摘要 | 第1-10页 |
ABSTRACT | 第10-12页 |
符号说明 | 第12-13页 |
前言 | 第13-16页 |
实验材料和方法 | 第16-28页 |
1. 实验材料与试剂 | 第16-17页 |
2. 实验仪器 | 第17-18页 |
3. 实验方法 | 第18-28页 |
·细胞培养 | 第18-19页 |
·反义核酸片段的设计、合成及转染 | 第19页 |
·倒置显微镜下观察细胞形态变化 | 第19-20页 |
·MTT法检测细胞活力 | 第20页 |
·Annexin Ⅴ-FITC检测细胞凋亡 | 第20页 |
·RT-PCR检测miRNA的表达 | 第20-25页 |
·实时定量PCR检测miRNA的表达 | 第25-26页 |
·miRNA靶基因预测软件分析miR-20、miR-106可能调控的下游基因 | 第26-27页 |
·ELISA法检测RB蛋白的表达 | 第27-28页 |
结果 | 第28-36页 |
1. 反义核酸作用对293T细胞形态的影响 | 第28-29页 |
2. 反义核酸对293T细胞增殖的抑制作用 | 第29-30页 |
3. 荧光倒置显微镜下观察细胞凋亡情况 | 第30页 |
4. 流式细胞仪检测细胞凋亡率 | 第30-31页 |
5. 反义核酸对细胞内相应的miRNA表达的影响 | 第31-34页 |
6. 反义核酸转染细胞后RB蛋白的表达变化 | 第34-36页 |
讨论 | 第36-42页 |
结论 | 第42-43页 |
参考文献 | 第43-49页 |
致谢 | 第49-50页 |
攻读学位期间发表的学术论文 | 第50-51页 |
学位论文评阅及答辩情况表 | 第51页 |