| 摘要 | 第8-11页 |
| Abstract | 第11-14页 |
| 前言 | 第15-16页 |
| 材料和方法 | 第16-25页 |
| 1. 材料 | 第16-18页 |
| 1.1 动物和细胞 | 第16页 |
| 1.2 主要实验仪器和试剂 | 第16-18页 |
| 2. 方法 | 第18-25页 |
| 2.1 细胞培养 | 第18页 |
| 2.2 构建载体和验证 | 第18-20页 |
| 2.3 稳定细胞转染 | 第20-21页 |
| 2.4 实时荧光定量PCR验证Hca-P细胞、shRNA-ANXA7细胞、 N1-Control细胞、 pcDNA-ANXA7细胞、 pcDNA3.1细胞 ANXA7、HnRNPA2/B1、RBM4、PDLIM1基因的表达水平 | 第21-23页 |
| 2.5 Western Blot | 第23页 |
| 2.6 CCK-8法检测pGPU6/GFP/Neo-shRNA-Hn RNPA2/B1稳定转染Hca-P细胞后对肿瘤细胞增殖能力的影响 | 第23-24页 |
| 2.7 Transwell小室法检测pGPU6/GFP/Neo-shRNA-HnRNPA2/B1稳定转染Hca-P细胞后对细胞迁移能力的影响 | 第24页 |
| 2.8 Transwell小室法检测pGPU6/GFP/Neo-shRNA-HnRNP A2/B1稳定转染Hca-P细胞后对细胞侵袭能力的影响 | 第24-25页 |
| 2.9 统计学分析 | 第25页 |
| 结果 | 第25-37页 |
| 1、目的基因表达载体构建与验证 | 第25-27页 |
| 2、稳定转染shRNA-ANXA7细胞、N1-Control细胞、pcDNA-ANXA7胞、pcDNA3.1 细胞、shRNA-HnRNP A2/B1细胞、N2-Control细胞 | 第27-28页 |
| 3、qRT-PCR验证shRNA-ANXA7细胞、N1Control细胞、pcDNA-ANXA7 细胞、pcDNA3.1细胞ANXA7调控HnRNPA2/B1、PDLIM1、RBM4 mRNA的表达 | 第28-30页 |
| 4、Western Blot验证shRNA-ANXA7细胞、N1Control细胞、pcDNA-ANXA7细胞、pcDNA3.1细胞ANXA7调控HnRNPA2/B1、PDLIM1、RBM4蛋白的表达 | 第30-33页 |
| 5、shRNA-HnRNP A2/B1细胞中mRNA及蛋白质水平的改变 | 第33-34页 |
| 6、CCK-8法检测Hnrnp A2/B1基因表达下调对 Hca-P细胞增殖能力的影响 | 第34-35页 |
| 7、Transwell小室法检测Hnrnp A2/B1基因表达下调对Hca-P细胞迁移能力的影响 | 第35-36页 |
| 8、Transwell小室法检测Hnrnp A2/B1基因表达下调对Hca-P细胞侵袭能力的影响 | 第36-37页 |
| 讨论 | 第37-39页 |
| 结论 | 第39-41页 |
| 参考文献 | 第41-44页 |
| 综述 | 第44-52页 |
| 参考文献 | 第48-52页 |
| 致谢 | 第52-53页 |
