| 摘要 | 第5-7页 |
| ABSTRACT | 第7-8页 |
| 第一章 文献综述 | 第13-27页 |
| 1.1 葡萄和葡萄白粉病 | 第13-15页 |
| 1.1.1 葡萄白粉菌的寄主 | 第13页 |
| 1.1.2 葡萄白粉菌生活史及发病症状 | 第13-14页 |
| 1.1.3 中国野生葡萄资源及抗性品质的利用 | 第14页 |
| 1.1.4 葡萄白粉病的分子机制及研究进展 | 第14-15页 |
| 1.2 植物免疫系统的概述 | 第15-16页 |
| 1.3 植物抗病蛋白识别病原菌无毒基因的分子机制 | 第16-20页 |
| 1.3.1 基因对基因假说 | 第16页 |
| 1.3.2 警戒模型 | 第16-17页 |
| 1.3.3 配体模型 | 第17-18页 |
| 1.3.4 诱饵模型 | 第18-19页 |
| 1.3.5 诱饵开关模型 | 第19-20页 |
| 1.4 植物抗病蛋白类型 | 第20-26页 |
| 1.4.1 NB-LRR蛋白 | 第20-21页 |
| 1.4.2 NB-ARC结构域 | 第21-22页 |
| 1.4.3 TIR结构域 | 第22-23页 |
| 1.4.4 CC结构域 | 第23页 |
| 1.4.5 LRR结构域的结构和功能 | 第23-24页 |
| 1.4.6 R蛋白的激活和调节 | 第24-26页 |
| 1.5 目的和意义 | 第26-27页 |
| 第二章 中国野生华东葡萄VpCN基因克隆及功能分析 | 第27-57页 |
| 前言 | 第27页 |
| 2.1 材料 | 第27-29页 |
| 2.1.1 植物材料 | 第27页 |
| 2.1.2 主要仪器设备 | 第27-28页 |
| 2.1.3 主要试剂 | 第28页 |
| 2.1.4 引物 | 第28-29页 |
| 2.2 方法 | 第29-33页 |
| 2.2.1 材料处理 | 第29页 |
| 2.2.2 VpCN克隆和序列分析 | 第29-30页 |
| 2.2.3 VpCN表达分析 | 第30页 |
| 2.2.4 VpCN过表达载体构建和转化拟南芥 | 第30页 |
| 2.2.5 拟南芥台盼蓝染色 | 第30页 |
| 2.2.6 拟南芥NBT染色 | 第30页 |
| 2.2.7 拟南芥细菌菌落数计数 | 第30-31页 |
| 2.2.8 拟南芥H2O2含量测定 | 第31页 |
| 2.2.9 拟南芥死细胞含量测定 | 第31页 |
| 2.2.10 拟南芥胼胝质观察及含量测定 | 第31页 |
| 2.2.11 VpCN启动子瞬时转化及GUS染色 | 第31-32页 |
| 2.2.12 样品蛋白含量测定及蛋白标准曲线绘制 | 第32页 |
| 2.2.13 样品酶促反应和GUS荧光定量分析 | 第32-33页 |
| 2.3 结果分析 | 第33-53页 |
| 2.3.1 VpCN克隆及生物信息学分析 | 第33-38页 |
| 2.3.2 VpCN对病原菌的响应 | 第38-39页 |
| 2.3.3 VpCN基因转拟南芥植株的获得 | 第39页 |
| 2.3.4 VpCN转基因植株的表型分析 | 第39-41页 |
| 2.3.5 VpCN转基因拟南芥对拟南芥白粉病的抗性分析 | 第41-42页 |
| 2.3.6 VpCN转基因拟南芥对Pst DC3000的抗性分析 | 第42-47页 |
| 2.3.7 pVpCN启动子克隆及生物信息学分析 | 第47-49页 |
| 2.3.8 蛋白标准曲线的绘制 | 第49页 |
| 2.3.9 4-MU标准曲线绘制 | 第49-50页 |
| 2.3.10 pVpCN启动子瞬时转化载体的构建及GUS染色 | 第50-51页 |
| 2.3.11 pVpCN启动子不同区段的对白粉菌诱导表达特性分析 | 第51-53页 |
| 2.4 讨论 | 第53-57页 |
| 第三章 中国野生华东葡萄VpTNL1基因克隆及功能研究 | 第57-81页 |
| 前言 | 第57页 |
| 3.1 材料与方法 | 第57-58页 |
| 3.1.1 材料 | 第57-58页 |
| 3.1.2 仪器设备和试剂 | 第58页 |
| 3.2 方法 | 第58-59页 |
| 3.2.1 材料处理及RNA提取与反转录 | 第58页 |
| 3.2.2 基因克隆及生物信息学研究 | 第58页 |
