摘要 | 第5-8页 |
Abstract | 第8-10页 |
缩略词表 | 第15-17页 |
第一部分 文献综述 抗缪勒氏管激素研究进展 | 第17-31页 |
1 AMH及其受体的生物学特征 | 第17-23页 |
1.1 AMH的分子生物学特性 | 第17-18页 |
1.2 AMH启动子区调控因子 | 第18页 |
1.3 AMH特异性受体AMHR2的分子生物学特性及表达 | 第18-19页 |
1.4 调控AMH表达的相关因子 | 第19-21页 |
1.5 AMH的信号通路 | 第21页 |
1.6 AMH在卵巢中的表达模式 | 第21-22页 |
1.7 AMH在卵巢中的生理功能 | 第22-23页 |
2 AMH与生殖医学 | 第23-27页 |
2.1 AMH随年龄的变化模式 | 第23-24页 |
2.2 AMH在月经周期的变化 | 第24-25页 |
2.3 AMH在妊娠时的变化 | 第25页 |
2.4 生理特性与AMH浓度 | 第25页 |
2.5 AMH在辅助生殖技术的应用 | 第25-27页 |
3 AMH在动物生殖领域的应用 | 第27-31页 |
3.1 AMH在动物卵巢上的定位与表达 | 第27页 |
3.2 AMH在家畜卵泡周期中的变化 | 第27-28页 |
3.3 动物不同生理状态下AMH的变化模式 | 第28-29页 |
3.4 AMH在繁殖生产中应用 | 第29-30页 |
3.5 AMH与动物卵巢疾病 | 第30-31页 |
试验研究 | 第31-131页 |
第一章 AMH在猪卵巢及其他组织中的表达模式 | 第31-41页 |
引言 | 第31-32页 |
1 材料与方法 | 第32-37页 |
1.1 试验材料 | 第32-33页 |
1.2 方法 | 第33-35页 |
1.3 猪卵巢免疫荧光染色 | 第35-36页 |
1.4 不同直径卵丘颗粒细胞的获取 | 第36页 |
1.5 不同直径卵丘卵母细胞的获取 | 第36页 |
1.6 不同直径卵泡液的获取 | 第36页 |
1.7 AMH的浓度测定 | 第36-37页 |
2 结果与分析 | 第37-39页 |
2.1 AMH与AMHR2在猪体内不同器官的mRNA表达 | 第37-38页 |
2.2 AMH在猪卵巢组织的免疫荧光 | 第38页 |
2.3 AMH及AMHR2 mRNA在不同直径卵泡壁层颗粒细胞中的表达 | 第38-39页 |
2.4 AMH在不同直径卵泡液中的浓度 | 第39页 |
3 讨论 | 第39-41页 |
第二章 AMH对猪卵母细胞成熟的影响 | 第41-65页 |
引言 | 第41页 |
1 材料与方法 | 第41-52页 |
1.1 实验材料 | 第41-46页 |
1.2 试验方法 | 第46-52页 |
2 试验结果 | 第52-61页 |
2.1 非限制性培养基中添加AMH对卵母细胞体外成熟和孤雌激活后胚胎发育的影响 | 第52-53页 |
2.2 非限制性培养基中添加AMH对卵母细胞卵丘扩散的影响 | 第53-54页 |
2.3 猪胚胎培养基中添加AMH对孤雌激活胚胎发育的影响 | 第54页 |
2.4 化学限定性培养基中添加PG600和AMH对卵母细胞成熟和孤雌激活后胚胎发育的影响 | 第54-55页 |
2.5 AMH添加入限定性培养基对卵母细胞减数分裂进程的影响 | 第55-56页 |
2.6 限定性培养基中添加AMH对卵丘扩散的影响 | 第56-57页 |
2.7 限定性成熟培养基中添加AMH对COCs中卵丘扩散基因PTX3、HAS2和颗粒细胞凋亡基因CASPASE3、BAX、BCL2基因表达的影响 | 第57-58页 |
2.8 化学限定性培养基中添加AMH对1~3mm卵泡来源卵母细胞成熟和孤雌激活胚胎发育的影响 | 第58-59页 |
2.9 化学限定性培养基中添加FSH、LH和AMH对卵母细胞成熟和孤雌激活后胚胎发育的影响 | 第59页 |
2.10 限定培养基中添加AMH对卵母细胞成熟后体外受精胚胎发育的影响 | 第59-60页 |
2.11 限定性成熟培养基中添加AMH对卵母细胞活性氧的检测 | 第60-61页 |
2.12 限定成熟培养基中添加PG600和AMH后对MⅡ期卵母细胞GDF9和BMP15基因表达的影响 | 第61页 |
3 讨论 | 第61-65页 |
第三章 AMH在颗粒细胞中的调控作用 | 第65-85页 |
引言 | 第65-66页 |
1 材料与方法 | 第66-72页 |
1.1 试验材料 | 第66-67页 |
1.2 试验方法 | 第67-71页 |
