| 中文摘要 | 第4-6页 |
| Abstract | 第6-7页 |
| 第一章 前言 | 第11-19页 |
| 1.1 嵌合抗原受体的概念及其应用 | 第11-15页 |
| 1.1.1 嵌合抗原受体的结构 | 第11-14页 |
| 1.1.2 嵌合抗原受体修饰的 T 细胞杀伤原理 | 第14-15页 |
| 1.1.3 嵌合抗原受体修饰的 T 细胞应用现状 | 第15页 |
| 1.2 MUC1 作为免疫治疗靶点的研究 | 第15-17页 |
| 1.2.1 MUC1 的结构 | 第15-16页 |
| 1.2.2 MUC1 与肿瘤 | 第16页 |
| 1.2.3 靶向 MUC1 的免疫治疗 | 第16-17页 |
| 1.3 MUC1 与肝癌 | 第17-18页 |
| 1.4 本课题的研究目的和研究内容 | 第18-19页 |
| 第二章 靶向 MUC1 嵌合抗原受体的重组慢病毒载体构建 | 第19-37页 |
| 2.1 实验器材 | 第19-22页 |
| 2.1.1 实验仪器 | 第19-20页 |
| 2.1.2 实验材料 | 第20页 |
| 2.1.3 实验试剂 | 第20页 |
| 2.1.4 引物合成 | 第20-21页 |
| 2.1.5 实验试剂的配制 | 第21-22页 |
| 2.2 载体构建 | 第22-33页 |
| 2.2.1 pLV180-MUC1-CAR-F2A-hrGFP 质粒载体的构建 | 第22-27页 |
| 2.2.2 pLV180-G3MUC1-CAR-F2A-hrGFP 质粒载体的构建 | 第27-30页 |
| 2.2.3 pLV180-hrGFP 质粒载体的构建 | 第30-33页 |
| 2.2.4 质粒载体的大量提取 | 第33页 |
| 2.3 慢病毒的包装 | 第33-34页 |
| 2.3.1 辅助质粒 QJ001 和 QJ005 的大量抽提 | 第33-34页 |
| 2.3.2 293T 细胞的复苏与培养 | 第34页 |
| 2.3.3 慢病毒的包装与浓缩 | 第34页 |
| 2.3.4 慢病毒的浓缩 | 第34页 |
| 2.4 实验结果 | 第34-36页 |
| 2.4.1 载体构建结果 | 第34-35页 |
| 2.4.2 慢病毒包装结果 | 第35-36页 |
| 2.5 讨论 | 第36-37页 |
| 第三章 MUC1 特异性嵌合抗原受体对细胞株的遗传修饰 | 第37-44页 |
| 3.1 实验器材和试剂 | 第37-39页 |
| 3.1.1 实验所需材料 | 第37页 |
| 3.1.2 实验所需仪器 | 第37页 |
| 3.1.3 实验所需主要试剂 | 第37-38页 |
| 3.1.4 主要试剂配置方法 | 第38-39页 |
| 3.2 细胞培养及传代 | 第39页 |
| 3.3 慢病毒感染 Jurkat 细胞株 | 第39-40页 |
| 3.4 Western blot 检测 G3MUC1-CAR 和 MUC1-CAR 的表达 | 第40-41页 |
| 3.5 实验结果 | 第41-43页 |
| 3.5.1 慢病毒感染 Jurkat 细胞株实验结果 | 第41-43页 |
| 3.5.2 Western blot 检测 G3MUC1-CAR 和 MUC1-CAR 的表达实验结果 | 第43页 |
| 3.6 讨论 | 第43-44页 |
| 第四章 MUC1 特异性嵌合抗原受体修饰后的 JURKAT 细胞株的体外功能性实验 | 第44-50页 |
| 4.1 实验器材和试剂 | 第44-45页 |
| 4.1.1 实验所需材料 | 第44页 |
| 4.1.2 实验所需仪器 | 第44页 |
| 4.1.3 实验所需主要试剂 | 第44-45页 |
| 4.2 增殖实验 | 第45页 |
| 4.3 流式检测肝癌细胞 MUC1 表达 | 第45-46页 |
| 4.4 IL-2 的检测 | 第46页 |
| 4.5 杀伤实验 | 第46-47页 |
| 4.6 实验结果 | 第47-49页 |
| 4.6.1 增殖实验结果 | 第47页 |
| 4.6.2 流式检测肝癌细胞表达 MUC1 | 第47-48页 |
| 4.6.3 IL-2 的检测结果 | 第48-49页 |
| 4.6.4 杀伤实验结果 | 第49页 |
| 4.7 讨论 | 第49-50页 |
| 全文小结 | 第50-52页 |
| 参考文献 | 第52-57页 |
| 综述：嵌合抗原受体发展中遇到的挑战 | 第57-68页 |
| 参考文献 | 第64-68页 |
| 缩略词表 | 第68-69页 |
| 攻读学位期间本人出版或公开发表的论著、论文 | 第69-70页 |
| 致谢 | 第70-71页 |
