| 摘要 | 第7-9页 |
| ABSTRACT | 第9-10页 |
| 1 绪论 | 第12-19页 |
| 1.1 研究背景 | 第12页 |
| 1.2 生物质资源利用现状 | 第12-13页 |
| 1.3 生物质降解的研究进展 | 第13-15页 |
| 1.3.1 降解生物质的微生物类群 | 第13-15页 |
| 1.3.2 生物质降解的相关酶类 | 第15页 |
| 1.4 筛选生物质降解菌的方法 | 第15-16页 |
| 1.5 应用于生物质降解的基因工程菌研究进展 | 第16-17页 |
| 1.6 活性氧及其植物相关的活性氧代谢酶类 | 第17-18页 |
| 1.7 研究目的及意义 | 第18-19页 |
| 2 材料与方法 | 第19-32页 |
| 2.1 实验仪器 | 第19-20页 |
| 2.2 实验材料 | 第20页 |
| 2.3 常用实验试剂 | 第20-24页 |
| 2.4 实验方法 | 第24-32页 |
| 2.4.1 愈创木酚法筛选木质素降解菌 | 第24页 |
| 2.4.2 降解秸秆工程菌受体菌株筛选与鉴定 | 第24-25页 |
| 2.4.3 受体菌株感受态细胞制备 | 第25-26页 |
| 2.4.4 引物设计及订购 | 第26-27页 |
| 2.4.5 转化 | 第27页 |
| 2.4.6 生长曲线 | 第27-28页 |
| 2.4.7 菌落PCR | 第28页 |
| 2.4.8 提取质粒PCR检测 | 第28页 |
| 2.4.9 挑菌培养 | 第28-29页 |
| 2.4.10 IPTG诱导 | 第29页 |
| 2.4.11 重溶破菌 | 第29页 |
| 2.4.12 SDS-PAGE检测表达蛋白 | 第29页 |
| 2.4.13 Western免疫印迹 | 第29-30页 |
| 2.4.14 工程菌株对玉米秸秆的降解性能测定 | 第30-32页 |
| 3 结果与分析 | 第32-54页 |
| 3.1 愈创木酚法筛选木质素降解的菌株 | 第32-35页 |
| 3.2 降解玉米秸秆菌株的筛选 | 第35-38页 |
| 3.3 1-5菌株的特性分析 | 第38-40页 |
| 3.4 1-5菌株感受态的制备 | 第40-42页 |
| 3.5 转拟南芥活性氧代谢相关基因1-5转基因菌株的构建 | 第42-43页 |
| 3.6 转基因1-5菌株的鉴定 | 第43-45页 |
| 3.6.1 菌落PCR与提取质粒检测 | 第43-44页 |
| 3.6.2 1-5转基因菌株生长曲线 | 第44-45页 |
| 3.7 1-5转基因菌株总蛋白的提取和Western印迹 | 第45-48页 |
| 3.7.1 总蛋白提取 | 第45-47页 |
| 3.7.2 蛋白纯化 | 第47-48页 |
| 3.8 转基因菌株1-5降解玉米秸秆性能检测 | 第48-54页 |
| 3.8.1 直观检测木质纤维素含量变化 | 第48-50页 |
| 3.8.2 玉米秸秆降解过程中木质素等含量变化 | 第50-54页 |
| 4 讨论 | 第54-57页 |
| 4.1 愈创木酚法筛选腐木木质素降解菌株条件的优化 | 第54页 |
| 4.2 玉米秸秆菌株构建的分析 | 第54-55页 |
| 4.3 玉米秸秆1-5转基因菌株的特性分析 | 第55-56页 |
| 4.3.1 蛋白表达分析 | 第55页 |
| 4.3.2 降解秸秆性能分析 | 第55-56页 |
| 4.4 展望 | 第56-57页 |
| 参考文献 | 第57-62页 |
| 攻读硕士学位期间取得的研究成果 | 第62-64页 |
| 致谢 | 第64页 |
