| 摘要 | 第1-6页 |
| ABSTRACT | 第6-8页 |
| 目录 | 第8-10页 |
| 第一章 前言 | 第10-25页 |
| 1 酸性成纤维细胞生长因子国内外研究现状 | 第10-12页 |
| ·aFGF研究背景 | 第10页 |
| ·aFGF的生物学效应 | 第10页 |
| ·aFGF的应用瓶颈 | 第10-11页 |
| ·aFGF的研究基础 | 第11-12页 |
| 2 胚胎干细胞 | 第12-16页 |
| ·胚胎干细胞的生物学特性 | 第12-13页 |
| ·胚胎干细胞的形态生化特性 | 第13页 |
| ·胚胎干细胞的增殖分化 | 第13页 |
| ·三胚层形成与分化 | 第13-15页 |
| ·ES细胞发育各阶段分子标记物 | 第15-16页 |
| 3 小鼠胚胎干细胞体外发育分化模型在药物生殖毒性研究中的应用 | 第16-23页 |
| ·小鼠胚胎干细胞实验模型 | 第16-19页 |
| ·胚胎干细胞实验方法 | 第19-23页 |
| 4 研究目的和技术路线 | 第23-24页 |
| 5 技术路线 | 第24-25页 |
| 第二章 实验与方法 | 第25-39页 |
| 1 实验材料 | 第25-27页 |
| ·实验动物 | 第25页 |
| ·细胞株 | 第25页 |
| ·实验仪器、设备 | 第25-26页 |
| ·实验试剂 | 第26-27页 |
| 2 主要试剂的配制 | 第27-28页 |
| 3 实验方法 | 第28-39页 |
| ·细胞培养 | 第28-32页 |
| ·ES细胞生长曲线的绘制 | 第32页 |
| ·小鼠胚胎干细胞的鉴定 | 第32-34页 |
| ·建立的胚胎干细胞实验模型(EST)有效性验证 | 第34-35页 |
| ·以EST为模型评价aFGF_(14-154)的生殖发育毒性 | 第35-36页 |
| ·aFGF_(14-154)对小鼠ES细胞分化过程不同基因(组织特异性标记物)表达的影响 | 第36-38页 |
| ·数据处理方法 | 第38-39页 |
| 第三章 实验结果 | 第39-58页 |
| 1 小鼠ES细胞模型的建立 | 第39-43页 |
| ·昆明种小鼠胚胎成纤维细胞(MEF)的原代提取 | 第39页 |
| ·小鼠ES细胞的培养 | 第39-40页 |
| ·ES细胞的生长曲线 | 第40页 |
| ·对小鼠胚胎干细胞株C57BL/6进行了系统的鉴定 | 第40-43页 |
| 2 验证了所建立的胚胎干细胞试验模型发育毒性判断的准确性 | 第43-47页 |
| ·受试物细胞毒性评价 | 第43-45页 |
| ·受试物对分化影响评价 | 第45-47页 |
| ·受试物发育毒性的判定结果 | 第47页 |
| 3 aFGF胚胎毒性的研究 | 第47-52页 |
| ·应用EST模型对aFGF细胞毒性的检测(IC_(50)) | 第47-48页 |
| ·毒性剂量下的形态学变化 | 第48-49页 |
| ·流式细胞周期结果 | 第49-51页 |
| ·aFGF抑制胚胎干细胞体外分化的作用 | 第51-52页 |
| ·aFGF胚胎毒性判断 | 第52页 |
| 4 aFGF对小鼠ES细胞分化过程组织特异性标记物表达的影响 | 第52-58页 |
| ·RT-PCR分析ES细胞发育不同阶段特异性基因的表达 | 第52-55页 |
| ·细胞免疫荧光检测分化的三个胚层特异性蛋白的表达 | 第55-58页 |
| 第四章 讨论 | 第58-64页 |
| 1 药物发育毒性体外检测模型应用现状 | 第58-59页 |
| 2 ES细胞特异性组织标记物的检测及其意义 | 第59-61页 |
| 3 aFGF胚胎毒性的评价 | 第61-64页 |
| 结论 | 第64-65页 |
| 展望 | 第65-67页 |
| 参考文献 | 第67-75页 |
| 附录 | 第75-77页 |
| 英文缩略词表 | 第75-76页 |
| 攻硕期间发表论文 | 第76-77页 |
| 致谢 | 第77页 |
