| 致谢 | 第7-8页 |
| 摘要 | 第8-9页 |
| Abstract | 第9页 |
| 第一章 文献综述 | 第14-24页 |
| 1.1 褐飞虱的危害 | 第14页 |
| 1.2 细胞色素P450概述 | 第14-23页 |
| 1.2.1 昆虫细胞色素P450概述 | 第15页 |
| 1.2.2 昆虫细胞色素P450基因功能 | 第15-23页 |
| 1.3 本研究的意义 | 第23-24页 |
| 第二章 褐飞虱CYP18A1、CYP304H1、CYP303A1基因的序列分析 | 第24-38页 |
| 2.1 材料与方法 | 第25页 |
| 2.1.1 实验材料 | 第25页 |
| 2.2 常用试剂 | 第25-27页 |
| 2.2.1 工具酶及试剂盒 | 第25页 |
| 2.2.2 SDS-PAGE试剂 | 第25-26页 |
| 2.2.3 Western blot试剂 | 第26页 |
| 2.2.4 其它试剂 | 第26-27页 |
| 2.3 常用方法 | 第27-30页 |
| 2.3.1 CaCl_2法制备感受态细胞 | 第27页 |
| 2.3.2 褐飞虱总RNA的提取 | 第27-28页 |
| 2.3.3 反转录 | 第28页 |
| 2.3.4 连接转化反应 | 第28页 |
| 2.3.5 质粒抽提 | 第28-29页 |
| 2.3.6 胶回收 | 第29页 |
| 2.3.7 PCR反应 | 第29页 |
| 2.3.8 CYP18A1、CYP304H1、CYP303A1基因的生物信息分析 | 第29-30页 |
| 2.4 结果分析 | 第30-36页 |
| 2.4.1 CYP18A1、CYP304H1、CYP303A1基因的Scaffold分析 | 第30-31页 |
| 2.4.2 序列同源性分析 | 第31-36页 |
| 2.5 讨论 | 第36-38页 |
| 第三章 CYP18A1、CYP304H1、CYP303A1基因的表达特性 | 第38-46页 |
| 3.1 材料与方法 | 第38-40页 |
| 3.1.1 材料 | 第38页 |
| 3.1.2 方法 | 第38-40页 |
| 3.2 结果与分析 | 第40-44页 |
| 3.2.1 CYP304H1在卵、若虫期和成虫的表达量 | 第40-41页 |
| 3.2.2 CYP18A1在卵、若虫期和成虫的表达量 | 第41页 |
| 3.2.3 CYP303A1在卵、若虫期和成虫的表达量 | 第41-42页 |
| 3.2.4 CYP304H1基因在褐飞虱不同组织中的表达差异 | 第42-43页 |
| 3.2.5 CYP18A1基因在褐飞虱不同组织中的表达差异 | 第43-44页 |
| 3.2.6 CYP303A1基因在褐飞虱不同组织中的表达差异 | 第44页 |
| 3.3 讨论 | 第44-46页 |
| 第四章 褐飞虱CYP18A1、CYP304H1、CYP303A1基因的RNAi | 第46-64页 |
| 4.1 材料和方法 | 第46-47页 |
| 4.1.1 材料 | 第46-47页 |
| 4.1.2 实验试剂 | 第47页 |
| 4.1.3 引物设计 | 第47页 |
| 4.2 方法 | 第47-49页 |
| 4.2.1 体外合成dsRNA | 第47-49页 |
| 4.3 结果与分析 | 第49-62页 |
| 4.3.1 目的基因合成效果图 | 第49-50页 |
| 4.3.2 目的基因的干扰效果 | 第50-52页 |
| 4.3.3 目的基因干扰后表型变化 | 第52-55页 |
| 4.3.4 目的基因干扰后死亡率 | 第55-62页 |
| 4.4 讨论 | 第62-64页 |
| 第五章 褐飞虱P450基因CYP304H1原核表达及多克隆抗体制备 | 第64-70页 |
| 5.1 材料与方法 | 第64-65页 |
| 5.1.1 材料 | 第64-65页 |
| 5.2 实验方法 | 第65-67页 |
| 5.2.1 基本操作方法 | 第65-67页 |
| 5.3 结果与分析 | 第67-68页 |
| 5.3.1 原核表达载体构建 | 第67-68页 |
| 5.3.2 表达产物Western blot鉴定及多克隆抗体的制备 | 第68页 |
| 5.4 讨论 | 第68-70页 |
| 总结 | 第70-72页 |
| 参考文献 | 第72-82页 |
| 在读期间发表的论文 | 第82页 |
