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小麦中与条锈菌互作相关基因的克隆以及表达谱和功能的初步分析

摘要第1-8页
ABSTRACT第8-13页
第一章 文献综述第13-25页
   ·小麦条锈病第13-16页
     ·小麦条锈病的危害第13页
     ·小麦条锈菌的侵染过程第13-14页
     ·小麦抗条锈基因的研究第14页
     ·小麦与条锈菌互作研究第14-16页
   ·植物SNARE 研究进展第16-19页
     ·SNARE 分类及其结构第16-17页
     ·SNARE 介导的膜融合第17页
     ·植物SNARE 的功能第17-19页
   ·植物HIN1 研究进展第19-20页
   ·植物肌动蛋白解聚因子ADF 研究进展第20-22页
     ·肌动蛋白第20页
     ·植物ADF 的功能第20-22页
   ·生物信息学第22-24页
     ·生物信息学研究的内容第22页
     ·生物信息学数据库第22-23页
     ·生物信息学的应用第23-24页
   ·本研究的目的意义和技术路线第24-25页
     ·目的意义第24页
     ·技术路线第24-25页
第二章 小麦SNARE 基因的克隆和表达特征分析第25-48页
 引言第25页
   ·材料、试剂及仪器第25-26页
     ·材料第25-26页
     ·试剂第26页
     ·仪器第26页
   ·实验方法第26-33页
     ·小麦组织总 RNA 的提取第26-27页
     ·RNA 中DNA 的去除第27页
     ·RNA 的纯度及完整性检测第27页
     ·mRNA 的分离纯化第27-28页
     ·RACE 模版合成第28页
     ·荧光定量PCR 模板制备第28页
     ·反转录产物的PCR 检测第28-29页
     ·小麦SNARE 基因引物设计第29-30页
     ·RACE PCR 反应第30页
     ·PCR 产物的回收纯化第30页
     ·PCR 产物与载体的连接第30-31页
     ·大肠杆菌感受态细胞的制备第31页
     ·大肠杆菌的转化第31页
     ·微量质粒提取流程第31页
     ·DNA 测序流程第31页
     ·实时荧光定量PCR 分析第31-32页
     ·序列的生物信息学分析第32-33页
     ·亚细胞定位载体改造第33页
   ·结果与分析第33-45页
     ·小麦NPSN 家族基因全长cDNA 的克隆和序列分析第33-35页
     ·其它小麦SNARE 基因的克隆和序列分析第35-37页
     ·小麦NPSN 家族蛋白的序列比对和进化树分析第37-38页
     ·荧光定量PCR 模板检测第38页
     ·小麦TaNpsns 实时荧光定量PCR 分析第38-44页
     ·亚细胞定位载体改造第44-45页
   ·讨论第45-48页
     ·关于基因的克隆方法第45-46页
     ·关于小麦NPSN 家族基因的特征第46-48页
第三章 条锈菌诱导的小麦TaHi111 的克隆与表达特征分析第48-55页
 引言第48页
   ·试验材料第48页
   ·试验方法第48-49页
     ·总RNA 的分离和cDNA 的合成第48页
     ·TaHi111 全长cDNA 克隆第48页
     ·序列分析第48-49页
     ·实时荧光定量PCR 分析第49页
   ·结果与分析第49-53页
     ·TaHi111 全长cDNA 克隆第49-50页
     ·蛋白质序列分析第50页
     ·蛋白序列比对及进化树分析第50-51页
     ·实时荧光定量PCR 分析第51-53页
   ·讨论第53-55页
第四章 小麦TaAdf 的克隆以及表达谱和功能的初步分析第55-69页
 引言第55页
   ·试验材料第55页
     ·植物材料第55页
     ·载体及菌种第55页
     ·试验试剂和仪器第55页
   ·试验方法第55-58页
     ·基因全长cDNA 的克隆与生物信息学分析第55-56页
     ·小麦叶片基因组DNA 提取第56页
     ·小麦TaAdf 基因结构分析第56页
     ·基因的染色体定位第56页
     ·ADF 在洋葱表皮细胞的定位第56-57页
     ·小麦TaAdf 表达谱分析第57页
     ·小麦TaADF 原核表达第57-58页
     ·TaAdf 功能的初步验证第58页
   ·结果及分析第58-67页
     ·基因的克隆第58-61页
     ·生物信息学分析第61-62页
     ·TaAdf 基因的染色体定位第62-63页
     ·亚细胞定位第63页
     ·实时荧光定量PCR 分析第63-65页
     ·小麦TaADF 的原核表达第65-66页
     ·VIGS 对TaAdf 功能的初步验证第66-67页
   ·讨论第67-69页
     ·关于小麦TaAdf 基因结构第67页
     ·关于小麦TaAdf 的功能第67-69页
第五章 结论第69-71页
参考文献第71-78页
附录1第78-79页
附录2第79-80页
附录3第80-85页
附录4第85-87页
缩略词第87-88页
致谢第88-89页
作者简介第89页

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