中文摘要 | 第4-5页 |
Abstract | 第5页 |
中英文缩略词表 | 第7-11页 |
第1章 绪论 | 第11-22页 |
1.1 草酰乙酸及其生物学作用 | 第11-14页 |
1.2 草酰乙酸生物学作用研究的意义 | 第14-16页 |
1.3 细胞凋亡、活性氧与肿瘤 | 第16-19页 |
1.3.1 细胞凋亡与肿瘤 | 第16-18页 |
1.3.2 活性氧与肿瘤 | 第18-19页 |
1.3.3 肿瘤细胞凋亡与活性氧 | 第19页 |
1.4 肿瘤血管生成 | 第19-22页 |
第2章 草酰乙酸肝癌 HepG2 细胞毒性作用的研究 | 第22-42页 |
2.1 实验仪器和材料 | 第22-26页 |
2.1.1 主要仪器 | 第22-23页 |
2.1.2 主要试剂和耗材 | 第23-25页 |
2.1.3 主要试剂配制 | 第25-26页 |
2.1.4 细胞株来源 | 第26页 |
2.2 实验方法 | 第26-32页 |
2.2.1 细胞培养 | 第26-27页 |
2.2.2 MTT 法检测细胞活力 | 第27页 |
2.2.3 光镜下观察细胞形态 | 第27页 |
2.2.4 克隆形成实验检测细胞存活 | 第27-28页 |
2.2.5 流式细胞术检测细胞死亡 | 第28页 |
2.2.6 RNA 提取 | 第28-29页 |
2.2.7 RNA 定量 | 第29页 |
2.2.8 逆转录反应 | 第29页 |
2.2.9 PCR 反应 | 第29-30页 |
2.2.10 琼脂糖凝胶电泳 | 第30-31页 |
2.2.11 Caspase3 酶活力测定 | 第31-32页 |
2.2.12 细胞 ROS 水平检测 | 第32页 |
2.3 数据处理 | 第32页 |
2.4 实验结果 | 第32-40页 |
2.4.1 草酰乙酸选择性诱导人肝癌细胞 HepG2 死亡 | 第32-35页 |
2.4.2 草酰乙酸诱导的肝癌 HepG2 细胞死亡和凋亡有关 | 第35-36页 |
2.4.3 草酰乙酸诱导的细胞死亡和活性氧有关 | 第36-40页 |
2.5 讨论 | 第40-42页 |
第3章 草酰乙酸上调肝癌 HepG2 细胞 VEGF mRNA 表达的研究 | 第42-53页 |
3.1 实验仪器和材料 | 第42页 |
3.2 实验方法 | 第42-45页 |
3.2.1 Western Blot 法检测相关蛋白表达 | 第42-45页 |
3.3 数据处理 | 第45页 |
3.4 实验结果 | 第45-51页 |
3.4.1 草酰乙酸使 ERK 磷酸化程度增高 | 第45-46页 |
3.4.2 草酰乙酸通过 ERK 的磷酸化稳定细胞 Hif-1α蛋白水平 | 第46-49页 |
3.4.3 草酰乙酸能上调血管内皮生长因子 VEGF 的 mRNA 表达 | 第49-50页 |
3.4.4 MEK1 阻断剂能阻断草酰乙酸诱导的血管内皮生成因子VEGF 表达上调 | 第50-51页 |
3.5 讨论 | 第51-53页 |
第4章 结论 | 第53-54页 |
参考文献 | 第54-62页 |
在学期间获得的研究成果 | 第62-63页 |
致谢 | 第63页 |