Abstract in Arabic | 第16-19页 |
Abstract in Chinese | 第19-21页 |
Abstract in English | 第21页 |
Chapter 1 A brief overview of reactive oxygen and antioxidant | 第24-35页 |
1.1 Introduction | 第24-25页 |
1.2 The nature of oxygen free radical | 第25-26页 |
1.3 The antioxidant defense system | 第26-28页 |
1.4 Regulation of antioxidant enzyme expression and activity | 第28-31页 |
1.5 Antioxidant enzymes in health and disease | 第31-32页 |
1.6 Antioxidant and foods | 第32-35页 |
Chapter 2 Review of related literature on SOD | 第35-60页 |
2.1 Introduction | 第35页 |
2.2 The properties and structures of SOD | 第35-41页 |
2.2.1 Cytosolic Cu/Zn SOD | 第36-37页 |
2.2.2 Periplasmic Cu/Zn SODs | 第37页 |
2.2.3 Mn-SOD | 第37-40页 |
2.2.4 Fe-SOD | 第40页 |
2.2.5 Extracellular SOD | 第40-41页 |
2.3 Assays for SOD activity | 第41-47页 |
2.3.1 Spectrophotometric Detection | 第44-45页 |
2.3.2 Detection SOD by PAGE | 第45-46页 |
2.3.3 Chemiluminescence Method | 第46-47页 |
2.3.4 Electron spin resonance spectroscopy (ESR) method | 第47页 |
2.4 The Isolation and Purification of SOD | 第47-55页 |
2.4.1 Cytosolic Cu/Zn SOD | 第47-49页 |
2.4.2 EC SOD | 第49-51页 |
2.4.3 Mn SOD | 第51-54页 |
2.4.4 Fe SOD | 第54-55页 |
2.5 Electrophoretic methods for the analysis of SODs | 第55-58页 |
2.5.1 Identification and quantitative analysis | 第55-57页 |
2.5.2 Analysis of isozymes | 第57-58页 |
2.6 The application of SOD | 第58页 |
2.7 The Objectives of This Research | 第58-60页 |
Chapter 3 Isolation of bacterial strains and detection of SOD | 第60-68页 |
3.1 Material and methods | 第62-65页 |
3.1.1 Material for bacterial isolation | 第62-63页 |
3.1.2 Chemicals | 第63页 |
3.1.3 Preparation of media | 第63页 |
3.1.4 Isolation of bacterial strains | 第63页 |
3.1.5 Preparation of cell extract | 第63-64页 |
3.1.6 SOD activity assay by photochemical method | 第64页 |
3.1.7 Detection of SOD activity in PAGE | 第64-65页 |
3.2 Results | 第65-68页 |
3.2.1 Isolation and collection of bacterial strains | 第65页 |
3.2.2 Detection of SOD produce by different bacterial strains | 第65-67页 |
3.2.3 Detection SOD activities by PAGE | 第67-68页 |
Chapter 4 Identification of bacterial strain 276 | 第68-77页 |
4.1 Material and methods | 第68-75页 |
4.1.1 Bacterial staining | 第68-69页 |
4.1.1.1 Gram staining | 第68-69页 |
4.1.1.2 Flagellum staining | 第69页 |
4.1.2 Motivity | 第69页 |
4.1.3 The color of colony on blood agar plate | 第69-70页 |
4.1.4 Biochemical Tests | 第70-75页 |
4.1.4.1 Oxidase | 第70页 |
4.1.4.2 Catalase | 第70页 |
4.1.4.3 Oxygen/fomentation (O/F) test | 第70-71页 |
4.1.4.4 IMViC Test | 第71-72页 |
A. Indole production | 第71页 |
B. Methyl-red | 第71页 |
C. Vogas-Proskauer (V-P) | 第71-72页 |
4.1.4.4 Citrate utilization | 第72页 |
4.1.4.5 Hydrolysis | 第72-74页 |
A. Starch Hydrolysis | 第72页 |
B. Lipid Hydrolysis | 第72-73页 |
C. Gelatin | 第73页 |
D. Esculin | 第73页 |
E. Urea | 第73页 |
F. Dnase | 第73-74页 |
4.1.4.6 Acid production from carbohydrate | 第74页 |
4.1.4.7 ON PG | 第74页 |
