 FHV-1转移载体及穿梭质粒的构建及酶切鉴定第27-28页
        2.11 在293T细胞中重组转移载体的表达第28页
        2.12 表达产物的Western blotting分析第28-29页
结果第29-37页
    3 目的基因的扩增及克隆第29-37页
        3.1 目的基因的扩增第29-30页
        3.2 原核表达载体的鉴定第30-31页
        3.3 重组蛋白的表达与纯化第31-32页
        3.4 间接免疫荧光第32-33页
        3.5 多克隆抗体的Western Blot分析第33-34页
        3.6 FHV-1转移载体及穿梭质粒的构建与鉴定第34-35页
        3.7 Western blot分析表达产物第35-37页
讨论第37-39页
结论第39-40页
参考文献第40-50页
致谢第50-51页
作者简介第51-52页
附录(在研期间发表的论文)第52页

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