| 摘要 | 第1-5页 |
| ABSTRACT | 第5-9页 |
| 第一章 文献综述 | 第9-25页 |
| ·果实发育机理的研究进展 | 第9-12页 |
| ·影响果实发育及成熟的因素 | 第9-11页 |
| ·果实发育受基因调控 | 第9页 |
| ·胚乳的影响 | 第9-10页 |
| ·内源激素的调控作用 | 第10页 |
| ·树体的营养水平 | 第10页 |
| ·气候条件 | 第10-11页 |
| ·山核桃果实生长发育规律研究 | 第11-12页 |
| ·植物油脂的生物合成机理 | 第12-14页 |
| ·脂肪酸链的合成 | 第12-13页 |
| ·脂肪酸链合成的终止、释放、脱饱和 | 第13页 |
| ·TAG 的生物合成 | 第13-14页 |
| ·TAG 的脱饱和过程 | 第14页 |
| ·脂质体形成 | 第14页 |
| ·基因表达的分析方法及其研究进展 | 第14-20页 |
| ·mRNA 差异显示技术 | 第15-19页 |
| ·mRNA 差异显示技术的原理 | 第15页 |
| ·mRNA 差异显示技术的优缺点 | 第15-16页 |
| ·mRNA 差异显示技术的改进 | 第16-17页 |
| ·mRNA 差异显示技术在植物基因研究中的应用 | 第17-19页 |
| ·半定量RT-PCR | 第19-20页 |
| ·半定量RT-PCR 的原理 | 第19页 |
| ·半定量RT-PCR 关键反应参数 | 第19-20页 |
| ·半定量RT-PCR 的应用 | 第20页 |
| ·山核桃概况及研究进展 | 第20-23页 |
| ·山核桃栽培与利用现状 | 第20-22页 |
| ·山核桃繁育技术研究 | 第20-21页 |
| ·山核桃高产稳产技术研究 | 第21页 |
| ·山核桃的利用研究 | 第21-22页 |
| ·山核桃的生物学研究进展 | 第22-23页 |
| ·山核桃愈伤组织诱导的初步研究 | 第22页 |
| ·山核桃嫁接成活育苗技术研究 | 第22页 |
| ·山核桃根插试验研究 | 第22页 |
| ·山核桃系统发育学研究 | 第22-23页 |
| ·山核桃分子标记辅助育种技术研究 | 第23页 |
| ·本课题研究意义与研究策略 | 第23-25页 |
| 第二章 基于DDRT-PCR 的山核桃果实成熟期基因表达的初步分析 | 第25-51页 |
| ·材料 | 第25-26页 |
| ·植物材料 | 第25页 |
| ·实验试剂 | 第25页 |
| ·主要仪器与设备 | 第25-26页 |
| ·方法 | 第26-32页 |
| ·总RNA 提取 | 第26页 |
| ·TRIZOL 试剂盒法 | 第26页 |
| ·改良CTAB 法 | 第26页 |
| ·基因组DNA 的消化 | 第26-27页 |
| ·第一链cDNA 合成与PCR 扩增 | 第27-28页 |
| ·差显片段的电泳 | 第28-29页 |
| ·差显片段的回收 | 第29页 |
| ·二次PCR 扩增和纯化 | 第29-30页 |
| ·回收片段的二次扩增 | 第29页 |
| ·二次扩增产物的纯化 | 第29-30页 |
| ·差显片段的亚克隆 | 第30页 |
| ·纯化产物与载体的连接 | 第30页 |
| ·制备感受态大肠杆菌 | 第30页 |
| ·感受态大肠杆菌的转化 | 第30页 |
| ·阳性克隆的筛选与鉴定 | 第30-31页 |
| ·重组质粒细菌的鉴定 | 第31页 |
| ·重组质粒的直接鉴定 | 第31页 |
| ·测序及序列分析 | 第31-32页 |
| ·结果与分析 | 第32-43页 |
| ·RNA 的提取 | 第32-34页 |
| ·RNA 电泳检测 | 第32-33页 |
| ·RNA 纯度 | 第33-34页 |
| ·mRNA 差异显示分析 | 第34-36页 |
| ·差显片段的二次PCR 扩增及克隆测序 | 第36-38页 |
| ·cDNA 片段的序列分析 | 第38-43页 |
| ·与已知功能蛋白相关的cDNA 序列 | 第38-41页 |
| ·与脂肪酸代谢相关的cDNA 序列 | 第41-43页 |
| ·与EST 数据库中Unigene 具有同源性的序列 | 第43页 |
| ·讨论 | 第43-51页 |
| ·果实材料的选择 | 第43-45页 |
| ·不同的总RNA 提取方法比较 | 第45页 |
| ·mRNA 差异显示体系的建立 | 第45-46页 |
| ·引物的优化 | 第46页 |
| ·银染方法的使用 | 第46页 |
| ·差显片段的亚克隆 | 第46-48页 |
| ·二次PCR 扩增 | 第46-47页 |
| ·载体的选择 | 第47-48页 |
| ·阳性克隆的筛选方法 | 第48页 |
| ·果实成熟期差异表达片段的生物信息学分析 | 第48-51页 |
| ·油体钙蛋白 | 第48-49页 |
| ·脂肪酶 | 第49页 |
| ·脂肪酸去饱和酶 | 第49页 |
| ·脂肪酰辅酶A 结合蛋白 | 第49-50页 |
| ·苹果酸合成酶 | 第50-51页 |
| 第三章 果实成熟期相关基因的时空表达分析 | 第51-62页 |
| ·材料 | 第51-53页 |
| ·实验材料 | 第51-52页 |
| ·实验试剂 | 第52页 |
| ·主要仪器与设备 | 第52-53页 |
| ·方法 | 第53-55页 |
| ·总RNA 的提取与纯化 | 第53页 |
| ·引物设计 | 第53-54页 |
| ·管家基因Actin 引物设计 | 第53页 |
| ·差异基因的引物设计 | 第53-54页 |
| ·第一链cDNA 链的合成 | 第54-55页 |
| ·半定量RT-PCR 体系的建立 | 第55页 |
| ·筛选Actin 引物 | 第55页 |
| ·制备标准样品 | 第55页 |
| ·果实成熟期相关基因的半定量分析 | 第55页 |
| ·结果与分析 | 第55-60页 |
| ·Actin 引物的筛选 | 第55-56页 |
| ·标准样品的制备 | 第56-57页 |
| ·半定量RT-PCR 与DDRT-PCR 结果的比较分析 | 第57-60页 |
| ·讨论 | 第60-62页 |
| ·半定量RT-PCR 的关键技术 | 第60页 |
| ·果实成熟期相关基因时空表达的探讨 | 第60-62页 |
| 参考文献 | 第62-72页 |
| 附录 实验所用溶液的配制 | 第72-74页 |
| 个人简介 | 第74-75页 |
| 致谢 | 第75页 |
