DEDICATION | 第4-5页 |
ACKNOWLEDGEMENT | 第5-7页 |
DECLARATION | 第7-8页 |
CERTIFICATION | 第8-14页 |
Abstract | 第14页 |
General Introduction | 第18-36页 |
Literature review | 第36-55页 |
Chapter 1 Virus source, multiplication, Isolation, purification, and Electron Microscopic study of the virus | 第55-65页 |
1 Introduction | 第55-65页 |
1.1 Life cycle of silkworms | 第55-57页 |
1.2 Materials | 第57-58页 |
1.3 Methods | 第58-60页 |
1.3.1 Procurement of Experimental material | 第58页 |
1.3.2 Virus source | 第58-59页 |
1.3.3 Method of virus infection | 第59页 |
1.3.4 Extraction of crude virus from diseased silkworms | 第59-60页 |
1.4 Virus purification | 第60-61页 |
1.5 Transmission Electron Microscopy | 第61页 |
1.6 Results and Discussion | 第61-65页 |
Chapter 2 Preparation of Polyclonal antibodies, Histopathological studies of the infected silkworms by Immunofluoresence study and Pyronine staining of the virus infected tissues | 第65-79页 |
2 Production of Polyclonal Antibodies | 第66-79页 |
2.1 Introduction | 第66-67页 |
2.2 Materials | 第67页 |
2.3 Methods | 第67-68页 |
2.4 Immunofluoresence study | 第68-72页 |
2.4.1 Introduction | 第68-69页 |
2.4.2 Materials | 第69页 |
2.4.3 Methods | 第69-72页 |
2.4.3.1 Artificial induction of the disease | 第69页 |
2.4.3.2 Sterilization of the equipments | 第69-70页 |
2.4.3.3 Processing of infected tissues for Immunofluoresence studies | 第70页 |
2.4.3.4 Sectioning samples in wax blocks | 第70-71页 |
2.4.3.5 Immunofloresence staining | 第71-72页 |
2.5 Results and Discussion | 第72-77页 |
2.6 Pyronine Methyl Green staining | 第77-78页 |
2.6.1 Introduction | 第77页 |
2.6.2 Materials | 第77页 |
2.6.3 Methods | 第77-78页 |
2.6.3.1 Reproduction of Methyl Green Pyronine stain | 第77-78页 |
2.6.3.2 Staining method | 第78页 |
2.7 Results and Discussion | 第78-79页 |
Chapter 3 Isolation and determination of Nucleic acid of the virus by Formaldehyde test and Gel Immunodiffusion test | 第79-87页 |
3 Extraction of RNA from virus | 第80-87页 |
3.1 Introduction | 第80-81页 |
3.2 Materials | 第81页 |
3.3 Methods | 第81-82页 |
3.3.1 Sterilization of Glassware and Equipment | 第81页 |
3.3.2 Extraction of RNA | 第81-82页 |
3.4 Analysis of virus Genome for DNA and RNA | 第82页 |
3.4.1 Introduction | 第82页 |
3.4.1.1 Diphenylamine test | 第82页 |
3.4.1.2 Orcinol test | 第82页 |
3.5 Materials | 第82页 |
3.6 Methods | 第82-83页 |
3.7 Results and Discussion | 第83页 |
3.8 Gel Immtmodiffusion Test | 第83-84页 |
3.9 Materials | 第84页 |
3.10 Methods | 第84页 |
3.11 Results and Discussion | 第84-85页 |
3.12 Formaldehyde test | 第85页 |
3.12.1 Introduction | 第85页 |
3.13 Materials | 第85页 |
3.14 Methods | 第85页 |
3.15 Results and Discussion | 第85-87页 |
Chapter 4 SDS-PAGE profile of the virus coat protein, Detection of virus by PCR, Partial sequencing of viral Genome | 第87-115页 |
4 SDS PAGE Electrophoresis | 第88-115页 |
4.1 Introduction | 第88-89页 |
4.1.1 Separation of proteins | 第88-89页 |
4.2 SDS PAGE of proteins | 第89-94页 |
4.2.1 Separation of proteins under denaturing conditions | 第89页 |
4.2.2 Determination of Molecular weights of proteins | 第89页 |
4.2.3 Continuous and discontinuous buffer systems | 第89-90页 |
4.2.4 Materials | 第90-91页 |
4.2.5 Methods | 第91-94页 |
4.2.5.1 Reagents used in Gels | 第91-92页 |
4.2.5.2 SDS PAGE of virus proteins | 第92页 |
4.2.5.3 Preparation of protein sample | 第92-93页 |
4.2.5.4 Electrophoresis | 第93-94页 |
4.3 Results and Discussion | 第94-97页 |
4.4 Detection of virus by PCR | 第97-99页 |
4.4.1 Introduction | 第97-99页 |
4.5 RT-PCR | 第99页 |
4.6 Materials | 第99页 |
4.7 Methods | 第99-100页 |
4.7.1 Extraction of RNA from the virus | 第99-100页 |
4.8 PCR | 第100-101页 |
4.8.1 Positive control RNA one step RT-PCR | 第100-101页 |
4.9 Nested RT-PCR | 第101-102页 |
4.10 Results and Discussion | 第102-104页 |
4.11 Partial Genome sequencing of the virus | 第104-105页 |
4.11.1 Introduction | 第104-105页 |
4.12 Materials | 第105-106页 |
4.13 Methods | 第106-107页 |
4.13.1 One step RT-PCR | 第106-107页 |
4.14 Results and Discussion | 第107-115页 |
5 References | 第115-128页 |