摘要 | 第4-5页 |
Abstract | 第5-6页 |
1 绪论 | 第10-15页 |
1.1 辽宁绒山羊 | 第10页 |
1.2 绒山羊国内外研究进展 | 第10-11页 |
1.3 OCIAD2研究进展 | 第11-12页 |
1.4 BMP及其介导的BMP信号通路 | 第12-13页 |
1.4.1 BMP | 第12页 |
1.4.2 BMP信号通路 | 第12-13页 |
1.5 Noggin基因概述 | 第13-14页 |
1.6 本研究的目的及意义 | 第14-15页 |
2 辽宁绒山羊OCIAD2基因序列分析 | 第15-24页 |
2.1 序列来源 | 第15页 |
2.2 实验方法 | 第15页 |
2.3 OCIAD2的生物信息学分析 | 第15-23页 |
2.4 讨论 | 第23-24页 |
3 辽宁绒山羊OCIAD2基因在不同组织中的表达情况 | 第24-30页 |
3.1 实验材料 | 第24-25页 |
3.1.1 实验样本 | 第24页 |
3.1.2 实验试剂及仪器 | 第24-25页 |
3.2 实验方法 | 第25-27页 |
3.2.1 各组织总RNA的提取 | 第25页 |
3.2.2 各组织总RNA的检测 | 第25-26页 |
3.2.3 反转录反应 | 第26页 |
3.2.4 PCR反应 | 第26-27页 |
3.3 实验结果 | 第27-29页 |
3.3.1 RNA提取 | 第27-28页 |
3.3.2 RT-PCR | 第28-29页 |
3.4 讨论 | 第29-30页 |
3.4.1 实验结果讨论 | 第29页 |
3.4.2 实验注意事项 | 第29-30页 |
4 辽宁绒山羊OCIAD2基因在皮肤中的定位分析 | 第30-37页 |
4.1 实验材料 | 第30-31页 |
4.1.1 实验样本及处理 | 第30页 |
4.1.2 实验试剂及仪器 | 第30-31页 |
4.2 实验方法 | 第31-33页 |
4.2.1 原位杂交相关试剂配方 | 第31页 |
4.2.2 载玻片的处理 | 第31页 |
4.2.3 制备皮肤组织石蜡切片 | 第31-32页 |
4.2.4 探针的制备 | 第32页 |
4.2.5 原位杂交预处理及探针杂交和检测 | 第32-33页 |
4.3 实验结果 | 第33-36页 |
4.3.1 提取RNA结果 | 第33页 |
4.3.2 原位杂交结果 | 第33-36页 |
4.4 讨论 | 第36-37页 |
4.4.1 原位杂交结果讨论 | 第36页 |
4.4.2 原位杂交注意事项 | 第36-37页 |
5 辽宁绒山羊OCIAD2基因在初次级毛囊中的定量分析 | 第37-43页 |
5.1 实验材料 | 第37页 |
5.1.1 实验样品 | 第37页 |
5.1.2 实验试剂及仪器 | 第37页 |
5.2 实验方法 | 第37-38页 |
5.2.1 初次级毛囊的总RNA提取 | 第37页 |
5.2.2 反转录反应 | 第37页 |
5.2.3 Real Time PCR | 第37-38页 |
5.3 实验结果 | 第38-41页 |
5.3.1 RNA提取 | 第38-39页 |
5.3.2 实时荧光定量 | 第39-41页 |
5.4 讨论 | 第41-43页 |
5.4.1 实验结果讨论 | 第41页 |
5.4.2 实验注意事项 | 第41-43页 |
6 Noggin基因干扰慢病毒及干扰Noggin基因后OCIAD2基因的表达研究 | 第43-53页 |
6.1 实验材料 | 第43-44页 |
6.1.1 实验所用细胞及慢病毒液 | 第43页 |
6.1.2 实验试剂及仪器 | 第43-44页 |
6.2 实验方法 | 第44-46页 |
6.2.1 细胞培养 | 第44页 |
6.2.2 目的病毒及阴性对照腺病毒感染目的细胞 | 第44页 |
6.2.3 病毒感染后的细胞中抽提总RNA | 第44页 |
6.2.4 RNA反转录成cDNA | 第44-45页 |
6.2.5 qPCR引物设计 | 第45页 |
6.2.6 qPCR实验 | 第45-46页 |
6.3 实验结果 | 第46-52页 |
6.3.1 病毒感染前后细胞图片 | 第46-48页 |
6.3.2 RT-PCR预实验 | 第48-49页 |
6.3.3 RNA抽提电泳图 | 第49-50页 |
6.3.4 qPCR数据分析 | 第50-52页 |
6.4 讨论 | 第52-53页 |
结论 | 第53-54页 |
参考文献 | 第54-58页 |
附录A 原位杂交相关试剂配方 | 第58-60页 |
附录B 不同时期 β-Actin、OCIAD2基因的扩增曲线和融解曲线图 | 第60-63页 |
附录C 目的病毒及阴性对照腺病毒感染目的细胞,病毒干扰后的细胞中抽提总RNA | 第63-64页 |
致谢 | 第64页 |