前言 | 第4-5页 |
中文摘要 | 第5-8页 |
Abstract | 第8-10页 |
英文缩略词 | 第13-14页 |
第1章 绪论 | 第14-16页 |
第2章 文献综述 | 第16-22页 |
第3章 材料与方法 | 第22-36页 |
3.1 实验材料 | 第22-25页 |
3.1.1 实验动物 | 第22页 |
3.1.2 实验细胞 | 第22页 |
3.1.3 实验试剂 | 第22-24页 |
3.1.4 实验设备 | 第24-25页 |
3.2 实验方法 | 第25-36页 |
3.2.1 实验动物处理及标本留取 | 第25页 |
3.2.2 人原代近端小管上皮细胞(HPTCs)的提取与培养 | 第25-26页 |
3.2.3 细胞免疫荧光 | 第26页 |
3.2.4 组织免疫组化 | 第26-27页 |
3.2.5 SA-β-gal 染色 | 第27页 |
3.2.6 肾组织 Masson 染色 | 第27-28页 |
3.2.7 western blot 检测 P53,p21,α-SMA 等蛋白表达 | 第28-30页 |
3.2.8 微囊泡的收集,荧光标记及透射电镜(TEM)观察 | 第30-31页 |
3.2.9 QRT-PCR | 第31-34页 |
3.2.10 miR-21inhibitor, mimics, siRNA-HIF1α转染 | 第34-35页 |
3.2.11 统计学处理 | 第35-36页 |
第4章 结果 | 第36-58页 |
4.1 长期限食可延缓衰老及衰老相关纤维化 | 第36-38页 |
4.2 高糖刺激人原代近端肾小管上皮细胞出现衰老及EMT表型,衰老表型改变早于 EMT | 第38-42页 |
4.3 微囊泡收集及功能鉴定 | 第42-43页 |
4.4 长期限食降低衰老肾组织及尿液微囊泡中 miR-21 表达 | 第43-45页 |
4.5 模拟限食下调微囊泡中 miR-21 可阻止衰老细胞通过旁分泌促邻近细胞发生 EMT | 第45-48页 |
4.5.1 高糖或者白藜芦醇诱导或者延缓细胞衰老时其细胞内及其分泌微囊泡中 miR-21 表达情况 | 第45-46页 |
4.5.2 miR-21 可能在衰老细胞分泌微囊泡促邻近细胞发生EMT 中发挥重要作用 | 第46-48页 |
4.6 miR-21 靶向调控 PPARα,通过 HIF1α促进 HPTCs EMT 发生 | 第48-58页 |
4.6.1 miR-21 对 PPARα的靶向调控 | 第48-49页 |
4.6.2 HIF1α、PPARα在 miR-21 促肾小管上皮细胞发生 EMT中作用 | 第49-58页 |
第5章 讨论 | 第58-62页 |
第6章 结论 | 第62-63页 |
参考文献 | 第63-71页 |
作者简介及在学期间所取得的研究成果 | 第71-72页 |
致谢 | 第72页 |