前言 | 第4-6页 |
中文摘要 | 第6-11页 |
Abstract | 第11-15页 |
主要缩略词表 | 第20-22页 |
第1章 MIR-154对NSCLC组织临床病理特征的影响 | 第22-30页 |
1.1 引言 | 第22-23页 |
1.2 主要实验试剂、材料及设备 | 第23-24页 |
1.2.1 主要实验试剂 | 第23页 |
1.2.2 主要实验材料及设备 | 第23-24页 |
1.3 主要试验方法 | 第24-27页 |
1.3.1 组织样本收集 | 第24页 |
1.3.2 NSCLC肿瘤组织中RNA的提取 | 第24-25页 |
1.3.3 qRT-PCR检测NSCLC肿瘤组织中MiR-154表达 | 第25-26页 |
1.3.4 统计分析 | 第26-27页 |
1.4 实验结果 | 第27-29页 |
1.4.1 NSCLC组织中MiR-154的表达降低 | 第27页 |
1.4.2 MiR-154表达与临床病理学特征关系 | 第27-28页 |
1.4.3 MiR-154与肺癌生存期关系 | 第28-29页 |
1.5 讨论 | 第29-30页 |
第2章 体内、体外实验MIR-154对NSCLC细胞生长的影响 | 第30-56页 |
2.1 引言 | 第30页 |
2.2 主要实验试剂、材料及设备 | 第30-33页 |
2.2.1 主要实验对象 | 第30页 |
2.2.2 主要实验试剂 | 第30-32页 |
2.2.3 主要实验材料及设备 | 第32-33页 |
2.3 主要实验方法 | 第33-43页 |
2.3.1 NSCLC细胞培养 | 第33-34页 |
2.3.2 NSCLC细胞的RNA提取 | 第34页 |
2.3.3 qRT-PCR检测MiR-154在肺癌细胞系中的表达 | 第34-35页 |
2.3.4 瞬时转染 | 第35-36页 |
2.3.5 细胞增殖测定法(CCK8法检测细胞的增殖) | 第36页 |
2.3.6 集落形成实验 | 第36-37页 |
2.3.7 细胞周期检测 | 第37页 |
2.3.8 细胞划痕试验 | 第37-38页 |
2.3.9 细胞侵袭检测 | 第38页 |
2.3.10 Western Blot(Caspase3、Caspase-8 和EMT) | 第38-41页 |
2.3.11 BALB/cNude SPF级近交系小鼠皮下移植瘤实验 | 第41-42页 |
2.3.12 统计分析 | 第42-43页 |
2.4 实验结果 | 第43-54页 |
2.4.1 MiR-154在NSCLC细胞系中的表达 | 第43页 |
2.4.2 qRT-PCR检测MiR-154转染有效性 | 第43-44页 |
2.4.3 CCK8实验分析MiR-154对NSCLC细胞增殖的影响 | 第44-45页 |
2.4.4 细胞集落实验分析 MiR-154 对 NSCLC 细胞增殖的影响 | 第45-46页 |
2.4.5 流式细胞实验MiR-154 对 NSCLC 细胞周期的影响 | 第46-47页 |
2.4.6 MiR-154对NSCLC细胞凋亡的影响 | 第47-48页 |
2.4.7 MiR-154对NSCLC细胞迁移能力的影响 | 第48-49页 |
2.4.8 MiR-154对肺癌细胞侵袭能力的影响 | 第49-51页 |
2.4.9 MiR-154可以抑制上皮间质转化 (EMT) | 第51-52页 |
2.4.10 MiR-154抑制小鼠体内NSCLC肿瘤生长 | 第52-53页 |
2.4.11 裸鼠体内肿瘤MiR-154表达活性检测 | 第53-54页 |
2.5 讨论 | 第54-56页 |
第3章 MIR-154调节ZEB2抑制NSCLC细胞的生长 | 第56-82页 |
3.1 引言 | 第56-57页 |
3.2 主要实验试剂、材料及设备 | 第57-60页 |
3.2.1 主要实验试剂 | 第57-59页 |
3.2.2 主要实验材料及设备 | 第59-60页 |
3.3 主要实验方法 | 第60-72页 |
3.3.1 细胞培养 | 第60-61页 |
3.3.2 质粒的构建及转染(pcDNA3.0-ZEB2) | 第61-65页 |
3.3.3 SIRNA转染(si-ZEB2) | 第65-66页 |
3.3.4 细胞侵袭实验 | 第66页 |
3.3.5 qRT-PCR(ZEB2表达的检测) | 第66-68页 |
3.3.6 Western Blot (ZEB2和EMT的蛋白表达检测) | 第68-71页 |
3.3.7 统计分析 | 第71-72页 |
3.4 实验结果 | 第72-80页 |
3.4.1 MiR-154抑制NSCLC细胞侵袭 | 第72-73页 |
3.4.2 NSCLC中ZEB2是MiR-154的靶向基因 | 第73页 |
3.4.3 MiR-154与3'-UTR结合的测定 | 第73-74页 |
3.4.4 MiR-154调控ZEB2和EMT | 第74-76页 |
3.4.5 ZEB2表达降低对NSCLC细胞的影响 | 第76-78页 |
3.4.6 ZEB2表达增加减弱MiR-154对A549迁移和侵袭能力的抑制 | 第78-80页 |
3.5 讨论 | 第80-82页 |
全文总结 | 第82-86页 |
综述 | 第86-99页 |
参考文献 | 第99-122页 |
作者简介及在学期间所取得的科研成果 | 第122-124页 |
致谢 | 第124页 |