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抗狂犬病毒G蛋白单链抗体scFv98H的纯化和复性工艺研究

摘要第4-6页
Abstract第6-8页
缩略词表第9-14页
第一章 前言第14-38页
    一 狂犬病与狂犬病毒第14-17页
        (一) 狂犬病简介第14-15页
        (二) 狂犬病毒简介第15-17页
    二 抗体第17-22页
        (一) 抗体概述第17-19页
        (二) 单克隆抗体概述第19-20页
        (三) 小分子抗体概述第20-21页
        (四) 单链抗体概述第21-22页
    三 抗狂犬病毒抗体第22-24页
        (一) 抗狂犬病毒单克隆抗体第22-24页
        (二) 抗狂犬病毒单链抗体第24页
    四 重组蛋白下游纯化和复性技术第24-36页
        (一) 蛋白质纯化策略第24-27页
        (二) 蛋白质纯化技术第27-31页
        (三) 蛋白质复性技术第31-36页
    五 论文设计第36-38页
        (一) 论文目的第36页
        (二) 实验设计第36-38页
第二章 抗狂犬病毒 G 蛋白单链抗体 scFv98H 纯化工艺研究第38-57页
    一 材料、试剂和仪器第38-40页
        (一) 材料、试剂和试剂盒第38页
        (二) 主要溶液第38-39页
        (三) 主要仪器第39-40页
    二 实验方法第40-45页
        (一) 菌体破碎第40页
        (二) 包涵体洗涤和溶解第40-41页
        (三) scFv98H 纯化层析介质的选择第41-42页
        (四) Nuvia Q 强阴离子交换层析条件优化第42-43页
        (五) 复性后目的蛋白的分子筛层析纯化第43页
        (六) SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳第43-44页
        (七) BCA 法测定蛋白浓度第44页
        (八) 细菌内毒素检查(凝胶法-鲎试剂)第44页
        (九) 外源性 DNA 残留量测定(荧光染色法)第44-45页
    三 实验结果第45-55页
        (一) 包涵体洗涤和溶解第45页
        (二) scFv98H 纯化层析介质的选择第45-48页
        (三) Nuvia Q 强阴离子交换层析条件优化第48-54页
        (五) 复性后目的蛋白的分子筛层析纯化第54-55页
    四 讨论第55-56页
    五 小结第56-57页
第三章 抗狂犬病毒 G 蛋白单链抗体 scFv98H 复性工艺研究第57-74页
    一 材料、试剂和仪器第57-58页
        (一) 材料和试剂第57页
        (二) 主要溶液第57-58页
        (三) 主要仪器第58页
    二 实验方法第58-62页
        (一) scFv98H 透析复性第58页
        (二) scFv98H 柱上复性探索第58-60页
        (三) Qxl 柱上复性条件优化第60-61页
        (四) scFv98H 透析复性与柱上复性比较第61-62页
        (五) 抗体对狂犬病毒中和活性的研究第62页
    三 实验结果第62-72页
        (一) scFv98H 透析复性第62-63页
        (二) scFv98H 柱上复性探索第63-66页
        (三) Qxl 柱上复性条件优化第66-71页
        (四) scFv98H 透析复性与柱上复性比较第71-72页
    四 讨论第72-73页
    五 小结第73-74页
第四章 scFv98H 的生产工艺及产品的鉴定分析第74-84页
    一 材料、试剂与仪器第74-75页
        (一) 材料和试剂第74页
        (二) 主要溶液第74-75页
    二 实验方法第75-78页
        (一) 纯化及复性工艺的具体操作条件第75-76页
        (二) 产品纯度测定第76页
        (三) 产品 Western blot 分析第76-77页
        (四) 产品分子量测定第77页
        (五) 产品中和活性测定第77-78页
        (六) 产品 DNA、LPS 残留量测定第78页
        (七) 产品异常毒性研究第78页
    三 实验结果第78-83页
        (一) 纯化工艺和复性工艺总结第78-79页
        (二) 产品纯度测定第79-80页
        (三) 产品 Western blot 分析第80-81页
        (四) 产品分子量测定第81页
        (五) 产品中和活性测定第81页
        (六) 产品 DNA、LPS 残留量测定第81页
        (七) 产品异常毒性研究第81-83页
    四 小结第83-84页
结论第84-85页
参考文献第85-89页
作者简介第89页
在学期间主要科研成果第89-90页
致谢第90页

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