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MicroRNA-154抑制肺癌细胞增殖、侵袭和转移生物学作用研究

前言第4-6页
中文摘要第6-11页
Abstract第11-15页
主要缩略词表第20-22页
第1章 MIR-154对NSCLC组织临床病理特征的影响第22-30页
    1.1 引言第22-23页
    1.2 主要实验试剂、材料及设备第23-24页
        1.2.1 主要实验试剂第23页
        1.2.2 主要实验材料及设备第23-24页
    1.3 主要试验方法第24-27页
        1.3.1 组织样本收集第24页
        1.3.2 NSCLC肿瘤组织中RNA的提取第24-25页
        1.3.3 qRT-PCR检测NSCLC肿瘤组织中MiR-154表达第25-26页
        1.3.4 统计分析第26-27页
    1.4 实验结果第27-29页
        1.4.1 NSCLC组织中MiR-154的表达降低第27页
        1.4.2 MiR-154表达与临床病理学特征关系第27-28页
        1.4.3 MiR-154与肺癌生存期关系第28-29页
    1.5 讨论第29-30页
第2章 体内、体外实验MIR-154对NSCLC细胞生长的影响第30-56页
    2.1 引言第30页
    2.2 主要实验试剂、材料及设备第30-33页
        2.2.1 主要实验对象第30页
        2.2.2 主要实验试剂第30-32页
        2.2.3 主要实验材料及设备第32-33页
    2.3 主要实验方法第33-43页
        2.3.1 NSCLC细胞培养第33-34页
        2.3.2 NSCLC细胞的RNA提取第34页
        2.3.3 qRT-PCR检测MiR-154在肺癌细胞系中的表达第34-35页
        2.3.4 瞬时转染第35-36页
        2.3.5 细胞增殖测定法(CCK8法检测细胞的增殖)第36页
        2.3.6 集落形成实验第36-37页
        2.3.7 细胞周期检测第37页
        2.3.8 细胞划痕试验第37-38页
        2.3.9 细胞侵袭检测第38页
        2.3.10 Western Blot(Caspase3、Caspase-8 和EMT)第38-41页
        2.3.11 BALB/cNude SPF级近交系小鼠皮下移植瘤实验第41-42页
        2.3.12 统计分析第42-43页
    2.4 实验结果第43-54页
        2.4.1 MiR-154在NSCLC细胞系中的表达第43页
        2.4.2 qRT-PCR检测MiR-154转染有效性第43-44页
        2.4.3 CCK8实验分析MiR-154对NSCLC细胞增殖的影响第44-45页
        2.4.4 细胞集落实验分析 MiR-154 对 NSCLC 细胞增殖的影响第45-46页
        2.4.5 流式细胞实验MiR-154 对 NSCLC 细胞周期的影响第46-47页
        2.4.6 MiR-154对NSCLC细胞凋亡的影响第47-48页
        2.4.7 MiR-154对NSCLC细胞迁移能力的影响第48-49页
        2.4.8 MiR-154对肺癌细胞侵袭能力的影响第49-51页
        2.4.9 MiR-154可以抑制上皮间质转化 (EMT)第51-52页
        2.4.10 MiR-154抑制小鼠体内NSCLC肿瘤生长第52-53页
        2.4.11 裸鼠体内肿瘤MiR-154表达活性检测第53-54页
    2.5 讨论第54-56页
第3章 MIR-154调节ZEB2抑制NSCLC细胞的生长第56-82页
    3.1 引言第56-57页
    3.2 主要实验试剂、材料及设备第57-60页
        3.2.1 主要实验试剂第57-59页
        3.2.2 主要实验材料及设备第59-60页
    3.3 主要实验方法第60-72页
        3.3.1 细胞培养第60-61页
        3.3.2 质粒的构建及转染(pcDNA3.0-ZEB2)第61-65页
        3.3.3 SIRNA转染(si-ZEB2)第65-66页
        3.3.4 细胞侵袭实验第66页
        3.3.5 qRT-PCR(ZEB2表达的检测)第66-68页
        3.3.6 Western Blot (ZEB2和EMT的蛋白表达检测)第68-71页
        3.3.7 统计分析第71-72页
    3.4 实验结果第72-80页
        3.4.1 MiR-154抑制NSCLC细胞侵袭第72-73页
        3.4.2 NSCLC中ZEB2是MiR-154的靶向基因第73页
        3.4.3 MiR-154与3'-UTR结合的测定第73-74页
        3.4.4 MiR-154调控ZEB2和EMT第74-76页
        3.4.5 ZEB2表达降低对NSCLC细胞的影响第76-78页
        3.4.6 ZEB2表达增加减弱MiR-154对A549迁移和侵袭能力的抑制第78-80页
    3.5 讨论第80-82页
全文总结第82-86页
综述第86-99页
参考文献第99-122页
作者简介及在学期间所取得的科研成果第122-124页
致谢第124页

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