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玉米杂种优势相关基因的克隆与功能分析

中文摘要第5-7页
Abstract第7-8页
第1章 引言第13-32页
    1.1 研究背景第13-14页
    1.2 作物杂种优势的研究进展第14-26页
        1.2.1 杂种优势的定义和度量方法第14-15页
        1.2.2 作物杂种优势的应用第15-19页
            1.2.2.1 玉米杂种优势的应用及研究进展第15-16页
            1.2.2.2 水稻杂种优势的应用及研究进展第16-17页
            1.2.2.3 油菜杂种优势的应用及研究进展第17-18页
            1.2.2.4 棉花杂种优势的应用及研究进展第18-19页
        1.2.3 作物杂种优势的遗传机理第19-26页
            1.2.3.1 显性假说第19-20页
            1.2.3.2 超显性假说第20-21页
            1.2.3.3 上位性互作假说第21页
            1.2.3.4 亲本遗传差异性与杂种优势第21-22页
            1.2.3.5 表观遗传与杂种优势第22-23页
            1.2.3.6 遗传振动合成学说第23-24页
            1.2.3.7 基因网络系统假说与杂种优势第24页
            1.2.3.8 有机体生活力理论与杂种优势第24-25页
            1.2.3.9 遗传平衡理论第25页
            1.2.3.10 活性基因效应假说与杂种优势第25-26页
    1.3 作物杂种优势的研究方法第26-31页
        1.3.1 QTL 定位第26页
        1.3.2 蛋白组学第26-27页
        1.3.3 表观遗传学第27-28页
        1.3.4 转录组学第28-31页
            1.3.4.1 基因表达差异与杂种优势第28-29页
            1.3.4.2 转录组水平的研究方法第29-31页
    1.4 研究目的意义第31-32页
        1.4.1 研究目的第31页
        1.4.2 研究内容第31-32页
            1.4.2.1 杂交种组配第31页
            1.4.2.2 杂交种及其亲本之间差异表达基因分析第31页
            1.4.2.3 杂种优势相关基因的克隆及功能分析第31-32页
第2章 玉米杂交种及其亲本差异表达基因分析第32-63页
    2.1 实验材料第32页
    2.2 实验试剂第32-33页
    2.3 溶液配制第33-34页
    2.4 主要仪器设备第34页
    2.5 技术路线第34-35页
    2.6 实验方法第35-47页
        2.6.1 玉米形态学指标测定第35-36页
            2.6.1.2 幼胚形态学指标测定第36页
        2.6.2 总 RNA 提取第36-37页
        2.6.3 cDNA 第一链的合成第37-38页
        2.6.4 双链 cDNA 的合成第38页
        2.6.5 cDNA 样品酶切及接头连接第38-39页
        2.6.6 cDNA 样品预扩增第39-40页
        2.6.7 选择性扩增第40-41页
        2.6.8 变性聚丙烯酰胺凝胶电泳(PAGE)第41-42页
        2.6.9 银染第42-43页
        2.6.10 目的条带的回收第43页
        2.6.11 目的片段重复 PCR第43页
        2.6.12 目的片段琼脂糖回收第43-44页
        2.6.13 目的片段测序第44页
        2.6.14 测序结果分析第44-45页
        2.6.15 Real‐time qRT‐PCR第45-47页
    2.7 实验结果第47-60页
        2.7.1 形态指标测定第47-50页
        2.7.2 总 RNA 提取第50页
        2.7.3 双链 cDNA 酶切第50-51页
        2.7.4 预扩增和选择性扩增第51-52页
        2.7.5 变性聚丙烯酰胺凝胶电泳第52-53页
        2.7.6 目的片段琼脂糖回收测序第53-54页
        2.7.7 测序结果同源性分析第54-55页
        2.7.8 功能序列聚类分析第55-56页
        2.7.9 杂种优势形成相关候选基因同源性分析第56-59页
        2.7.10 候选基因功能验证第59-60页
        2.7.11 候选基因表达模式分析第60页
    2.8 讨论第60-62页
    2.9 小结第62-63页
第3章 杂种优势相关基因的克隆及功能验证第63-89页
    3.1 实验材料第63-65页
        3.1.1 材料第63页
        3.1.2 载体及菌株第63-64页
        3.1.3 实验药品第64-65页
        3.1.4 实验仪器第65页
    3.2 实验方法第65-77页
        3.2.1 试剂配制第65-66页
        3.2.2 总 RNA 提取第66-68页
        3.2.3 cDNA 第一链合成第68页
        3.2.4 引物设计第68-69页
        3.2.5 杂种优势相关基因的克隆第69-70页
        3.2.6 目的片段胶回收第70页
        3.2.7 胶回收片段加 A 反应第70页
        3.2.8 目的片段与克隆载体连接第70页
        3.2.9 大肠杆菌感受态细胞的制备第70-71页
        3.2.10 重组质粒的大肠杆菌转化第71-72页
        3.2.11 质粒 DNA 的提取第72-73页
        3.2.12 目的基因与表达载体双酶切第73页
        3.2.13 植物表达载体的构建第73-74页
        3.2.14 冻融法制备农杆菌感受态细胞第74页
        3.2.15 农杆菌转化及分子鉴定第74-75页
        3.2.16 拟南芥的遗传转化第75页
        3.2.17 阳性植株的筛选第75-76页
        3.2.18 植物基因组 DNA 的提取第76页
        3.2.19 PCR 检测阳性植株第76-77页
    3.3 结果与分析第77-85页
        3.3.1 总 RNA 提取及 cDNA 第一链合成第77-78页
        3.3.2 候选基因的克隆第78-79页
        3.3.3 候选基因编码蛋白质多重序列比对第79-82页
        3.3.4 植物表达载体的鉴定第82-83页
        3.3.5 转基因植株抗性筛选第83页
        3.3.6 基因组 DNA 提取第83-84页
        3.3.7 拟转基因植株 PCR 检测第84-85页
    3.4 补充实验第85-86页
        3.4.1 拟南芥杂交第85页
        3.4.2 杂交拟南芥表型及生理指标分析第85-86页
    3.5 讨论第86-88页
    3.6 小结第88-89页
第4章 全文结论第89-90页
参考文献第90-98页
作者简介第98-99页
致谢第99页

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