中文摘要 | 第5-7页 |
Abstract | 第7-8页 |
第1章 引言 | 第13-32页 |
1.1 研究背景 | 第13-14页 |
1.2 作物杂种优势的研究进展 | 第14-26页 |
1.2.1 杂种优势的定义和度量方法 | 第14-15页 |
1.2.2 作物杂种优势的应用 | 第15-19页 |
1.2.2.1 玉米杂种优势的应用及研究进展 | 第15-16页 |
1.2.2.2 水稻杂种优势的应用及研究进展 | 第16-17页 |
1.2.2.3 油菜杂种优势的应用及研究进展 | 第17-18页 |
1.2.2.4 棉花杂种优势的应用及研究进展 | 第18-19页 |
1.2.3 作物杂种优势的遗传机理 | 第19-26页 |
1.2.3.1 显性假说 | 第19-20页 |
1.2.3.2 超显性假说 | 第20-21页 |
1.2.3.3 上位性互作假说 | 第21页 |
1.2.3.4 亲本遗传差异性与杂种优势 | 第21-22页 |
1.2.3.5 表观遗传与杂种优势 | 第22-23页 |
1.2.3.6 遗传振动合成学说 | 第23-24页 |
1.2.3.7 基因网络系统假说与杂种优势 | 第24页 |
1.2.3.8 有机体生活力理论与杂种优势 | 第24-25页 |
1.2.3.9 遗传平衡理论 | 第25页 |
1.2.3.10 活性基因效应假说与杂种优势 | 第25-26页 |
1.3 作物杂种优势的研究方法 | 第26-31页 |
1.3.1 QTL 定位 | 第26页 |
1.3.2 蛋白组学 | 第26-27页 |
1.3.3 表观遗传学 | 第27-28页 |
1.3.4 转录组学 | 第28-31页 |
1.3.4.1 基因表达差异与杂种优势 | 第28-29页 |
1.3.4.2 转录组水平的研究方法 | 第29-31页 |
1.4 研究目的意义 | 第31-32页 |
1.4.1 研究目的 | 第31页 |
1.4.2 研究内容 | 第31-32页 |
1.4.2.1 杂交种组配 | 第31页 |
1.4.2.2 杂交种及其亲本之间差异表达基因分析 | 第31页 |
1.4.2.3 杂种优势相关基因的克隆及功能分析 | 第31-32页 |
第2章 玉米杂交种及其亲本差异表达基因分析 | 第32-63页 |
2.1 实验材料 | 第32页 |
2.2 实验试剂 | 第32-33页 |
2.3 溶液配制 | 第33-34页 |
2.4 主要仪器设备 | 第34页 |
2.5 技术路线 | 第34-35页 |
2.6 实验方法 | 第35-47页 |
2.6.1 玉米形态学指标测定 | 第35-36页 |
2.6.1.2 幼胚形态学指标测定 | 第36页 |
2.6.2 总 RNA 提取 | 第36-37页 |
2.6.3 cDNA 第一链的合成 | 第37-38页 |
2.6.4 双链 cDNA 的合成 | 第38页 |
2.6.5 cDNA 样品酶切及接头连接 | 第38-39页 |
2.6.6 cDNA 样品预扩增 | 第39-40页 |
2.6.7 选择性扩增 | 第40-41页 |
2.6.8 变性聚丙烯酰胺凝胶电泳(PAGE) | 第41-42页 |
2.6.9 银染 | 第42-43页 |
2.6.10 目的条带的回收 | 第43页 |
2.6.11 目的片段重复 PCR | 第43页 |
2.6.12 目的片段琼脂糖回收 | 第43-44页 |
2.6.13 目的片段测序 | 第44页 |
2.6.14 测序结果分析 | 第44-45页 |
2.6.15 Real‐time qRT‐PCR | 第45-47页 |
2.7 实验结果 | 第47-60页 |
2.7.1 形态指标测定 | 第47-50页 |
2.7.2 总 RNA 提取 | 第50页 |
2.7.3 双链 cDNA 酶切 | 第50-51页 |
2.7.4 预扩增和选择性扩增 | 第51-52页 |
2.7.5 变性聚丙烯酰胺凝胶电泳 | 第52-53页 |
2.7.6 目的片段琼脂糖回收测序 | 第53-54页 |
2.7.7 测序结果同源性分析 | 第54-55页 |
2.7.8 功能序列聚类分析 | 第55-56页 |
2.7.9 杂种优势形成相关候选基因同源性分析 | 第56-59页 |
2.7.10 候选基因功能验证 | 第59-60页 |
2.7.11 候选基因表达模式分析 | 第60页 |
2.8 讨论 | 第60-62页 |
2.9 小结 | 第62-63页 |
第3章 杂种优势相关基因的克隆及功能验证 | 第63-89页 |
3.1 实验材料 | 第63-65页 |
3.1.1 材料 | 第63页 |
3.1.2 载体及菌株 | 第63-64页 |
3.1.3 实验药品 | 第64-65页 |
3.1.4 实验仪器 | 第65页 |
3.2 实验方法 | 第65-77页 |
3.2.1 试剂配制 | 第65-66页 |
3.2.2 总 RNA 提取 | 第66-68页 |
3.2.3 cDNA 第一链合成 | 第68页 |
3.2.4 引物设计 | 第68-69页 |
3.2.5 杂种优势相关基因的克隆 | 第69-70页 |
3.2.6 目的片段胶回收 | 第70页 |
3.2.7 胶回收片段加 A 反应 | 第70页 |
3.2.8 目的片段与克隆载体连接 | 第70页 |
3.2.9 大肠杆菌感受态细胞的制备 | 第70-71页 |
3.2.10 重组质粒的大肠杆菌转化 | 第71-72页 |
3.2.11 质粒 DNA 的提取 | 第72-73页 |
3.2.12 目的基因与表达载体双酶切 | 第73页 |
3.2.13 植物表达载体的构建 | 第73-74页 |
3.2.14 冻融法制备农杆菌感受态细胞 | 第74页 |
3.2.15 农杆菌转化及分子鉴定 | 第74-75页 |
3.2.16 拟南芥的遗传转化 | 第75页 |
3.2.17 阳性植株的筛选 | 第75-76页 |
3.2.18 植物基因组 DNA 的提取 | 第76页 |
3.2.19 PCR 检测阳性植株 | 第76-77页 |
3.3 结果与分析 | 第77-85页 |
3.3.1 总 RNA 提取及 cDNA 第一链合成 | 第77-78页 |
3.3.2 候选基因的克隆 | 第78-79页 |
3.3.3 候选基因编码蛋白质多重序列比对 | 第79-82页 |
3.3.4 植物表达载体的鉴定 | 第82-83页 |
3.3.5 转基因植株抗性筛选 | 第83页 |
3.3.6 基因组 DNA 提取 | 第83-84页 |
3.3.7 拟转基因植株 PCR 检测 | 第84-85页 |
3.4 补充实验 | 第85-86页 |
3.4.1 拟南芥杂交 | 第85页 |
3.4.2 杂交拟南芥表型及生理指标分析 | 第85-86页 |
3.5 讨论 | 第86-88页 |
3.6 小结 | 第88-89页 |
第4章 全文结论 | 第89-90页 |
参考文献 | 第90-98页 |
作者简介 | 第98-99页 |
致谢 | 第99页 |