| 摘要 | 第4-5页 |
| ABSTRACT | 第5页 |
| 中英文缩略词表 | 第8-9页 |
| 第一章 绪论 | 第9-23页 |
| 1.1 转座子背景知识介绍 | 第9-17页 |
| 1.1.1 DNA转座子 | 第10页 |
| 1.1.2 逆转录转座子 | 第10-12页 |
| 1.1.3 逆转录转座子对人类的影响 | 第12-15页 |
| 1.1.4 逆转录转座子的宿主防御机制研究进展 | 第15-17页 |
| 1.2 P53蛋白介绍 | 第17-21页 |
| 1.2.1 P53蛋白简介 | 第17-18页 |
| 1.2.2 P53蛋白作用机制 | 第18-19页 |
| 1.2.3 P53蛋白的调节 | 第19页 |
| 1.2.4 P53基因突变及其危害 | 第19-20页 |
| 1.2.5 针对P53基因突变的治疗策略 | 第20-21页 |
| 1.3 P53蛋白与逆转录转座子相关报导 | 第21-23页 |
| 第二章 材料与方法 | 第23-41页 |
| 2.1 材料、试剂与仪器 | 第23-27页 |
| 2.1.1 菌株和细胞系 | 第23页 |
| 2.1.2 质粒构建 | 第23-24页 |
| 2.1.3 抗体 | 第24-25页 |
| 2.1.4 主要化学试剂 | 第25-26页 |
| 2.1.5 主要仪器 | 第26-27页 |
| 2.2 实验方法 | 第27-41页 |
| 2.2.1 一般PCR反应 | 第27-28页 |
| 2.2.2 定点突变PCR反应 | 第28-29页 |
| 2.2.3 快速琼脂糖凝胶DNA回收 | 第29页 |
| 2.2.4 连接反应 | 第29-30页 |
| 2.2.5 小提试剂盒法提取质粒 | 第30页 |
| 2.2.6 细胞培养 | 第30-31页 |
| 2.2.7 贴壁细胞PEI转染法(以12孔板为例) | 第31页 |
| 2.2.8 台盼蓝染色及活细胞计数 | 第31页 |
| 2.2.9 带有Flag标签的蛋白免疫共沉淀法 | 第31-32页 |
| 2.2.10 蛋白质免疫印迹(Westernblot) | 第32-34页 |
| 2.2.11 Trizol法提取RNA、反转录及实时荧光定量PCR | 第34-36页 |
| 2.2.12 逆转录转座子活性实验 | 第36-37页 |
| 2.2.13 LEAP实验 | 第37-40页 |
| 2.2.14 统计学分析 | 第40-41页 |
| 第三章 结果与讨论 | 第41-55页 |
| 3.1 P53蛋白调控逆转录转座子LINE-1的机制研究 | 第41-52页 |
| 3.1.1 P53蛋白及其突变体在HEK293T细胞中的表达 | 第41-42页 |
| 3.1.2 P53蛋白对HEK293T的细胞毒性 | 第42页 |
| 3.1.3 P53蛋白抑制LINE-1的逆转座活性 | 第42-44页 |
| 3.1.4 突变P53蛋白对LINE-1的调控作用 | 第44-46页 |
| 3.1.5 P53蛋白与LINE-1RNP的相互作用 | 第46-48页 |
| 3.1.6 P53蛋白对LINE-1ORF2p逆转录酶活性的影响 | 第48-50页 |
| 3.1.7 P53蛋白对LINE-1RNA水平的影响 | 第50-52页 |
| 3.2 讨论 | 第52-55页 |
| 3.2.1 P53蛋白与LINE-1RNP的结合作用 | 第52-53页 |
| 3.2.2 P53蛋白对ORF2p逆转录酶活性的调控作用 | 第53页 |
| 3.2.3 P53蛋白对LINE-1的mRNA水平上的调节 | 第53-55页 |
| 第四章 结论 | 第55-57页 |
| 参考文献 | 第57-65页 |
| 发表论文及参加科研情况 | 第65-67页 |
| 致谢 | 第67-68页 |
