| 摘要 | 第5-7页 |
| Abstract | 第7-8页 |
| 目录 | 第9-12页 |
| 第一章 绪论 | 第12-25页 |
| 1.1 血管性血友病及其研究现状 | 第12-14页 |
| 1.1.1 血管性血友病的临床表现及发病机理 | 第12页 |
| 1.1.2 血管性血友病的分型 | 第12-14页 |
| 1.2 血管性血友病因子的研究进展 | 第14-19页 |
| 1.2.1 血管性血友病因子的合成与分泌 | 第14-15页 |
| 1.2.2 血管性血友病因子的分子结构 | 第15-16页 |
| 1.2.3 血管性血友病因子各结构域的结构及功能 | 第16-19页 |
| 1.3 国内外研究现状 | 第19-23页 |
| 1.3.1 VWF-A1 与血小板相互作用的研究进展 | 第19-21页 |
| 1.3.2 利用流动腔研究单分子对在流体剪应力下的相互作用 | 第21-23页 |
| 1.4 科学问题的提出及论文的主要内容 | 第23-25页 |
| 1.4.1 科学问题的提出 | 第23-24页 |
| 1.4.2 论文研究的主要内容 | 第24页 |
| 1.4.3 论文的结构安排 | 第24-25页 |
| 第二章 VWF-A1 分子在大肠杆菌中的可溶性表达及纯化 | 第25-41页 |
| 2.1 实验材料 | 第25-28页 |
| 2.1.1 质粒与菌种 | 第25页 |
| 2.1.2 试剂与耗材 | 第25页 |
| 2.1.3 实验仪器及设备 | 第25-26页 |
| 2.1.4 实验相关溶液的配制 | 第26-28页 |
| 2.2 实验方法 | 第28-35页 |
| 2.2.1 质粒转化大肠杆菌感受态细胞 | 第28页 |
| 2.2.2 质粒小提 | 第28-29页 |
| 2.2.3 提取质粒转化大肠杆菌感受态细胞 | 第29页 |
| 2.2.4 挑单克隆菌株及扩大培养 | 第29-30页 |
| 2.2.5 两种方法探索目的蛋白 VWF-A1 的可溶性表达 | 第30-31页 |
| 2.2.6 VWF-A1 的纯化 | 第31-32页 |
| 2.2.7 12 % SDS-PAGE 鉴定亲和层析纯化的 VWF-A1 的纯度 | 第32-33页 |
| 2.2.8 Western-blot 测定纯化产品的免疫活性 | 第33-34页 |
| 2.2.9 BCA 试剂盒对目的蛋白定量 | 第34-35页 |
| 2.3 实验结果 | 第35-39页 |
| 2.3.1 两种方法诱导 VWF-A1 的可溶性表达 | 第35-36页 |
| 2.3.2 SDS-PAGE、Western-blot 鉴定亲和层析纯化的结果 | 第36-38页 |
| 2.3.3 目的蛋白的定量结果 | 第38-39页 |
| 2.4 讨论 | 第39-40页 |
| 2.5 本章小结 | 第40-41页 |
| 第三章 VWF-A1 与血小板结合的功能鉴定 | 第41-49页 |
| 3.1 实验材料 | 第41-43页 |
| 3.1.1 血小板与蛋白分子 | 第41页 |
| 3.1.2 试剂与耗材 | 第41页 |
| 3.1.3 实验仪器及设备 | 第41-43页 |
| 3.2 实验方法 | 第43-45页 |
| 3.2.1 血小板的提取与纯化 | 第43-44页 |
| 3.2.2 平行平板流动腔实验准备 | 第44页 |
| 3.2.3 VWF-A1 与血小板的特异性相互作用 | 第44-45页 |
| 3.3 实验结果 | 第45-47页 |
| 3.4 讨论 | 第47-48页 |
| 3.5 本章小结 | 第48-49页 |
| 第四章 VWF-A1 在力学环境下介导的血小板钙信号激活 | 第49-62页 |
| 4.1 实验材料 | 第49-51页 |
| 4.1.1 血小板与蛋白分子 | 第49页 |
| 4.1.2 试剂与耗材 | 第49页 |
| 4.1.3 实验仪器及设备 | 第49-50页 |
| 4.1.4 实验相关溶液的配制 | 第50-51页 |
| 4.2 实验方法 | 第51-55页 |
| 4.2.1 血样的准备 | 第51-52页 |
| 4.2.2 平行平板流动腔实验准备 | 第52页 |
| 4.2.3 VWF-A1 介导的血小板钙信号激活的流动腔实验 | 第52-55页 |
| 4.3 实验结果 | 第55-59页 |
| 4.3.1 血小板钙信号的激活具有力的依赖性 | 第55-56页 |
| 4.3.2 在力学环境下血小板钙信号激活的不同类型 | 第56-57页 |
| 4.3.3 流体剪切率调控血小板钙信号激活时间 | 第57-58页 |
| 4.3.4 流体剪切率调控血小板钙信号激活水平 | 第58-59页 |
| 4.4 讨论 | 第59-61页 |
| 4.5 本章小结 | 第61-62页 |
| 总结与展望 | 第62-64页 |
| 参考文献 | 第64-72页 |
| 攻读硕士期间取得的研究成果 | 第72-73页 |
| 致谢 | 第73-74页 |
| 附件 | 第74页 |
