摘要 | 第4-6页 |
Abstract | 第6-7页 |
第1章 前言 | 第10-12页 |
第2章 材料 | 第12-15页 |
2.1 实验主要仪器 | 第12页 |
2.2 主要溶液的配制 | 第12-15页 |
2.2.1 10%SDS溶液 | 第12-13页 |
2.2.2 LysisBuffer裂解液 | 第13页 |
2.2.3 5×TBE电泳缓冲液 | 第13页 |
2.2.4 电泳凝胶 | 第13页 |
2.2.5 固定液 | 第13页 |
2.2.6 RIPABuffer缓冲液 | 第13页 |
2.2.7 10×RunningBuffer电泳缓冲液 | 第13-14页 |
2.2.8 10×TransferBuffer转膜缓冲液 | 第14页 |
2.2.9 10×TBS溶液 | 第14页 |
2.2.10 10×TBS-T溶液 | 第14-15页 |
第3章 方法 | 第15-23页 |
3.1 动物伦理证明 | 第15页 |
3.2 Ift172生精细胞条件敲除小鼠模型的建立 | 第15页 |
3.3 小鼠基因型分析 | 第15-16页 |
3.4 小鼠生殖能力和繁殖能力评估 | 第16-17页 |
3.5 以野生型与Ift172生精细胞条件敲除小鼠为对象,提取睾丸组织总蛋白 | 第17页 |
3.6 BSA法蛋白浓度测定试剂盒测定小鼠睾丸组织蛋白浓度 | 第17页 |
3.7 蛋白印记(WesternBlot)分析小鼠睾丸组织中蛋白表达水平 | 第17-19页 |
3.8 小鼠附睾精子计数 | 第19页 |
3.9 小鼠附睾精子活力检测 | 第19-20页 |
3.10 小鼠生精细胞悬液的制备 | 第20页 |
3.11 小鼠生精细胞免疫荧光染色 | 第20-21页 |
3.12 小鼠睾丸和附睾组织HE染色 | 第21-22页 |
3.13 透射电镜(TEM)分析小鼠睾丸精子超微结构 | 第22-23页 |
第4章 结果 | 第23-33页 |
4.1 小鼠基因型结果分析 | 第23-24页 |
4.2 IFT172蛋白在小鼠生精细胞的长形精子期定位于精子领部位 | 第24页 |
4.3 Ift172条件敲除小鼠模型中,IFT172蛋白表达量明显下降 | 第24-25页 |
4.4 IFT172蛋白表达量下降导致雄性老鼠生育能力下降 | 第25-26页 |
4.5 Ift172条件敲除小鼠精子形态异常、精子数量和活力的下降 | 第26-27页 |
4.6 Ift172基因敲除导致精子形成过程缺陷 | 第27-29页 |
4.7 Ift172条件敲除小鼠的生精细胞中心体异常 | 第29页 |
4.8 Ift172条件敲除小鼠附睾精子超微结构异常 | 第29-31页 |
4.9 Ift172基因敲除后,ODF2、AKAP4蛋白表达水平明显下降 | 第31-33页 |
第5章 讨论 | 第33-36页 |
第6章 结语与展望 | 第36-37页 |
致谢 | 第37-38页 |
参考文献 | 第38-43页 |
综述 | 第43-50页 |
参考文献 | 第46-50页 |
附录1 攻读硕士学位期间发表的论文 | 第50-52页 |
附录2 攻读硕士学位期间从参加的科研项目 | 第52页 |