1.3 试验设计 | 第71-72页 |
2 试验结果 | 第72-82页 |
2.1 Percoll方法分离颗粒细胞分层 | 第72页 |
2.2 30%和40%层颗粒细胞获得细胞数和存活率比较 | 第72-73页 |
2.3 30%和40%层颗粒细胞相关内参比较 | 第73-74页 |
2.4 30%和40% Percoll后细胞增殖曲线 | 第74页 |
2.5 40%来源颗粒细胞体外培养 | 第74-75页 |
2.6 40%来源颗粒细胞FSHR和LHR荧光染色 | 第75-76页 |
2.7 不同浓度FSH添加入颗粒细胞中FSHR和CYP19A1表达的影响 | 第76页 |
2.8 不同浓度FSH添加入颗粒细胞中对雌激素产生的影响 | 第76-77页 |
2.9 AMH添加对细胞周期的影响 | 第77页 |
2.10 FSH和AMH共同添加对FSHR和CYP19A1的影响 | 第77-78页 |
2.11 FSH和AMH共同添加对雌激素产生的影响 | 第78页 |
2.12 Forskolin和AMH的共同添加对颗粒细胞FSHR和CYP19A1的影响 | 第78-79页 |
2.13 AMH siRNA干扰载体的验证 | 第79-80页 |
2.14 siRNA干扰后添加FSH添加对FSHR和CYP19A1基因表达的影响 | 第80-81页 |
2.15 siRNA干扰后添加FSH添加对雌激素产生的影响 | 第81页 |
2.16 体外培养条件下颗粒细胞中AMH mRNA表达 | 第81-82页 |
2.17 颗粒细胞中睾酮和雌二醇对AMH产生的影响 | 第82页 |
3 讨论 | 第82-85页 |
第四章 AMH对猪卵泡膜细胞类固醇激素产生的影响 | 第85-104页 |
引言 | 第85-86页 |
1 材料与方法 | 第86-91页 |
1.1 材料 | 第86-87页 |
1.2 试验方法 | 第87-91页 |
1.3 试验设计 | 第91页 |
2 试验结果 | 第91-99页 |
2.1 Procoll分离卵巢膜细胞 | 第91-92页 |
2.2 膜细胞的体外培养 | 第92-93页 |
2.3 膜细胞的免疫荧光鉴定 | 第93-94页 |
2.4 流式细胞数鉴定膜细胞纯度 | 第94页 |
2.5 AMHR2在膜细胞中的表达 | 第94-95页 |
2.6 LH和AMH对膜细胞类固醇产生关键基因的影响 | 第95-96页 |
2.7 LH和AMH对膜细胞产生雄烯二酮和孕酮的影响 | 第96-97页 |
2.8 siRNA干扰AMHR2的验证 | 第97-98页 |
2.9 AMHR2抑制后与LH和AMH共同添加对类固醇生成相关基因的影响 | 第98-99页 |
2.10 AMHR2抑制后与LH和AMH共同添加对雄烯二酮和孕酮产生的影响 | 第99页 |
3 讨论 | 第99-104页 |
第五章 AMH对猪腔前卵泡体外培养基因的表达谱分析 | 第104-131页 |
引言 | 第104-105页 |
1 材料与方法 | 第105-112页 |
1.1 材料 | 第105页 |
1.2 试验方法 | 第105-112页 |
1.3 数据分析 | 第112页 |
2 试验结果 | 第112-126页 |
2.1 AMH处理对PFs-OGCs成腔和成活率的影响 | 第112-113页 |
2.2 RNA样品质量检测 | 第113-114页 |
2.3 测序结果分析 | 第114-115页 |
2.4 测序长度评估 | 第115-116页 |
2.5 测序饱和度分析 | 第116-117页 |
2.6 基因覆盖度统计 | 第117-118页 |
2.7 条件特异性表达统计图 | 第118-120页 |
2.8 3D PCA分析图 | 第120页 |
2.9 差异表达基因筛选 | 第120-122页 |
2.10 基因表达模式聚类分析 | 第122页 |
2.11 Gene Ontology功能分类 | 第122-123页 |
2.12 Gene Ontology功能显著性富集分析 | 第123-126页 |
2.13 基因芯片差异基因验证 | 第126页 |
3 讨论 | 第126-131页 |
3.1 主要富集通路通路相关基因功能分析 | 第127-130页 |
3.2 与已经报道的AMH芯片结果比较分析 | 第130-131页 |
全文结论 | 第131-132页 |
创新性 | 第132-133页 |
参考文献 | 第133-148页 |
致谢 | 第148-150页 |
个人简历 | 第150-151页 |