| 中文摘要 | 第10-12页 |
| Abstract | 第12-13页 |
| 第一章 综述 | 第14-24页 |
| 1.1 肺癌及肺癌血清肿瘤标志物 | 第14-15页 |
| 1.1.1 肺癌简介 | 第14页 |
| 1.1.2 肺癌血清肿瘤标志物概述 | 第14-15页 |
| 1.2 SELEX技术及核酸适配体 | 第15-20页 |
| 1.2.1 SELEX技术 | 第15-18页 |
| 1.2.1.1 SELEX技术概述 | 第15-16页 |
| 1.2.1.2 SELEX技术的衍生 | 第16-18页 |
| 1.2.2 核酸适配体的概述 | 第18-20页 |
| 1.2.2.1 核酸适配体的应用 | 第18-20页 |
| 1.2.2.1.1 核酸适配体用于临床诊断检测 | 第18-19页 |
| 1.2.2.1.2 核酸适配体用于临床治疗 | 第19-20页 |
| 1.2.2.1.3 核酸适配体用于生物产品分离 | 第20页 |
| 1.2.2.1.4 核酸适配体用于生物传感器 | 第20页 |
| 1.3 磁珠简介 | 第20-23页 |
| 1.3.1 磁珠的制备及特性 | 第20-21页 |
| 1.3.2 磁珠的应用 | 第21-23页 |
| 1.3.2.1 磁珠用于生物分子的分离纯化 | 第21页 |
| 1.3.2.2 磁珠用于食品中微生物的检测 | 第21-22页 |
| 1.3.2.3 磁珠用于靶向药物载体的研究 | 第22页 |
| 1.3.2.4 磁珠在其他方面的应用 | 第22-23页 |
| 1.4 项目研究的目的及意义 | 第23-24页 |
| 第二章 SELEX筛选介质的选择及优化 | 第24-30页 |
| 2.1 前言 | 第24页 |
| 2.2 琼脂磁珠的表征及不同筛选介质偶联蛋白质能力的比较 | 第24-30页 |
| 2.2.1 实验材料 | 第24-25页 |
| 2.2.1.1 实验材料与试剂 | 第24-25页 |
| 2.2.1.2 溶液配制 | 第25页 |
| 2.2.1.3 实验仪器 | 第25页 |
| 2.2.2 方法 | 第25-27页 |
| 2.2.2.1 环氧基化琼脂磁珠（EMM）的制备 | 第26页 |
| 2.2.2.2 羧基化琼脂磁珠（CMM）的制备 | 第26页 |
| 2.2.2.3 氨基化琼脂磁珠（AR-CMM）的制备 | 第26页 |
| 2.2.2.4 不同类型的琼脂磁珠与树脂偶联蛋白质能力的比较 | 第26-27页 |
| 2.2.3 结果与分析 | 第27-29页 |
| 2.2.3.1 环氧基化琼脂磁珠的检测结果 | 第27页 |
| 2.2.3.2 羧基化琼脂磁珠的检测结果 | 第27-28页 |
| 2.2.3.3 氨基化琼脂磁珠的检测结果 | 第28页 |
| 2.2.3.4 不同筛选介质偶联蛋白质能力的比较结果 | 第28-29页 |
| 2.2.4 讨论 | 第29-30页 |
| 第三章 Anti-CEA核酸适配体的筛选 | 第30-42页 |
| 3.1 前言 | 第30页 |
| 3.2 实验材料与试剂 | 第30-32页 |
| 3.2.1 实验材料 | 第30页 |
| 3.2.2 实验试剂 | 第30-31页 |
| 3.2.3 溶液配制 | 第31-32页 |
| 3.2.4 实验仪器 | 第32页 |
| 3.3 方法 | 第32-36页 |
| 3.3.1 目标靶蛋白Anti-CEA活性检测 | 第32-33页 |
| 3.3.2 Anti-CEA核酸适配体的筛选 | 第33-36页 |
| 3.3.2.1 优化制备ssDNA的方法 | 第34-35页 |
| 3.3.2.1.1 不对称PCR法制备ssDNA | 第34-35页 |
| 3.3.2.1.2 链霉亲和素磁珠分离法制备ssDNA | 第35页 |
| 3.3.2.2 琼脂糖凝胶阻滞实验鉴定筛选的Anti-CEA核酸适配体的复合物 | 第35-36页 |
| 3.4 结果及分析 | 第36-41页 |
| 3.4.1 目标靶蛋白Anti-CEA活性检测结果 | 第36页 |
| 3.4.2 Anti-CEA核酸适配体筛选结果 | 第36-40页 |
| 3.4.2.1 不对称PCR制备ssDNA结果 | 第37-38页 |
| 3.4.2.2 链霉亲和素磁珠分离法制备ssDNA结果 | 第38-40页 |
| 3.4.2.2.1 链霉亲和素磁珠检测 | 第38页 |
| 3.4.2.2.2 链霉亲和素磁珠分离法制备ssDNA | 第38-40页 |
| 3.4.3 EMSA鉴定筛选的Anti-CEA核酸适配体的复合物 | 第40-41页 |
| 3.5 讨论 | 第41-42页 |
| 第四章 Anti-CEA核酸适配体的克隆、鉴定、测序 | 第42-49页 |
| 4.1 前言 | 第42页 |
| 4.2 实验材料与试剂 | 第42-43页 |
| 4.2.1 实验材料 | 第42页 |
| 4.2.2 实验试剂 | 第42页 |
| 4.2.3 溶液配制 | 第42-43页 |
| 4.2.4 实验仪器 | 第43页 |
| 4.3 方法 | 第43-45页 |
| 4.3.1 次级寡核苷酸文库的转化 | 第43-45页 |
| 4.3.1.1 制备感受态细胞 | 第43-44页 |
| 4.3.1.2 次级寡核苷酸文库制备dsDNA | 第44页 |
| 4.3.1.3 目的片段dsDNA与pMDTM18-Tvector载体连接 | 第44页 |
| 4.3.1.4 转化并挑取阳性克隆 | 第44-45页 |
| 4.3.2 交错PCR技术鉴定阳性克隆 | 第45页 |
| 4.3.3 Anti-CEA与阳性克隆的特异性结合鉴定 | 第45页 |
| 4.3.4 测序 | 第45页 |
| 4.4 结果与分析 | 第45-47页 |
| 4.4.1 重组质粒转化大肠杆菌DH5α的结果 | 第45-46页 |
| 4.4.2 交错PCR技术鉴定阳性克隆结果 | 第46-47页 |
| 4.4.3 Anti-CEA与核酸适配体特异性结合检测结果 | 第47页 |
| 4.4.4 测序结果 | 第47页 |
| 4.5 讨论 | 第47-49页 |
| 第五章 讨论及展望 | 第49-51页 |
| 参考文献 | 第51-56页 |
| 附录 中英文缩略对照表 | 第56-57页 |
| 硕士期间研究成果 | 第57-58页 |
| 致谢 | 第58页 |
