| 摘要 | 第5-7页 |
| Abstract | 第7-8页 |
| 本文所用英文缩略词表 | 第12-13页 |
| 第1章 绪论 | 第13-28页 |
| 1.1 耐药肝癌 | 第13-16页 |
| 1.1.1 肝癌多药耐药机制 | 第13-15页 |
| 1.1.2 逆转肿瘤多药耐药 | 第15-16页 |
| 1.2 核酸适配体的特点及SELEX技术 | 第16-20页 |
| 1.2.1 核酸适配体的特点 | 第16-17页 |
| 1.2.2 SELEX技术简介 | 第17页 |
| 1.2.3 SELEX技术的发展 | 第17-20页 |
| 1.3 核酸适配体在肿瘤生物医学上的应用 | 第20-26页 |
| 1.3.1 核酸适配体在肿瘤细胞检测与成像中的应用 | 第20-23页 |
| 1.3.2 核酸适配体在肿瘤标志物发现上的应用 | 第23-24页 |
| 1.3.3 核酸适配体与靶向治疗 | 第24-26页 |
| 1.4 本论文拟开展的工作 | 第26-28页 |
| 第2章 人肝癌耐药细胞株核酸适配体的筛选 | 第28-50页 |
| 2.1 前言 | 第28页 |
| 2.2 实验部分 | 第28-38页 |
| 2.2.1 试剂和仪器 | 第28-31页 |
| 2.2.2 溶液的配制 | 第31-32页 |
| 2.2.3 细胞的培养、传代及细胞悬液的配置 | 第32-33页 |
| 2.2.4 MTT实验验证耐药细胞的耐药性 | 第33页 |
| 2.2.5 PCR条件的优化 | 第33-34页 |
| 2.2.6 聚丙烯酰胺凝胶电泳及成像 | 第34-35页 |
| 2.2.7 HepG2/ADM细胞核酸适配体的筛选 | 第35-37页 |
| 2.2.8 筛选进程的表征 | 第37页 |
| 2.2.9 克隆和测序 | 第37-38页 |
| 2.2.10 序列特异性考察 | 第38页 |
| 2.2.11 序列亲和力考察 | 第38页 |
| 2.3 结果与讨论 | 第38-49页 |
| 2.3.1 细胞耐药性考察 | 第38-39页 |
| 2.3.2 PCR条件的优化 | 第39-41页 |
| 2.3.3 筛选流程以及筛选条件的选择 | 第41-43页 |
| 2.3.4 紫外定量ssDNA | 第43页 |
| 2.3.5 筛选文库的进化表征 | 第43-44页 |
| 2.3.6 克隆测序结果及序列分析 | 第44-46页 |
| 2.3.7 核酸适配体的特异性考察 | 第46-48页 |
| 2.3.8 核酸适配体的亲和力考察及激光共聚焦验证结果 | 第48-49页 |
| 2.4 小结 | 第49-50页 |
| 第3章 人肝癌耐药细胞核酸适配体序列优化及初步应用研究 | 第50-59页 |
| 3.1 前言 | 第50页 |
| 3.2 实验部分 | 第50-52页 |
| 3.2.1 试剂和仪器 | 第50-51页 |
| 3.2.2 优化后序列的性质考察 | 第51-52页 |
| 3.2.3 温度对优化后序列结合能力的影响 | 第52页 |
| 3.2.4 酶对优化后序列结合情况的影响 | 第52页 |
| 3.3 结果与讨论 | 第52-58页 |
| 3.3.1 核酸适配体的序列优化 | 第52-54页 |
| 3.3.2 优化后序列的性质考察 | 第54-56页 |
| 3.3.3 温度对优化后核酸适配体结合能力的影响 | 第56-57页 |
| 3.3.4 酶对优化后核酸适配体结合情况的影响 | 第57-58页 |
| 3.4 小结 | 第58-59页 |
| 第4章 基于aptamer研究肝癌耐药细胞耐药性能及逆转耐药性 | 第59-66页 |
| 4.1 前言 | 第59页 |
| 4.2 实验部分 | 第59-61页 |
| 4.2.1 试剂与仪器 | 第59页 |
| 4.2.2 核酸适配体结合位点考察 | 第59-60页 |
| 4.2.3 核酸适配体作用靶标的考察 | 第60-61页 |
| 4.2.4 肿瘤细胞不同程度药物刺激对核酸适配体结合的影响 | 第61页 |
| 4.2.5 核酸适配体对逆转耐药细胞耐药性的影响 | 第61页 |
| 4.3 结构与讨论 | 第61-65页 |
| 4.3.1 核酸适配体结合位点的考察 | 第61-62页 |
| 4.3.2 核酸适配体结合靶标的考察 | 第62-63页 |
| 4.3.3 肿瘤细胞不同程度药物刺激对核酸适配体结合的影响 | 第63-64页 |
| 4.3.4 核酸适配体对逆转耐药细胞耐药性的影响 | 第64-65页 |
| 4.4 小结 | 第65-66页 |
| 结论 | 第66-67页 |
| 附篇 人前列腺癌细胞株核酸适配体的筛选及初步应用 | 第67-71页 |
| 1.1 前言 | 第67页 |
| 1.2 实验部分 | 第67-68页 |
| 1.2.1 试剂和仪器 | 第67-68页 |
| 1.2.2 实验过程 | 第68页 |
| 1.3 结果与分析 | 第68-70页 |
| 1.4 小结 | 第70-71页 |
| 参考文献 | 第71-78页 |
| 附录A 攻读硕士学位期间所发表的学术论文 | 第78-79页 |
| 致谢 | 第79-80页 |
