| 目录 | 第3-5页 |
| 摘要 | 第5-6页 |
| Abstract | 第6-7页 |
| 主要英文缩略表 | 第8-10页 |
| 第一章 前言 | 第10-16页 |
| 第一节 胰高血糖素及其受体的生理功能 | 第10-11页 |
| 第二节 胰高血糖素在2型糖尿病发病及治疗中的重要性 | 第11-12页 |
| 第三节 胰高血糖素受体的结构生物学研究意义 | 第12-16页 |
| 第二章 胰高血糖素受体胞外区在大肠杆菌系统的表达及纯化 | 第16-40页 |
| 第一节 整体实验方法和基本性质预测 | 第16-19页 |
| 第二节 实验方法 | 第19-29页 |
| 2.2.1 GCGR-ECD不同截短体蛋白在大肠杆菌BL21的表达纯化 | 第19-22页 |
| 2.2.2 DsbC融合的GCGR-ECD蛋白在大肠杆菌BL21的表达纯化 | 第22-25页 |
| 2.2.3 MBP融合蛋白在大肠杆菌Origami B的表达纯化 | 第25-28页 |
| 2.2.4 硫酸铵沉淀法纯化大肠杆菌二硫键异构酶DsbC | 第28-29页 |
| 第三节 实验结果 | 第29-38页 |
| 2.3.1 非融合性蛋白的表达结果 | 第29-30页 |
| 2.3.2 DsbC融合蛋白的表达及纯化结果 | 第30-34页 |
| 2.3.3 MBP融合的GCGR-ECD以及GCGR-ECD-Gc蛋白表达及纯化 | 第34-38页 |
| 第四节 实验结论 | 第38-40页 |
| 第三章 胰高血糖素受体胞外区在昆虫系统的表达 | 第40-53页 |
| 第一节 实验方法 | 第40-45页 |
| 3.1.1 GCGR-ECD(27-136)截短体在昆虫细胞内的表达 | 第40-43页 |
| 3.1.2 GCGR-ECD在昆虫细胞系统的分泌性表达及纯化 | 第43-45页 |
| 3.1.3 GCGR-ECD其他截短体以及突变体在昆虫细胞系统的分泌性表达 | 第45页 |
| 第二节 实验结果 | 第45-52页 |
| 3.2.1 GCGR-ECD(27-136)在昆虫细胞内的表达及纯化 | 第45-47页 |
| 3.2.2 GCGR-ECD(27-136)在昆虫系统的分泌性表达以及信号肽筛选 | 第47-50页 |
| 3.2.3 GCGR-ECD其他截短体及突变体在昆虫系统的分泌性表达 | 第50-52页 |
| 第三节 实验结论 | 第52-53页 |
| 第四章 重组GCGR-ECD蛋白的生物化学性质检测及分析 | 第53-62页 |
| 第一节 实验方法 | 第53-55页 |
| 4.1.1 等温滴定量热法 | 第53-55页 |
| 4.1.2 分子筛Superdex75检測去糖基化蛋白与胰高血糖素的相互作用 | 第55页 |
| 第二节 实验结果 | 第55-60页 |
| 4.2.1 ITC检测结果 | 第55-59页 |
| 4.2.2 分子筛检测GCGR-ECD蛋白与胰高血糖素的相互作用 | 第59-60页 |
| 第三节 实验结论 | 第60-62页 |
| 第五章 重组GCGR-ECD蛋白的生物物理性质检测以及结晶 | 第62-74页 |
| 第一节 重组GCGR-ECD蛋白的生物物理性质检测 | 第62-68页 |
| 5.1.1 实验方法 | 第62-64页 |
| 5.1.2 实验结果 | 第64-68页 |
| 第二节 悬滴气相扩散法筛选蛋白质结晶条件 | 第68-73页 |
| 5.2.1 实验方法 | 第68-69页 |
| 5.2.2 实验结果 | 第69-73页 |
| 第三节 实验结论 | 第73-74页 |
| 第六章 讨论 | 第74-77页 |
| 第一节 胰高血糖素受体胞外区的重组表达特点 | 第74页 |
| 第二节 胰高血糖素受体胞外区的结晶困难 | 第74-75页 |
| 第三节 胰高血糖素受体胞外区对其配体亲和力的讨论 | 第75-76页 |
| 第四节 胰高血糖素受体的结构生物学研究展望 | 第76-77页 |
| 综述 G蛋白偶联受体的结构生物学研究进展 | 第77-93页 |
| 第一节 G蛋白偶联受体概述 | 第77-79页 |
| 第二节 家族A GPCR的结构生物学研究 | 第79-84页 |
| 第三节 家族B GPCR胞外区结构的研究概述 | 第84-89页 |
| 第四节 家族C GPCR的结构生物学研究简述 | 第89-93页 |
| 参考文献 | 第93-96页 |
| 在读期间发表论文 | 第96-97页 |
| 致谢 | 第97-98页 |
