| 摘要 | 第1-7页 |
| ABSTRACT | 第7-13页 |
| 文献综述 | 第13-24页 |
| 第一章 PRRSV 的基本特征与感染性克隆的研究进展 | 第13-24页 |
| ·PRRSV 的基本特征 | 第13-18页 |
| ·PRRSV 的形态特征 | 第13-14页 |
| ·PRRSV 的繁殖与复制 | 第14页 |
| ·PRRSV 的理化特性 | 第14-15页 |
| ·PRRSV 的培养特性 | 第15-16页 |
| ·PRRSV 基因组结构特征 | 第16页 |
| ·PRRSV 基因组编码产物及功能 | 第16-18页 |
| ·病毒基因组编码的非结构蛋白和功能 | 第16-17页 |
| ·病毒基因组编码的次要结构蛋白和功能 | 第17-18页 |
| ·病毒基因组编码的主要结构蛋白和功能 | 第18页 |
| ·PRRSV 感染性克隆的研究 | 第18-23页 |
| ·病毒反向遗传操作原理 | 第18-19页 |
| ·构建病毒基因组全长cDNA 克隆 | 第19-20页 |
| ·感染性转录物的产生 | 第20-21页 |
| ·体内转录 | 第20页 |
| ·体外转录 | 第20-21页 |
| ·感染性克隆的产生与鉴定 | 第21-22页 |
| ·病毒的拯救 | 第22页 |
| ·PRRSV 感染性克隆的历史和发展 | 第22-23页 |
| ·结语 | 第23-24页 |
| 试验研究 | 第24-65页 |
| 第二章 PRRSV SHAANXI-1 株的分离与鉴定 | 第24-34页 |
| ·实验材料 | 第24-26页 |
| ·主要试验仪器 | 第24页 |
| ·主要试剂 | 第24-25页 |
| ·试验病料 | 第25页 |
| ·试验细胞、高免血清及单抗 | 第25页 |
| ·主要试剂的配制 | 第25-26页 |
| ·细胞培养相关试剂的配制 | 第25页 |
| ·琼脂凝胶电泳相关试剂的配制 | 第25-26页 |
| ·试验方法 | 第26-28页 |
| ·引物设计 | 第26页 |
| ·病料的采集及处理 | 第26页 |
| ·细胞培养 | 第26-27页 |
| ·病毒的增殖 | 第27页 |
| ·RT-PCR 检测 | 第27-28页 |
| ·病毒总RNA 的提取 | 第27页 |
| ·RT-PCR 反应 | 第27-28页 |
| ·病毒中和试验 | 第28页 |
| ·TCID_(50) 测定 | 第28页 |
| ·间接免疫荧光检测 | 第28页 |
| ·结果 | 第28-31页 |
| ·病料RT-PCR 检测结果 | 第28-29页 |
| ·病毒分离结果 | 第29-30页 |
| ·血清中和试验结果 | 第30页 |
| ·RT-PCR 鉴定病毒增殖结果 | 第30页 |
| ·TCID_(50) 测定结果 | 第30-31页 |
| ·间接免疫荧光检测结果 | 第31页 |
| ·讨论 | 第31-33页 |
| ·PRRSV 的流行情况 | 第31-32页 |
| ·病料组织的选择 | 第32页 |
| ·病毒的分离培养与鉴定 | 第32-33页 |
| ·小结 | 第33-34页 |
| 第三章 PRRSV SHAANXI-1 株全基因组序列扩增与测定 | 第34-45页 |
| ·实验材料 | 第34-36页 |
| ·毒株、菌株、载体与细胞 | 第34-35页 |
| ·主要仪器 | 第35页 |
| ·试剂和耗材 | 第35页 |
| ·试验相关试剂的配制 | 第35-36页 |
| ·细胞培养相关试剂的配制 | 第35页 |
| ·RT-PCR 相关试剂的配制 | 第35页 |
| ·细菌培养基的配制 | 第35-36页 |
| ·分子生物学分析软件 | 第36页 |
| ·试验方法 | 第36-41页 |
| ·PRRSV 病毒的增殖 | 第36页 |
| ·引物设计 | 第36-37页 |
| ·PRRSV 感染的Marc-145 细胞中病毒总RNA 的提取 | 第37页 |
| ·全基因RT-PCR 扩增 | 第37-38页 |
| ·PCR 产物的纯化及cDNA 片段的回收 | 第38页 |
| ·纯化产物与pMD-18T Vector 连接 | 第38页 |
| ·感受态细胞的制备（CaC1_2 法） | 第38-39页 |
| ·连接产物的转化 | 第39页 |
| ·重组质粒的提取 | 第39-40页 |
| ·重组质粒的PCR 鉴定 | 第40页 |
| ·重组质粒的酶切鉴定 | 第40页 |
| ·重组质粒的测序分析 | 第40-41页 |
| ·结果与分析 | 第41-43页 |
| ·PRRSV Shaanxi-1 株全基因RT-PCR 扩增 | 第41-42页 |
| ·全基因序列拼接结果 | 第42-43页 |
| ·讨论 | 第43-44页 |
| ·小结 | 第44-45页 |
| 第四章 PRRSV SHAANXI-1 基因组分子遗传特征分析 | 第45-65页 |
| ·材料 | 第45-47页 |
| ·PRRSV 基因组全长序列来源 | 第45-47页 |
| ·分子生物学分析软件 | 第47页 |
| ·方法 | 第47页 |
| ·PRRSV Shaanxi-1 株基因组序列比对分析 | 第47页 |
| ·PRRSV Shaanxi-1 基因组进化树分析 | 第47页 |
| ·RRSV Shaanxi-1 株毒力相关氨基酸的推测与变异分析 | 第47页 |
| ·结果 | 第47-60页 |
| ·PRRSV Shaanxi-1 株基因组序列比对分析结果 | 第47-59页 |
| ·5’UTR 和3’UTR 序列分析 | 第47页 |
| ·非结构蛋白的结果与分析 | 第47-49页 |
| ·Nsp2 的结果与分析 | 第49-51页 |
| ·结构蛋白的序列分析 | 第51-52页 |
| ·GP2 | 第52-53页 |
| ·GP3 | 第53-55页 |
| ·GP4 | 第55-56页 |
| ·GP5 | 第56-57页 |
| ·M | 第57-59页 |
| ·N | 第59页 |
| ·PRRSV Shaanxi-1 株毒力相关氨基酸的变异分析结果 | 第59-60页 |
| ·全基因的系统进化分析 | 第60页 |
| ·讨论 | 第60-64页 |
| ·Shaanxi-1 株 5’UTR 及 3’UTR 的遗传变异 | 第60-61页 |
| ·Shaanxi-1 株非结构蛋白的遗传变异 | 第61-62页 |
| ·Shaanxi-1 株结构蛋白编码区的遗传变异 | 第62-63页 |
| ·PRRSV Shaanxi-1 和 Shaanxi-2 毒株致病性分析 | 第63-64页 |
| ·小结 | 第64-65页 |
| 结论 | 第65-66页 |
| 参考文献 | 第66-73页 |
| 英文缩略词及中英文对照 | 第73-74页 |
| 致谢 | 第74-75页 |
| 作者简介 | 第75页 |
