缩略语表 | 第7-8页 |
中文摘要 | 第8-12页 |
英文摘要 | 第12-16页 |
前言 | 第17-19页 |
文献回顾 | 第19-37页 |
第一部分 结肠癌转移的分子机制及治疗现状 | 第19-27页 |
第二部分 Genistein的研究现状 | 第27-37页 |
第一部分Genistein对结肠癌细胞生长和侵袭运动的影响 | 第37-51页 |
1 材料 | 第37-38页 |
1.1 细胞 | 第37页 |
1.2 主要生化试剂 | 第37-38页 |
1.3 主要仪器 | 第38页 |
2 方法 | 第38-40页 |
2.1 CCK8细胞生存率检测 | 第38页 |
2.2 CCK8细胞增殖检测 | 第38页 |
2.3 平板克隆形成实验 | 第38-39页 |
2.4 Transwell侵袭实验 | 第39页 |
2.5 Transwell迁移实验 | 第39-40页 |
2.6 划痕实验 | 第40页 |
2.7 高内涵运动实验 | 第40页 |
3 结果 | 第40-47页 |
3.1 Genistein对结肠癌细胞活性的影响 | 第40-41页 |
3.2 Genistein对结肠癌细胞增殖能力的影响 | 第41-42页 |
3.3 Genistein对结肠癌细胞克隆形成能力的影响 | 第42-44页 |
3.4 Genistein对结肠癌细胞侵袭能力的影响 | 第44页 |
3.5 Genistein对结肠癌细胞迁移和运动能力的影响 | 第44-47页 |
4 讨论 | 第47-51页 |
第二部分KBU2046对结肠癌细胞生长和侵袭运动的影响 | 第51-61页 |
1 材料 | 第51-52页 |
1.1 细胞 | 第51页 |
1.2 主要生化试剂 | 第51页 |
1.3 主要仪器 | 第51-52页 |
2 方法 | 第52-54页 |
2.1 CCK8细胞生存率检测 | 第52页 |
2.2 Transwell侵袭实验 | 第52页 |
2.3 Transwell迁移实验 | 第52-53页 |
2.4 划痕实验 | 第53页 |
2.5 高内涵运动实验 | 第53-54页 |
3 结果 | 第54-58页 |
3.1 KBU2046对结肠癌细胞活性的影响 | 第54-55页 |
3.2 KBU2046对结肠癌细胞侵袭能力的影响 | 第55页 |
3.3 KBU2046对结肠癌细胞迁移和运动能力的影响 | 第55-58页 |
4 讨论 | 第58-61页 |
第三部分Genistein和KBU2046对原位种植结肠癌体内转移的抑制 | 第61-87页 |
1 材料 | 第61-62页 |
1.1 实验动物 | 第61页 |
1.2 细胞系 | 第61-62页 |
1.3 动物实验所需手术器械及用品 | 第62页 |
1.4 生化试剂 | 第62页 |
1.5 仪器设备 | 第62页 |
2 方法 | 第62-66页 |
2.1 慢病毒感染建立HCT116-Luc细胞系 | 第62-63页 |
2.2 原位移植瘤模型的建立 | 第63-64页 |
2.3 Genistein及KBU2046灌胃 | 第64页 |
2.4 小动物活体成像及远处转移程度评估 | 第64页 |
2.5 原位肿瘤大小测量 | 第64-65页 |
2.6 HE染色 | 第65页 |
2.7 免疫组织化学染色及结果分析 | 第65-66页 |
3 结果 | 第66-81页 |
3.1 慢病毒感染建立HCT116-Luc细胞系 | 第66-67页 |
3.2 裸鼠原位种植模型的建立 | 第67-70页 |
3.3 Genistein和KBU2046对原位肿瘤大小的影响 | 第70-73页 |
3.4 Genistein和KBU2046对远处器官转移的影响 | 第73-77页 |
3.5 Genistein和KBU2046对小鼠的毒性作用 | 第77-78页 |
3.6 肿瘤大小与远处器官转移的相关性 | 第78-79页 |
3.7 Genistein和KBU2046对原位肿瘤中Ki67的表达水平的影响 | 第79-80页 |
3.8 Genistein和KBU2046对原位肿瘤中CD34的表达水平的影响 | 第80-81页 |
4 讨论 | 第81-87页 |
第四部分Genistein和KBU2046抑制结肠癌转移的分子机制研究 | 第87-108页 |
1 材料 | 第87-88页 |
1.1 组织芯片和组织切片制备 | 第87页 |
1.2 生化试剂 | 第87-88页 |
1.3 主要仪器 | 第88页 |
2 方法 | 第88-94页 |
2.1 PCR array | 第88-92页 |
2.2 q PCR | 第92-93页 |
2.3 Western blot | 第93页 |
2.4 免疫组织化学染色 | 第93-94页 |
2.5 免疫组织化学染色的结果评估 | 第94页 |
3 结果 | 第94-105页 |
3.1 PCR array对Genistein和KBU2046处理后肿瘤转移相关基因的筛选 | 第94-98页 |
3.2 PCR array筛选结果的验证 | 第98-101页 |
3.3 结肠癌患者中FLT4表达与临床病理资料和患者预后的相关分析 | 第101-104页 |
3.4 Genistein和KBU2046对蛋白激酶磷酸化的影响 | 第104-105页 |
4 讨论 | 第105-108页 |
小结 | 第108-109页 |
参考文献 | 第109-127页 |
附录 | 第127-142页 |
个人简历和研究成果 | 第142-144页 |
致谢 | 第144-146页 |