| 摘要 | 第3-4页 |
| Abstract | 第4-5页 |
| 第一章 前言 | 第9-21页 |
| 1.1 缩节安对棉花侧根发育的调控 | 第9-10页 |
| 1.2 侧根发育的研究进展 | 第10-12页 |
| 1.2.1 侧根发育的过程 | 第10页 |
| 1.2.2 植物激素对侧根发育的机制 | 第10-12页 |
| 1.3 IAA的合成与运输 | 第12-16页 |
| 1.3.1 IAA的合成 | 第12页 |
| 1.3.2 结合态IAA的研究进展 | 第12-14页 |
| 1.3.3 IAA的极性运输 | 第14-16页 |
| 1.4 免疫化学定位技术在植物激素研究上的应用 | 第16-18页 |
| 1.4.1 前处理 | 第17页 |
| 1.4.2 植物激素的免疫化学定位 | 第17-18页 |
| 1.5 免疫调节 | 第18-19页 |
| 1.6 分子对接 | 第19-20页 |
| 1.7 目的和意义 | 第20-21页 |
| 第二章 DPC浸种对棉花幼苗表型的影响 | 第21-35页 |
| 2.1 实验材料和方法 | 第21-24页 |
| 2.1.0 实验材料培养 | 第21页 |
| 2.1.1 实验试剂和溶液 | 第21-22页 |
| 2.1.2 处理与取样方法 | 第22页 |
| 2.1.3 测定方法 | 第22-23页 |
| 2.1.4 侧根原基统计 | 第23页 |
| 2.1.5 可见侧根扫描统计 | 第23页 |
| 2.1.6 石蜡切片方法 | 第23-24页 |
| 2.1.7 统计方差分析 | 第24页 |
| 2.2 结果分析 | 第24-33页 |
| 2.2.1 DPC对棉花幼苗形态的影响 | 第24-29页 |
| 2.2.2 DPC对侧根原基发育过程的影响 | 第29-32页 |
| 2.2.3 GA3浸种对棉花幼苗形态的影响 | 第32-33页 |
| 2.3 本章小结 | 第33-35页 |
| 第三章 DPC对侧根引发区胚根IAA等激素的含量及IAA相关基因和GA合成代谢途径的调控 | 第35-59页 |
| 3.1 试验材料与方法 | 第35-41页 |
| 3.1.1 实验材料培养 | 第35页 |
| 3.1.2 实验试剂和溶液 | 第35-36页 |
| 3.1.3 HPLC-MS测定ABA、IAA含量 | 第36-37页 |
| 3.1.4 酶联免疫测定(ELISA)方法 | 第37页 |
| 3.1.5 IAA免疫组化方法 | 第37-38页 |
| 3.1.6 提取总RNA与反转录 | 第38-39页 |
| 3.1.7 定量Real-time PCR | 第39-41页 |
| 3.2 实验结果 | 第41-57页 |
| 3.2.1 DPC对IAA含量和分布的影响 | 第41-44页 |
| 3.2.2 DPC对棉花幼苗IAA结合态含量的影响 | 第44-45页 |
| 3.2.3 DPC对IAA相关基因表达的调控 | 第45-52页 |
| 3.2.4 DPC对棉花幼苗ABA、Z/ZR和GA含量的影响 | 第52-54页 |
| 3.2.5 DPC对GA相关基因表达的调控 | 第54-57页 |
| 3.3 本章小结 | 第57-59页 |
| 第四章 IAA酰胺水解酶GhIAR3.1的克隆、表达与鉴定及单克隆抗体制备 | 第59-70页 |
| 4.1 实验材料 | 第59-60页 |
| 4.1.1 实验材料 | 第59页 |
| 4.1.2 实验试剂 | 第59-60页 |
| 4.1.3 实验仪器 | 第60页 |
| 4.2 实验方法 | 第60-64页 |
| 4.2.1 表达载体的构建 | 第60-61页 |
| 4.2.2 pGEX-IAR3.1的诱导表达 | 第61页 |
| 4.2.3 pGEX-GhIAR3.1重组蛋白的纯化与蛋白酶切 | 第61-62页 |
| 4.2.4 pGEX-GhIAR3.1生物功能验证 | 第62页 |
| 4.2.5 GhIAR3.1兔多抗制备 | 第62页 |
| 4.2.6 GhIAR3.1鼠单克隆制备 | 第62-63页 |
| 4.2.7 血清效价测定 | 第63-64页 |
| 4.2.8 样品测定 | 第64页 |
| 4.3 结果分析 | 第64-69页 |
| 4.3.1 表达载体的构建 | 第64页 |
| 4.3.2 重组蛋白不同IPTG诱导表达 | 第64-65页 |
| 4.3.3 重组蛋白的亲和纯化和去掉标签 | 第65-66页 |
| 4.3.4 重组抗体的生物学功能 | 第66页 |
| 4.3.5 兔多抗血清和小鼠多抗血清效价测定 | 第66-67页 |
| 4.3.6 单克隆抗体性质效价检测与标准曲线建立 | 第67-68页 |
| 4.3.7 样品测定 | 第68-69页 |
| 4.4 本章小结 | 第69-70页 |
| 第五章 结合态ABA单链抗体的制备、表达及生物学活性鉴定 | 第70-83页 |
| 5.1 材料与方法 | 第70-73页 |
| 5.1.1 杂交瘤与质粒 | 第70页 |
| 5.1.2 VH VL基因的PCR扩增 | 第70页 |
| 5.1.3 ScFv基因的构建 | 第70-71页 |
| 5.1.4 ScFv基因与pMAL-c2x重组 | 第71页 |
| 5.1.5 ScFv蛋白的重组表达 | 第71页 |
| 5.1.6 蛋白的纯化 | 第71-72页 |
| 5.1.7 ScFv与抗原结合活性的鉴定 | 第72页 |
| 5.1.8 竞争抑制实验 | 第72页 |
| 5.1.9 S12B8单链抗体的同源建模与分子对接 | 第72-73页 |
| 5.2 结果分析 | 第73-82页 |
| 5.2.1 VH和VL序列分析与S12B8 scFv基因的扩增 | 第73-75页 |
| 5.2.2 S12B8抗体的表达 | 第75-76页 |
| 5.2.3 S12B8抗体的纯化 | 第76页 |
| 5.2.4 S12B8活性分析 | 第76-77页 |
| 5.2.5 同源建模与模型验证 | 第77-78页 |
| 5.2.6 分子对接结果 | 第78-82页 |
| 5.3 本章小结 | 第82-83页 |
| 第六章 结论与讨论 | 第83-87页 |
| 6.1 结论 | 第83-84页 |
| 6.1.1 DPC浸种处理促进侧根发育及其激素机制的研究 | 第83-84页 |
| 6.1.2 结合态ABA单链抗体的研究 | 第84页 |
| 6.2 讨论 | 第84-87页 |
| 6.2.1 DPC浸种对棉花幼苗表型的影响 | 第84页 |
| 6.2.2 DPC浸种对棉花幼苗侧根发育的激素互作 | 第84-85页 |
| 6.2.3 基于分子对接的氨基酸突变分析 | 第85-86页 |
| 6.2.4 蛋白外源表达技术 | 第86-87页 |
| 参考文献 | 第87-100页 |
| 致谢 | 第100-101页 |
| 个人简介 | 第101页 |
