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辽宁绒山羊新基因OCIAD2生物学功能研究

摘要第4-5页
Abstract第5-6页
1 绪论第10-15页
    1.1 辽宁绒山羊第10页
    1.2 绒山羊国内外研究进展第10-11页
    1.3 OCIAD2研究进展第11-12页
    1.4 BMP及其介导的BMP信号通路第12-13页
        1.4.1 BMP第12页
        1.4.2 BMP信号通路第12-13页
    1.5 Noggin基因概述第13-14页
    1.6 本研究的目的及意义第14-15页
2 辽宁绒山羊OCIAD2基因序列分析第15-24页
    2.1 序列来源第15页
    2.2 实验方法第15页
    2.3 OCIAD2的生物信息学分析第15-23页
    2.4 讨论第23-24页
3 辽宁绒山羊OCIAD2基因在不同组织中的表达情况第24-30页
    3.1 实验材料第24-25页
        3.1.1 实验样本第24页
        3.1.2 实验试剂及仪器第24-25页
    3.2 实验方法第25-27页
        3.2.1 各组织总RNA的提取第25页
        3.2.2 各组织总RNA的检测第25-26页
        3.2.3 反转录反应第26页
        3.2.4 PCR反应第26-27页
    3.3 实验结果第27-29页
        3.3.1 RNA提取第27-28页
        3.3.2 RT-PCR第28-29页
    3.4 讨论第29-30页
        3.4.1 实验结果讨论第29页
        3.4.2 实验注意事项第29-30页
4 辽宁绒山羊OCIAD2基因在皮肤中的定位分析第30-37页
    4.1 实验材料第30-31页
        4.1.1 实验样本及处理第30页
        4.1.2 实验试剂及仪器第30-31页
    4.2 实验方法第31-33页
        4.2.1 原位杂交相关试剂配方第31页
        4.2.2 载玻片的处理第31页
        4.2.3 制备皮肤组织石蜡切片第31-32页
        4.2.4 探针的制备第32页
        4.2.5 原位杂交预处理及探针杂交和检测第32-33页
    4.3 实验结果第33-36页
        4.3.1 提取RNA结果第33页
        4.3.2 原位杂交结果第33-36页
    4.4 讨论第36-37页
        4.4.1 原位杂交结果讨论第36页
        4.4.2 原位杂交注意事项第36-37页
5 辽宁绒山羊OCIAD2基因在初次级毛囊中的定量分析第37-43页
    5.1 实验材料第37页
        5.1.1 实验样品第37页
        5.1.2 实验试剂及仪器第37页
    5.2 实验方法第37-38页
        5.2.1 初次级毛囊的总RNA提取第37页
        5.2.2 反转录反应第37页
        5.2.3 Real Time PCR第37-38页
    5.3 实验结果第38-41页
        5.3.1 RNA提取第38-39页
        5.3.2 实时荧光定量第39-41页
    5.4 讨论第41-43页
        5.4.1 实验结果讨论第41页
        5.4.2 实验注意事项第41-43页
6 Noggin基因干扰慢病毒及干扰Noggin基因后OCIAD2基因的表达研究第43-53页
    6.1 实验材料第43-44页
        6.1.1 实验所用细胞及慢病毒液第43页
        6.1.2 实验试剂及仪器第43-44页
    6.2 实验方法第44-46页
        6.2.1 细胞培养第44页
        6.2.2 目的病毒及阴性对照腺病毒感染目的细胞第44页
        6.2.3 病毒感染后的细胞中抽提总RNA第44页
        6.2.4 RNA反转录成cDNA第44-45页
        6.2.5 qPCR引物设计第45页
        6.2.6 qPCR实验第45-46页
    6.3 实验结果第46-52页
        6.3.1 病毒感染前后细胞图片第46-48页
        6.3.2 RT-PCR预实验第48-49页
        6.3.3 RNA抽提电泳图第49-50页
        6.3.4 qPCR数据分析第50-52页
    6.4 讨论第52-53页
结论第53-54页
参考文献第54-58页
附录A 原位杂交相关试剂配方第58-60页
附录B 不同时期 β-Actin、OCIAD2基因的扩增曲线和融解曲线图第60-63页
附录C 目的病毒及阴性对照腺病毒感染目的细胞,病毒干扰后的细胞中抽提总RNA第63-64页
致谢第64页

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