4.1.4.8 Arginine | 第74页 |
4.1.4.9 Lysine | 第74页 |
4.1.4.10 Ornithine | 第74-75页 |
4.2 Results | 第75-76页 |
4.2.1 Gram staining | 第75页 |
4.2.2 The color of colony on blood agar plate | 第75页 |
4.2.3 Biochemical tests | 第75-76页 |
4.4 Conclusion | 第76-77页 |
Chapter 5 The Purification and the property study of SOD produced by Stenotrophomonas maltophilia276 | 第77-96页 |
5.1 Material and methods | 第78-85页 |
5.1.1 The production of SOD cultured in different media | 第78页 |
5.1.2 The growth of bacteria and the production of SOD | 第78页 |
5.1.3 Preparation of cell extract | 第78-79页 |
5.1.4 Precipitation of SOD by ammonium sulfate | 第79-80页 |
5.1.5 Ion-exchange chromatography | 第80页 |
5.1.6 Gel filtration chromatography | 第80页 |
5.1.7 Protein determinations by Bradford assay | 第80-81页 |
A. Preparation of Bradford stock solution | 第80页 |
B. Preparation of Bradford working buffer | 第80-81页 |
C. Assay procedure | 第81页 |
5.1.8 SOD Activity assay by photochemical method | 第81页 |
5.1.9 Electrophoresis and Detection of SOD | 第81-83页 |
5.1.9.1 SDS polyacrylamide gel Electrophoresis (SDS-PAGE) | 第81-83页 |
5.1.9.2 Active gel detection of SOD | 第83页 |
5.1.10 The affect of chemical inhibitors on SOD activity | 第83-84页 |
5.1.11 The thermal stability of SOD | 第84页 |
5.1.12 The Stability of SOD in pH | 第84页 |
5.1.13 The Stability of SOD in Illumination | 第84-85页 |
5.2 Results | 第85-96页 |
5.2.1 The production of SOD cultured in different media | 第85页 |
5.2.2 The growth of bacteria and production of SOD | 第85-86页 |
5.2.3 Precipitation of SOD by ammonium sulfates | 第86-87页 |
5.2.4 Purification of SOD | 第87-91页 |
5.2.5.1 Ion-exchange chromatography | 第88页 |
5.2.5.2 Gel filtration chromatograph | 第88-89页 |
5.2.5.3 SDS-PAGE Electrophoresis of SOD | 第89-90页 |
5.2.5.4 Native PAGE electrophoresis and activity detection of SOD | 第90-91页 |
5.2.5 Effect of chemical inhibitors on Mn-SOD activity | 第91页 |
4.2.6 Identification of Mn-SOD in the active gel | 第91-92页 |
5.2.7 The stability of SOD in pH | 第92-93页 |
5.2.8 The thermal stability of SOD | 第93-94页 |
5.2.9 The Stability of SOD in Illumination | 第94-96页 |
Chapter 6 Cloning and Analysis of SOD Gene in Stenotrophomonas maltophilia 276 | 第96-107页 |
6.1 Materials and methods | 第96-101页 |
6.1.1 The preparation of Genomic DNA from S. maltophilia 276 | 第96-97页 |
6.1.2 The Probe construction and PCR | 第97-98页 |
6.1.3 The cloning of PCR products | 第98-99页 |
6.1.3.1 Preparation of competent cells | 第98页 |
6.1.3.2 DNA ligation | 第98-99页 |
6.1.3.3 DNA Transformatio | 第99页 |
6.1.4 The isolation and purification of plasmid DNA | 第99-101页 |
6.1.4 DNAA sequencing | 第101页 |
6.2 Results | 第101-107页 |
Chapter 7 Discussion | 第107-113页 |
Chapter 8 Conclusion | 第113-115页 |
References | 第115-133页 |
10 Equipment and chemicals used in this study | 第133-136页 |
10.1 Apparatus and equipment | 第133-134页 |
10.2 Chemicals | 第134-136页 |
Appendix | 第136-139页 |