| 摘要 | 第6-7页 |
| Abstract | 第7-8页 |
| 1. 前言 | 第11-21页 |
| 1.1 烯醇化酶 | 第11-13页 |
| 1.1.1 烯醇化酶的功能与类别 | 第11-12页 |
| 1.1.2 烯醇化酶的空间结构 | 第12-13页 |
| 1.2 α -烯醇化酶的研究进展 | 第13-17页 |
| 1.2.1 α -烯醇化酶参与细胞能量的调节过程 | 第13页 |
| 1.2.2 α-烯醇化酶作为纤维蛋白酶原受体在机体内的作用 | 第13-14页 |
| 1.2.3 α-烯醇化酶作为c-Myc结合蛋白 | 第14-15页 |
| 1.2.4 α-烯醇化酶作为候选的肿瘤标志物 | 第15-16页 |
| 1.2.5 自身免疫病与α-烯醇化酶表达间的病理学关联 | 第16-17页 |
| 1.3 单克隆抗体 | 第17-19页 |
| 1.3.1 单克隆抗体的概念 | 第17页 |
| 1.3.2 单克隆抗体技术的发展史 | 第17-19页 |
| 1.3.3 单克隆抗体的应用 | 第19页 |
| 1.4 本文研究内容、目的与意义 | 第19-21页 |
| 2. 实验材料和方法 | 第21-29页 |
| 2.1 实验材料 | 第21页 |
| 2.1.1 菌株与质粒 | 第21页 |
| 2.1.2 常用生物信息学分析软件 | 第21页 |
| 2.2 实验方法 | 第21-29页 |
| 2.2.1 α-enolase基因片段的获得 | 第21-23页 |
| 2.2.2 α-enolase的克隆载体和原核载体的构建 | 第23页 |
| 2.2.3 重组蛋白的原核表达以及表达产物的SDS-PAGE分析 | 第23-24页 |
| 2.2.4 目的蛋白的制备和蛋白含量测定 | 第24页 |
| 2.2.5 抗原制备和免疫小鼠 | 第24-25页 |
| 2.2.6 免疫小鼠血清效价测定 | 第25-26页 |
| 2.2.7 复苏骨髓瘤细胞和分离饲养细胞、脾细胞 | 第26-27页 |
| 2.2.8 细胞融合 | 第27-28页 |
| 2.2.9 双抗体夹心ELISA法筛选阳性克隆 | 第28页 |
| 2.2.10 有限稀释法筛选单克隆 | 第28-29页 |
| 3. 实验结果与分析 | 第29-47页 |
| 3.1 三种不同来源烯醇化酶基因的克隆与表达 | 第29-44页 |
| 3.1.1 大肠杆菌烯醇化酶基因的克隆与表达 | 第29-36页 |
| 3.1.2 牙龈卟啉单胞菌烯醇化酶基因的克隆 | 第36-38页 |
| 3.1.3 人类α-烯醇化酶基因的克隆和原核表达 | 第38-42页 |
| 3.1.4 三种来源α-烯醇化酶序列的相似性的比较 | 第42-44页 |
| 3.2 单克隆抗体的制备 | 第44-47页 |
| 3.2.1 间接ELISA测定血清中抗体效价 | 第44-45页 |
| 3.2.2 单克隆抗体的鉴定 | 第45-47页 |
| 4. 讨论 | 第47-48页 |
| 参考文献 | 第48-56页 |
| 攻读硕士学位期间发表的学术论文 | 第56页 |
| 基金资助 | 第56-57页 |
| 致谢 | 第57页 |
