| 摘要 | 第4-6页 |
| Abstract | 第6-7页 |
| 第一章 引言 | 第15-20页 |
| 1.1 国内外研究现状 | 第15-17页 |
| 1.2 研究的目的和意义 | 第17页 |
| 1.3 研究内容与技术路线 | 第17-19页 |
| 1.3.1 猪流行性腹泻病毒弱毒株感染性cDNA克隆的构建与病毒拯救 | 第17-18页 |
| 1.3.2 猪流行性腹泻病毒强毒株感染性cDNA克隆的构建与病毒拯救 | 第18页 |
| 1.3.3 猪流行性腹泻病毒感染性克隆拯救病毒的致病性分析 | 第18-19页 |
| 1.3.4 猪流行性腹泻病毒S基因突变对弱毒株体外增殖和致病性的影响 | 第19页 |
| 1.4 研究目标 | 第19-20页 |
| 第二章 猪流行性腹泻病毒弱毒株感染性cDNA克隆的构建与病毒拯救 | 第20-48页 |
| 2.1 前言 | 第20-21页 |
| 2.2 材料与方法 | 第21-36页 |
| 2.2.1 材料 | 第21-23页 |
| 2.2.2 方法 | 第23-36页 |
| 2.3 结果与分析 | 第36-46页 |
| 2.3.1 猪流行性腹泻病毒的分离 | 第36-37页 |
| 2.3.2 PEDV分离毒株的IFA鉴定 | 第37-38页 |
| 2.3.3 PEDV分离毒株的传代与毒价测定 | 第38页 |
| 2.3.4 PEDV分离毒株基因组片段的RT-PCR扩增 | 第38-39页 |
| 2.3.5 PEDV分离毒株的序列比对及演化分析 | 第39-43页 |
| 2.3.6 PEDV分离毒株CHM2013全基因组的RT-PCR扩增及融合PCR | 第43-44页 |
| 2.3.7 CHM2013全长cDNA克隆质粒的构建 | 第44页 |
| 2.3.8 病毒拯救 | 第44-45页 |
| 2.3.9 拯救病毒的免疫荧光鉴定 | 第45页 |
| 2.3.10 拯救病毒遗传标记鉴定 | 第45-46页 |
| 2.3.11 拯救病毒的毒价测定 | 第46页 |
| 2.4 讨论 | 第46-47页 |
| 2.5 小结 | 第47-48页 |
| 第三章 猪流行性腹泻病毒强毒株感染性cDNA克隆的构建与病毒拯救 | 第48-61页 |
| 3.1 引言 | 第48-49页 |
| 3.2 材料与方法 | 第49-55页 |
| 3.2.1 材料 | 第49-51页 |
| 3.2.2 方法 | 第51-55页 |
| 3.3 结果与分析 | 第55-58页 |
| 3.3.1 BJ-2011-C全基因组的RT-PCR扩增及融合PCR | 第55页 |
| 3.3.2 pBAC-BJ-2011-C全长cNDA质粒的构建 | 第55-56页 |
| 3.3.3 病毒拯救 | 第56页 |
| 3.3.4 拯救病毒的免疫荧光鉴定 | 第56-57页 |
| 3.3.5 拯救病毒遗传标记鉴定 | 第57页 |
| 3.3.6 拯救病毒的毒价测定 | 第57-58页 |
| 3.4 讨论 | 第58-60页 |
| 3.5 小结 | 第60-61页 |
| 第四章 猪流行性腹泻病毒感染性克隆拯救病毒的致病性分析 | 第61-72页 |
| 4.1 引言 | 第61页 |
| 4.2 材料与方法 | 第61-66页 |
| 4.2.1 材料 | 第61-63页 |
| 4.2.2 方法 | 第63-66页 |
| 4.3 结果与分析 | 第66-70页 |
| 4.3.1 拯救病毒体外增殖动态 | 第66-67页 |
| 4.3.2 拯救病毒的致病性分析 | 第67-70页 |
| 4.4 讨论 | 第70-71页 |
| 4.5 小结 | 第71-72页 |
| 第五章 猪流行性腹泻病毒S基因突变对弱毒株增殖和致病性的影响 | 第72-90页 |
| 5.1 引言 | 第72-73页 |
| 5.2 材料与方法 | 第73-82页 |
| 5.2.1 材料 | 第73-76页 |
| 5.2.2 方法 | 第76-82页 |
| 5.3 结果与分析 | 第82-87页 |
| 5.3.1 PEDV毒株S基因编码氨基酸序列比对 | 第82-83页 |
| 5.3.2 单个突变各碱基片段的全长cDNA克隆构建、病毒拯救及鉴定 | 第83-84页 |
| 5.3.3 同时置换突变区域GENQGVN和SEHS的全长cDNA构建、病毒拯救及鉴定 | 第84-85页 |
| 5.3.4 突变拯救病毒的毒价测定 | 第85-86页 |
| 5.3.5 突变拯救病毒的体外增殖特性 | 第86页 |
| 5.3.6 突变拯救病毒的致病性分析 | 第86-87页 |
| 5.3.7 突变拯救病毒核酸含量测定 | 第87页 |
| 5.4 讨论 | 第87-89页 |
| 5.5 小结 | 第89-90页 |
| 第六章 结论 | 第90-91页 |
| 第七章 创新点 | 第91-92页 |
| 第八章 文献综述 | 第92-102页 |
| 8.1 猪流行性腹泻病毒的基因组结构与蛋白 | 第92-93页 |
| 8.1.1 PEDV基因组 | 第92页 |
| 8.1.2 PEDV的非结构蛋白 | 第92-93页 |
| 8.1.3 PEDV的结构蛋白 | 第93页 |
| 8.2 猪流行性腹泻病毒的变异与演化 | 第93-97页 |
| 8.2.1 PEDV经典毒株 | 第93-94页 |
| 8.2.2 高毒力PEDV变异毒株 | 第94-96页 |
| 8.2.3 PEDV重组毒株 | 第96页 |
| 8.2.4 PEDV S基因长片段缺失毒株 | 第96-97页 |
| 8.3 猪流行性腹泻病毒致病的分子基础 | 第97-98页 |
| 8.4 冠状病毒的感染与复制 | 第98-100页 |
| 8.4.1 吸附及入侵 | 第98-99页 |
| 8.4.2 复制酶基因的表达 | 第99页 |
| 8.4.3 复制及转录 | 第99页 |
| 8.4.4 组装及释放 | 第99-100页 |
| 8.5 冠状病毒的反向遗传学与应用 | 第100-101页 |
| 8.6 展望 | 第101-102页 |
| 参考文献 | 第102-117页 |
| 致谢 | 第117-119页 |
| 个人简介 | 第119页 |