| 3.2.3 VpTNL1表达分析 | 第58页 |
| 3.2.4 载体构建及拟南芥转化 | 第58页 |
| 3.2.5 拟南芥抗病性鉴定 | 第58页 |
| 3.2.6 VpTNL1启动子克隆及瞬时表达载体构建 | 第58页 |
| 3.2.7 启动子瞬时转化及启动子活性鉴定 | 第58页 |
| 3.2.8 烟草转基因 | 第58-59页 |
| 3.2.9 转基因烟草白粉病接种和检测 | 第59页 |
| 3.3 结果分析 | 第59-78页 |
| 3.3.1 中国野生葡萄白河351VpTNL1表达分析 | 第59-60页 |
| 3.3.2 VpTNL1基因克隆及生物信息学分析 | 第60-65页 |
| 3.3.3 VpTNL1过表达载体构建及转化拟南芥 | 第65-66页 |
| 3.3.4 转VpTNL1基因烟草对烟草白粉病的抗性分析 | 第66-67页 |
| 3.3.5 转基因拟南芥对拟南芥白粉病的抗性分析 | 第67-69页 |
| 3.3.6 转基因拟南芥对Pst DC3000的抗性分析 | 第69-71页 |
| 3.3.7 VpTNL1启动子克隆及生物信息学分析 | 第71-73页 |
| 3.3.8 VpTNL1瞬时表达载体构建及GUS染色 | 第73-78页 |
| 3.4 讨论 | 第78-81页 |
| 第四章 中国野生葡萄VqTNL2克隆及启动子克隆和功能验证 | 第81-95页 |
| 前言 | 第81页 |
| 4.1 材料方法 | 第81-82页 |
| 4.1.1 葡萄材料 | 第81页 |
| 4.1.2 主要仪器设备 | 第81页 |
| 4.1.3 主要试剂 | 第81页 |
| 4.1.4 载体与菌株 | 第81页 |
| 4.1.5 材料处理 | 第81-82页 |
| 4.1.6 葡萄RNA提取纯化及反转录反应 | 第82页 |
| 4.1.7 VqTNL2表达分析 | 第82页 |
| 4.1.8 VqTNL2基因克隆及生物信息学分析 | 第82页 |
| 4.1.9 VqTNL2启动子克隆及生物信息学分析 | 第82页 |
| 4.1.10 启动子瞬时表达载体构建及GUS染色 | 第82页 |
| 4.2 结果与分析 | 第82-93页 |
| 4.2.1 VqTNL2在葡萄器官中的表达 | 第82-83页 |
| 4.2.2 VqTNL2在白粉病病原菌侵染、SA和JA处理后的表达分析 | 第83-84页 |
| 4.2.3 VqTNL2基因克隆及生物信息学分析 | 第84-90页 |
| 4.2.4 中国野生毛葡萄商-24 VqTNL2启动子克隆 | 第90-91页 |
| 4.2.5 pVqTNL2瞬时表达载体的构建 | 第91-92页 |
| 4.2.6 pVqTNL2瞬时表达和GUS染色 | 第92-93页 |
| 4.3 讨论 | 第93-95页 |
| 第五章 中国野生葡萄RPM1类基因克隆表达及生物信息学分析 | 第95-107页 |
| 前言 | 第95-96页 |
| 5.1 材料 | 第96页 |
| 5.1.1 葡萄材料 | 第96页 |
| 5.1.2 主要仪器设备 | 第96页 |
| 5.1.3 主要试剂 | 第96页 |
| 5.2 方法 | 第96-97页 |
| 5.2.1 葡萄白粉病接种处理 | 第96页 |
| 5.2.2 中国野生葡萄RPM1基因表达分析 | 第96页 |
| 5.2.3 基因克隆 | 第96-97页 |
| 5.2.4 生物信息学分析 | 第97页 |
| 5.3 结果分析 | 第97-105页 |
| 5.3.1 RPM1基因表达分析 | 第97-98页 |
| 5.3.2 中国野生葡萄RPM1类基因克隆 | 第98-100页 |
| 5.3.3 中国野生葡萄RPM1基因生物信息学分析 | 第100-102页 |
| 5.3.4 葡萄RPM1类基因生物信息学分析 | 第102-105页 |
| 5.4 讨论 | 第105-106页 |
| 问题与展望 | 第106-107页 |
| 第六章 结论与创新点 | 第107-108页 |
| 6.1 结论 | 第107页 |
| 6.2 创新点 | 第107-108页 |
| 参考文献 | 第108-117页 |
| 附录 | 第117-142页 |
| 致谢 | 第142-143页 |
| 作者简介 | 第143页 |
