摘要 | 第6-7页 |
ABSTRACT | 第7-8页 |
文献综述 | 第11-21页 |
第一章 乙肝病毒受体及乙肝动物模型研究进展 | 第11-21页 |
1.1 HBV 的结构和乙肝的发病机理 | 第11-13页 |
1.1.1 HBV 的结构 | 第11-12页 |
1.1.2 乙肝的发病机理 | 第12-13页 |
1.2 主要的HBV 受体 | 第13-17页 |
1.2.1 白蛋白受体(PHSA) | 第13页 |
1.2.2 脱唾液酸糖蛋白受体(ASGPR) | 第13-14页 |
1.2.3 免疫球蛋白A 的受体(IgA) | 第14-15页 |
1.2.4 膜连接素(Annexin V) | 第15页 |
1.2.5 乙肝病毒结合蛋白(HBV Binding Protein) | 第15-16页 |
1.2.6 白细胞介素6(Interleukin-6,IL-6) | 第16页 |
1.2.7 其他受体蛋白 | 第16-17页 |
1.3 乙肝动物模型 | 第17-19页 |
1.3.1 天然性地感染HBV 的动物模型 | 第17-18页 |
1.3.2 HBV DNA 转基因小鼠模型 | 第18-19页 |
1.3.3 人鼠嵌合肝模型 | 第19页 |
1.4 问题与展望 | 第19-20页 |
1.5 本研究的目的与主要内容 | 第20-21页 |
实验研究 | 第21-52页 |
第二章 HBV 病毒受体人脱唾液酸糖蛋白基因的克隆与表达载体的构建 | 第21-33页 |
2.1 材料 | 第21-22页 |
2.1.1 菌株和载体 | 第21页 |
2.1.2 生化与分子生物学试剂 | 第21-22页 |
2.1.3 主要溶液 | 第22页 |
2.1.4 主要仪器 | 第22页 |
2.2 方法 | 第22-27页 |
2.2.1 质粒提取 | 第22-23页 |
2.2.2 扩增和鉴定ASGPR H1 和ASGPR H2 基因用PCR 引物的合成 | 第23页 |
2.2.3 琼脂糖凝胶电泳分离PCR 产物的回收与纯化 | 第23-24页 |
2.2.4 PCAGGS-ASGPR H1 和PCAGGS-ASGPR H2 转基因载体的构建 | 第24-26页 |
2.2.5 转基因载体的鉴定 | 第26-27页 |
2.3 结果 | 第27-31页 |
2.3.1 ASGPR H1 和 ASGPR H2 基因的克隆与鉴定 | 第27-28页 |
2.3.2 显微注射用转基因载体的构建 | 第28-31页 |
2.4 讨论 | 第31页 |
2.5 小结 | 第31-33页 |
第三章 表达人 ASGPR 转基因小鼠模型的建立 | 第33-52页 |
3.1 材料 | 第33-35页 |
3.1.1 质粒与菌株 | 第33页 |
3.1.2 工具酶与试剂 | 第33-34页 |
3.1.3 主要溶液 | 第34-35页 |
3.1.4 实验动物 | 第35页 |
3.1.5 实验仪器 | 第35页 |
3.2 方法 | 第35-46页 |
3.2.1 PCAGGS-H1、PCAGGS-H2 显微注射片断的制备 | 第35-36页 |
3.2.2 显微注射制备转基因小鼠 | 第36-37页 |
3.2.3 小鼠鼠尾基因组DNA 的制备 | 第37-38页 |
3.2.4 转基因小鼠基因型的鉴定 | 第38页 |
3.2.5 转基因小鼠的Southern blot 检测 | 第38-42页 |
3.2.6 小鼠肝脏组织总RNA 的提取 | 第42页 |
3.2.7 RNA 中微量DNA 的去除 | 第42-43页 |
3.2.8 RT-PCR 检测转基因小鼠体内ASGPR 的转录 | 第43-44页 |
3.2.9 转基因小鼠的Western blot 检测 | 第44-46页 |
3.3 结果 | 第46-50页 |
3.3.1 PCAGGS-H1 和 PCAGGS-H2 转基因载体注射片断的准备 | 第46页 |
3.3.2 PCAGGS-H1 和 PCAGGS-H2 转基因载体的显微注射(图3-1) | 第46-47页 |
3.3.3 转基因小鼠的基因型鉴定 | 第47-48页 |
3.3.4 ASGPR H1 和 ASGPR H2 在转基因小鼠体内的转录 | 第48-49页 |
3.3.5 转基因小鼠肝组织中ASGPR H1 和ASGPR H2 的表达 | 第49-50页 |
3.4 讨论 | 第50-51页 |
3.5 小结 | 第51-52页 |
结论 | 第52-53页 |
参考文献 | 第53-57页 |
缩略词表 | 第57-58页 |
致谢 | 第58-59页 |
作者简介 | 第59页 |