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食源性棕榈酸诱导斑马鱼肝脏脂毒性反应研究

摘要第5-6页
abstract第6页
英文缩略表(Abbreviations)第11-12页
第一章 绪论第12-17页
    1.1 暖水鱼类营养需求概述第12-13页
        1.1.1 鱼油替代对暖水鱼生长的影响第12页
        1.1.2 高脂饲料对暖水鱼肝脏的影响第12-13页
    1.2 脂毒性概述第13页
        1.2.1 游离脂肪酸与脂毒性第13页
        1.2.2 脂毒性与代谢疾病第13页
        1.2.3 脂毒性与肝脏损伤第13页
    1.3 内质网应激概述第13-15页
        1.3.1 内质网应激反应第14页
        1.3.2 未折叠蛋白质应答反应第14-15页
        1.3.3 内质网应激与自噬激活第15页
    1.4 细胞凋亡概述第15-16页
        1.4.1 细胞死亡模式—凋亡与坏死第15-16页
        1.4.2 细胞凋亡的生理意义第16页
    1.5 研究背景及目的与意义第16-17页
        1.5.1 棕榈油在暖水鱼养殖中的应用第16页
        1.5.2 目的与意义第16-17页
第二章 食源性棕榈酸诱导斑马鱼肝脏损伤和内质网应激第17-30页
    2.1 前言第17页
    2.2 材料第17页
        2.2.1 试验动物第17页
        2.2.2 主要试剂第17页
        2.2.3 主要仪器第17页
    2.3 方法第17-22页
        2.3.1 斑马鱼养殖与取样第17-18页
        2.3.2 气相色谱检测饲料与斑马鱼肝脏脂肪酸组成第18-19页
        2.3.3 免疫组化分析第19页
        2.3.4 谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)酶活检测第19页
        2.3.5 肝脏caspase-3 酶活检测第19页
        2.3.6 肝脏TAG水平定量第19-20页
        2.3.7 实时定量PCR检测基因的mRNA水平第20-22页
        2.3.8 数据分析第22页
    2.4 结果第22-28页
        2.4.1 食源性棕榈酸在肝脏中的积累情况第22-25页
        2.4.2 食源性棕榈酸诱导斑马鱼肝脏损伤第25-26页
        2.4.3 食源性棕榈酸诱导斑马鱼肝脏内质网应激第26-27页
        2.4.4 食源性棕榈酸激活斑马鱼肝脏自噬第27-28页
        2.4.5 食源性棕榈酸激活NF-κB和SREBP通路第28页
    2.5 讨论第28-30页
第三章 棕榈酸诱导斑马鱼肝脏细胞凋亡与细胞周期阻滞第30-39页
    3.1 前言第30页
    3.2 材料第30页
        3.2.1 细胞株第30页
        3.2.2 主要试剂第30页
        3.2.3 主要仪器第30页
    3.3 方法第30-32页
        3.3.1 细胞培养第30-31页
        3.3.2 棕榈酸配制第31页
        3.3.3 RTCA实时监测细胞活性第31页
        3.3.4 Alarmablue法检测细胞存活率第31页
        3.3.5 流式细胞术检测细胞凋亡率第31-32页
        3.3.6 流式细胞术检测细胞周期第32页
        3.3.7 数据分析第32页
    3.4 结果第32-37页
        3.4.1 细胞形态学观察第32-33页
        3.4.2 细胞活性检测结果第33-35页
        3.4.3 棕榈酸对ZFL细胞凋亡的影响第35-36页
        3.4.4 棕榈酸对ZFL细胞周期的影响第36-37页
    3.5 讨论第37-39页
第四章 内质网应激抑制剂对斑马鱼肝细胞脂毒性的影响第39-48页
    4.1 前言第39页
    4.2 材料第39页
        4.2.1 细胞株第39页
        4.2.2 主要试剂第39页
        4.2.3 主要仪器第39页
    4.3 方法第39-41页
        4.3.1 细胞培养第39页
        4.3.2 棕榈酸配制第39页
        4.3.3 实时定量PCR检测基因表达第39-40页
        4.3.4 内质网应激抑制剂配制第40页
        4.3.5 Alarmablue法检测抑制剂作用下的细胞存活情况第40页
        4.3.6 流式细胞术检测抑制剂作用下的细胞凋亡情况第40页
        4.3.7 基因敲降法验证PERK-CHOP通路对细胞凋亡的影响第40-41页
        4.3.8 数据分析第41页
    4.4 结果第41-46页
        4.4.1 棕榈酸孵育对ZFL细胞内质网应激感应蛋白和UPR通路基因mRNA水平的影响第41-42页
        4.4.2 棕榈酸诱导的凋亡与UPR通路的关系第42-46页
    4.5 讨论第46-48页
第五章 内质网应激抑制剂对斑马鱼幼鱼棕榈酸脂毒性反应的影响第48-54页
    5.1 前言第48页
    5.2 材料第48页
        5.2.1 试验动物第48页
        5.2.2 主要试剂第48页
        5.2.3 主要仪器第48页
    5.3 方法第48-50页
        5.3.1 亲鱼繁殖第48页
        5.3.2 幼鱼养殖与取样第48-49页
        5.3.3 实时定量PCR检测内质网应激感应蛋白和通路基因的mRNA水平第49页
        5.3.4 内质网应激抑制剂配制第49-50页
    5.4 结果第50-53页
        5.4.1 食源性棕榈酸诱导斑马鱼幼鱼内质网应激第50-51页
        5.4.2 内质网应激抑制剂对棕榈酸脂毒性的影响第51-53页
    5.5 讨论第53-54页
第六章 全文结论第54-55页
参考文献第55-66页
致谢第66-67页
作者简历第67页

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