| 摘要 | 第4-5页 |
| ABSTRACT | 第5页 |
| 第一章 文献综述 | 第8-17页 |
| 1.1 霍乱的流行概况 | 第8页 |
| 1.2 霍乱弧菌的生物学特性以及危害 | 第8-9页 |
| 1.3 霍乱弧菌的致病机制以及主要毒力因子 | 第9-10页 |
| 1.3.1 霍乱弧菌的致病机制 | 第9页 |
| 1.3.2 霍乱弧菌毒力基因表达调控网络 | 第9-10页 |
| 1.4 毒力因子 | 第10-12页 |
| 1.4.1 毒素协同菌毛（TCP） | 第10-11页 |
| 1.4.2 霍乱毒素（CT） | 第11-12页 |
| 1.5 PDI家族 | 第12-15页 |
| 1.5.1 真核生物PDI家族 | 第12-13页 |
| 1.5.2 原核生物PDI家族 | 第13-15页 |
| 1.6 胆汁酸 | 第15-16页 |
| 1.7 胆汁酸诱导霍乱毒素的产生 | 第16-17页 |
| 第二章 霍乱弧菌及大肠杆菌DsbC蛋白的表达纯化以及霍乱弧菌DsbC多克隆抗体的制备 | 第17-31页 |
| 2.1 试验材料与仪器 | 第17-20页 |
| 2.1.1 菌株与质粒 | 第17页 |
| 2.1.2 酶及试剂盒 | 第17页 |
| 2.1.3 试验仪器 | 第17-18页 |
| 2.1.4 主要试剂以及配制方法 | 第18-20页 |
| 2.2 试验方法 | 第20-27页 |
| 2.2.1 E.coli DH5α 超级感受态细胞的制备 | 第20-21页 |
| 2.2.2 霍乱弧菌Vc DsbC以及大肠杆菌EcDsbC原核表达载体的构建 | 第21-25页 |
| 2.2.3 霍乱弧菌以及大肠杆菌DsbC蛋白的表达与纯化 | 第25-26页 |
| 2.2.4 霍乱弧菌Vc DsbC多克隆抗体的制备 | 第26-27页 |
| 2.3 结果与分析 | 第27-29页 |
| 2.3.1 重组质粒的构建以及鉴定 | 第27-28页 |
| 2.3.2 VcDsbC以及Ec DsbC重组蛋白的表达和纯化 | 第28页 |
| 2.3.3 霍乱弧菌Vc DsbC重组蛋白多克隆抗体的制备 | 第28-29页 |
| 2.4 讨论 | 第29-31页 |
| 第三章 还原酶活性测定与等温滴定量热(ITC)试验 | 第31-36页 |
| 3.1 仪器及试剂 | 第31页 |
| 3.1.1 仪器 | 第31页 |
| 3.1.2 试剂及配制方法 | 第31页 |
| 3.2 试验方法 | 第31-33页 |
| 3.2.1 VcDsbC和Ec DsbC还原酶活性的测定 | 第31-32页 |
| 3.2.2 ITC检测DsbC与牛磺胆酸（TC）的相互作用 | 第32-33页 |
| 3.3 结果与分析 | 第33-34页 |
| 3.3.1 胰岛素测定还原酶活性试验结果 | 第33-34页 |
| 3.3.2 ITC分析DsbC与TC之间的互作 | 第34页 |
| 3.4 讨论 | 第34-36页 |
| 第四章 霍乱弧菌Vc DsbC异构酶功能体内分析 | 第36-48页 |
| 4.1 仪器及试剂 | 第36页 |
| 4.1.1 仪器 | 第36页 |
| 4.1.2 试剂 | 第36页 |
| 4.2 试验方法 | 第36-45页 |
| 4.2.1 霍乱弧菌Vc DsbC缺失株与回补株的构建 | 第36-43页 |
| 4.2.2 β 内酰胺酶突变重组质粒的构建 | 第43-45页 |
| 4.2.3 β 内酰胺酶系统菌株的准备 | 第45页 |
| 4.3 结果与分析 | 第45-47页 |
| 4.3.1 Vc DsbC缺失株回补株以及 β 内酰胺酶突变重组质粒的构建结果 | 第45-46页 |
| 4.3.2 VcDsbC异构酶功能体内试验将结果 | 第46-47页 |
| 4.4 讨论 | 第47-48页 |
| 第五章 体外异构酶功能检测方法的建立 | 第48-53页 |
| 5.1 仪器及试剂 | 第48-49页 |
| 5.1.1 仪器 | 第48页 |
| 5.1.2 试剂 | 第48-49页 |
| 5.2 试验方法 | 第49-51页 |
| 5.2.1 制备底物蛋白—错搭水蛭素（Scrambled Hirudin） | 第49页 |
| 5.2.2 利用高效液相色谱HPLC检测异构酶功能 | 第49-51页 |
| 5.3 试验结果及分析 | 第51-52页 |
| 5.4 讨论 | 第52-53页 |
| 全文总结 | 第53-54页 |
| 参考文献 | 第54-63页 |
| 缩略词 | 第63-64页 |
| 个人简历 | 第64-65页 |
| 致谢 | 第65页 |
