摘要 | 第2-5页 |
abstract | 第5-7页 |
引言 | 第10-14页 |
材料与方法 | 第14-27页 |
1 仪器、试剂和耗材 | 第14-17页 |
1.1 主要设备和仪器 | 第14-15页 |
1.2 试剂和耗材 | 第15-16页 |
1.3 主要试剂配制 | 第16-17页 |
2 实验方法 | 第17-26页 |
2.1 PC细胞系及人原代PSC的培养 | 第17页 |
2.2 条件培养基的收集和保存 | 第17-18页 |
2.3 CCK-8试剂盒检测PC细胞对GEM的IC50值和生长抑制率 | 第18-19页 |
2.4 Annexin V-FITC/PI双染流式细胞术检测细胞凋亡 | 第19-20页 |
2.5 共培养PC细胞与PSC | 第20页 |
2.6 酶联免疫吸附试验(ELISA)检测HGF水平 | 第20-21页 |
2.7 免疫荧光染色 | 第21页 |
2.8 细胞系总RNA的提取 | 第21-22页 |
2.9 RNA样本中残留DNA的灭活及cDNA合成 | 第22页 |
2.10 实时荧光定量PCR检测E-Cadherin、Vimentin、HGF、c-Met mRNA水平 | 第22-23页 |
2.11 总蛋白的提取 | 第23-24页 |
2.12 Western Blot检测蛋白及其磷酸化水平的表达 | 第24-26页 |
3 统计学分析 | 第26-27页 |
结果 | 第27-41页 |
1 PSC对PC细胞化疗耐药性的影响 | 第27-29页 |
2 PSC对PC细胞EMT相关表型的影响 | 第29-30页 |
3 PSC高表达HGF | 第30-33页 |
4 HGF/c-Met生物轴是促进PC细胞发生EMT的关键效应通路 | 第33-36页 |
5 c-Met活化对PC细胞化疗抵抗的影响 | 第36-38页 |
6 PSC经由HGF/c-Met生物轴活化PI3K/Akt信号通路促进PC细胞发生EMT和增强化疗抵抗 | 第38-41页 |
讨论 | 第41-46页 |
1 PSC与PC化疗抵抗 | 第41-42页 |
2 PSC与PC EMT | 第42-43页 |
3 HGF/c-Met生物轴与PC化疗抵抗 | 第43-46页 |
结论 | 第46-47页 |
参考文献 | 第47-52页 |
综述 胰腺星状细胞在胰腺癌化疗耐药中的作用 | 第52-69页 |
综述的参考文献 | 第62-69页 |
攻读学位期间的研究成果 | 第69-70页 |
缩略词表 | 第70-74页 |
致谢 | 第74-75页 |