| 摘要 | 第4-5页 |
| Abstract | 第5页 |
| 1 绪论 | 第10-16页 |
| 1.1 引言 | 第10-12页 |
| 1.1.1 植物抗逆转录因子的研究 | 第10-11页 |
| 1.1.2 CBF结构特点 | 第11页 |
| 1.1.3 CBF调控机制 | 第11-12页 |
| 1.2 杨树遗传转化主要方法 | 第12页 |
| 1.3 大青杨遗传育种研究进展 | 第12-14页 |
| 1.3.1 大青杨基因资源 | 第12-13页 |
| 1.3.2 大青杨组织培养技术 | 第13页 |
| 1.3.3 大青杨多倍体诱导 | 第13页 |
| 1.3.4 大青杨杂交育种 | 第13-14页 |
| 1.4 本研究的目的与意义 | 第14页 |
| 1.5 技术路线及主要内容 | 第14-16页 |
| 1.5.1 研究的主要内容 | 第14-15页 |
| 1.5.2 技术路线 | 第15-16页 |
| 2 大青杨PuCBF基因的获得及时序表达分析 | 第16-27页 |
| 2.1 材料与方法 | 第16-19页 |
| 2.1.1 试验材料 | 第16页 |
| 2.1.2 试验试剂 | 第16页 |
| 2.1.3 试验方法 | 第16-19页 |
| 2.2 结果分析 | 第19-26页 |
| 2.2.1 大青杨PuCBF基因的克隆 | 第19-20页 |
| 2.2.2 大青杨PuCBF基因克隆与鉴定 | 第20页 |
| 2.2.3 PCR鉴定 | 第20页 |
| 2.2.4 基因测序 | 第20-21页 |
| 2.2.5 大青杨PuCBF生物信息分析 | 第21页 |
| 2.2.6 PuCBF基因分子特征分析 | 第21-22页 |
| 2.2.7 大青杨PuCBF理化性质分析 | 第22-23页 |
| 2.2.8 PuCBF氨基酸序列同源性分析 | 第23-24页 |
| 2.2.9 大青杨PuCBF氨基酸系统进化树构建 | 第24-25页 |
| 2.2.10 大青杨PuCBF基因的获得及时间表达分析 | 第25-26页 |
| 2.3 小结与讨论 | 第26-27页 |
| 3 大青杨遗传转化体系的优化 | 第27-35页 |
| 3.1 试验材料 | 第27页 |
| 3.1.1 植物材料 | 第27页 |
| 3.1.2 试剂 | 第27页 |
| 3.2 试验方法 | 第27-29页 |
| 3.2.1 不定芽诱导 | 第27页 |
| 3.2.2 大青杨不定芽增殖培养体系的优化 | 第27-29页 |
| 3.2.3 大青杨生根体系的优化 | 第29页 |
| 3.2.4 移栽炼苗 | 第29页 |
| 3.2.5 统计与分析 | 第29页 |
| 3.3 结果分析 | 第29-34页 |
| 3.3.1 不定芽诱导 | 第29-31页 |
| 3.3.2 大青杨不定芽增殖培养体系的优化 | 第31-33页 |
| 3.3.3 大青杨生根体系的优化 | 第33-34页 |
| 3.3.4 移栽炼苗 | 第34页 |
| 3.4 小结与讨论 | 第34-35页 |
| 4 大青杨PuCBF基因烟草遗传转化及分子检测 | 第35-40页 |
| 4.1 试验材料 | 第35页 |
| 4.1.1 植物材料 | 第35页 |
| 4.1.2 试剂 | 第35页 |
| 4.1.3 仪器设备 | 第35页 |
| 4.2 试验方法 | 第35-37页 |
| 4.2.1 双酶切，T4连接 | 第35-36页 |
| 4.2.2 热激法农杆菌感受态转化 | 第36页 |
| 4.2.3 农杆菌介导法转烟草 | 第36-37页 |
| 4.2.4 烟草种子处理 | 第37页 |
| 4.2.5 转化烟草PCR鉴定 | 第37页 |
| 4.2.6 转基因烟草植株鉴定 | 第37页 |
| 4.3 结果分析 | 第37-39页 |
| 4.3.1 植物表达载体的构建 | 第37-38页 |
| 4.3.2 烟草种子处理 | 第38页 |
| 4.3.3 农杆菌介导法转化烟草 | 第38页 |
| 4.3.4 转基因烟草植株鉴定 | 第38-39页 |
| 4.4 小结与讨论 | 第39-40页 |
| 5 转PuCBF基因烟草抗旱性分析 | 第40-48页 |
| 5.1 试验材料 | 第40-42页 |
| 5.1.1 植物材料 | 第40页 |
| 5.1.2 试验方法 | 第40页 |
| 5.1.3 转基因烟草抗旱指标测定 | 第40-42页 |
| 5.2 结果分析 | 第42-46页 |
| 5.2.1 相对电导率分析 | 第42-43页 |
| 5.2.2 干旱胁迫下叶绿素 | 第43-44页 |
| 5.2.3 丙二醛（MDA）含量测定 | 第44页 |
| 5.2.4 过氧化物酶（POD）测定 | 第44-45页 |
| 5.2.5 超氧化歧化酶（SOD）活性测定 | 第45页 |
| 5.2.6 旱胁迫下转PuCBF基因烟草和非转基因烟草的生长状况 | 第45-46页 |
| 5.3 小结与讨论 | 第46-48页 |
| 6 转PuCBF基因烟草抗寒性分析 | 第48-51页 |
| 6.1 试验材料 | 第48页 |
| 6.1.1 植物材料 | 第48页 |
| 6.1.2 试验方法 | 第48页 |
| 6.1.3 转基因烟草生理生化指标测定 | 第48页 |
| 6.2 结果分析 | 第48-50页 |
| 6.2.1 丙二醛（MDA）含量测定 | 第48-49页 |
| 6.2.2 超氧化歧化酶（SOD）活性测定 | 第49页 |
| 6.2.3 过氧化物酶（POD）测定 | 第49页 |
| 6.2.4 低温胁迫下转基因烟草与非转基因烟草生长状况对比 | 第49-50页 |
| 6.3 小结与讨论 | 第50-51页 |
| 结论 | 第51-52页 |
| 参考文献 | 第52-57页 |
| 附录 | 第57-58页 |
| 攻读学位期间发表的学术论文 | 第58-59页 |
| 致谢 | 第59-60页 |
