| 摘要 | 第2-5页 |
| ABSTRACT | 第5-7页 |
| 第一章 绪论 | 第13-17页 |
| 第二章 材料与方法 | 第17-22页 |
| 2.1 质粒与菌株 | 第17-18页 |
| 2.2 培养基 | 第18页 |
| 2.3 常规试剂及其他 | 第18-22页 |
| 第三章 方法 | 第22-26页 |
| 3.1 大肠杆菌质粒DNA 的小量提取 | 第22页 |
| 3.2 大肠杆菌和链霉菌质粒DNA 的少量快速提取及检测 | 第22页 |
| 3.3 感受态细胞制备 | 第22-23页 |
| 3.4 菌种保藏和链霉菌培养 | 第23页 |
| 3.5 DNA 片段的回收 | 第23页 |
| 3.6 电转化 | 第23页 |
| 3.7 两亲本杂交介导的质粒DNA 的跨属转移 | 第23-24页 |
| 3.8 双交换基因置换基因中断菌株的筛选 | 第24页 |
| 3.9 双交换基因中断或基因定点诱变菌株的鉴定和确认 | 第24-25页 |
| 3.10 双交换基因置换或基因中断菌株鉴定的聚合酶链式反应 | 第25页 |
| 3.11 垩唑霉素分离提纯和 HPLC-MS 检测 | 第25-26页 |
| 第四章 结果 | 第26-43页 |
| 4.1 白色链霉菌 JA3453 中串连 KS 结构域的发现和定点诱变分析 | 第26-37页 |
| 4.1.1 包含串连KS 结构域的ozmH 部分基因的克隆和体外定点诱变 | 第27-32页 |
| 4.1.1.1 包含串连KS 结构域的基因片断的克隆 | 第27页 |
| 4.1.1.2 串连KS 结构域的生物信息学分析 | 第27-29页 |
| 4.1.1.3 定点诱变的原理 | 第29-30页 |
| 4.1.1.4 引物设计和 PCR 定点诱变 | 第30-32页 |
| 4.1.2 在包含串连KS 结构域的cosmid pJTU1060 上分别引入定点突变 | 第32-34页 |
| 4.1.2.1 背景 | 第32页 |
| 4.1.2.2 将定点诱变位点引入到pKOV-kan 质粒上 | 第32页 |
| 4.1.2.3 RecA 介导的大肠杆菌内的双交换 | 第32-34页 |
| 4.1.3 构建分别在串连 KS 结构域附近插入抗性基因的突变株 | 第34-37页 |
| 4.1.3.1 前言 | 第34页 |
| 4.1.3.2 抗性基因分别插入到cosmid pJTU1060 | 第34-37页 |
| 4.1.4 突变株SDF7 和SDF8 的筛选和分离检测 | 第37页 |
| 4.2 白色链霉菌JA3453 中垩唑霉素生物合成基因簇调节基因的中断分析 | 第37-40页 |
| 4.2.1 调节基因ozmR 和ozmU 的生物信息学分析 | 第37-38页 |
| 4.2.2 调节基因ozmR 和ozmU 的基因中断 | 第38-40页 |
| 4.3 白色链霉菌JA3453 中垩唑霉素生物合成基因簇下游边界的确定 | 第40-43页 |
| 第五章 讨论 | 第43-46页 |
| 文献综述 | 第46-56页 |
| 参考文献 | 第56-62页 |
| 致谢 | 第62-63页 |
| 硕士期间发表的论著 | 第63-65页 |
