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表达乙肝病毒受体人ASGPR转基因小鼠的建立

摘要第6-7页
ABSTRACT第7-8页
文献综述第11-21页
    第一章 乙肝病毒受体及乙肝动物模型研究进展第11-21页
        1.1 HBV 的结构和乙肝的发病机理第11-13页
            1.1.1 HBV 的结构第11-12页
            1.1.2 乙肝的发病机理第12-13页
        1.2 主要的HBV 受体第13-17页
            1.2.1 白蛋白受体(PHSA)第13页
            1.2.2 脱唾液酸糖蛋白受体(ASGPR)第13-14页
            1.2.3 免疫球蛋白A 的受体(IgA)第14-15页
            1.2.4 膜连接素(Annexin V)第15页
            1.2.5 乙肝病毒结合蛋白(HBV Binding Protein)第15-16页
            1.2.6 白细胞介素6(Interleukin-6,IL-6)第16页
            1.2.7 其他受体蛋白第16-17页
        1.3 乙肝动物模型第17-19页
            1.3.1 天然性地感染HBV 的动物模型第17-18页
            1.3.2 HBV DNA 转基因小鼠模型第18-19页
            1.3.3 人鼠嵌合肝模型第19页
        1.4 问题与展望第19-20页
        1.5 本研究的目的与主要内容第20-21页
实验研究第21-52页
    第二章 HBV 病毒受体人脱唾液酸糖蛋白基因的克隆与表达载体的构建第21-33页
        2.1 材料第21-22页
            2.1.1 菌株和载体第21页
            2.1.2 生化与分子生物学试剂第21-22页
            2.1.3 主要溶液第22页
            2.1.4 主要仪器第22页
        2.2 方法第22-27页
            2.2.1 质粒提取第22-23页
            2.2.2 扩增和鉴定ASGPR H1 和ASGPR H2 基因用PCR 引物的合成第23页
            2.2.3 琼脂糖凝胶电泳分离PCR 产物的回收与纯化第23-24页
            2.2.4 PCAGGS-ASGPR H1 和PCAGGS-ASGPR H2 转基因载体的构建第24-26页
            2.2.5 转基因载体的鉴定第26-27页
        2.3 结果第27-31页
            2.3.1 ASGPR H1 和 ASGPR H2 基因的克隆与鉴定第27-28页
            2.3.2 显微注射用转基因载体的构建第28-31页
        2.4 讨论第31页
        2.5 小结第31-33页
    第三章 表达人 ASGPR 转基因小鼠模型的建立第33-52页
        3.1 材料第33-35页
            3.1.1 质粒与菌株第33页
            3.1.2 工具酶与试剂第33-34页
            3.1.3 主要溶液第34-35页
            3.1.4 实验动物第35页
            3.1.5 实验仪器第35页
        3.2 方法第35-46页
            3.2.1 PCAGGS-H1、PCAGGS-H2 显微注射片断的制备第35-36页
            3.2.2 显微注射制备转基因小鼠第36-37页
            3.2.3 小鼠鼠尾基因组DNA 的制备第37-38页
            3.2.4 转基因小鼠基因型的鉴定第38页
            3.2.5 转基因小鼠的Southern blot 检测第38-42页
            3.2.6 小鼠肝脏组织总RNA 的提取第42页
            3.2.7 RNA 中微量DNA 的去除第42-43页
            3.2.8 RT-PCR 检测转基因小鼠体内ASGPR 的转录第43-44页
            3.2.9 转基因小鼠的Western blot 检测第44-46页
        3.3 结果第46-50页
            3.3.1 PCAGGS-H1 和 PCAGGS-H2 转基因载体注射片断的准备第46页
            3.3.2 PCAGGS-H1 和 PCAGGS-H2 转基因载体的显微注射(图3-1)第46-47页
            3.3.3 转基因小鼠的基因型鉴定第47-48页
            3.3.4 ASGPR H1 和 ASGPR H2 在转基因小鼠体内的转录第48-49页
            3.3.5 转基因小鼠肝组织中ASGPR H1 和ASGPR H2 的表达第49-50页
        3.4 讨论第50-51页
        3.5 小结第51-52页
结论第52-53页
参考文献第53-57页
缩略词表第57-58页
致谢第58-59页
作者简介第59页

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